枳實(shí)改善功能性消化不良大鼠胃動(dòng)力障礙的機(jī)制研究*

張正選，李 鮮

1. 河南省職工醫(yī)院消化內(nèi)科 (鄭州450003)，2.河南省中醫(yī)院消化科(鄭州450000)

主題詞 消化不良/中醫(yī)藥療法 枳實(shí)/治療應(yīng)用 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 小鼠 血管活性腸肽

功能性消化不良(Functional dyspepsia，F(xiàn)D) 是指由胃和十二指腸功能紊亂引起的臨床上常見(jiàn)的胃腸功能性疾病，上腹痛、上腹灼熱感、惡心、噯氣、餐后飽脹為其主要臨床表現(xiàn)[1-2]，發(fā)病率日漸上升。目前現(xiàn)代醫(yī)學(xué)對(duì)于FD的發(fā)病機(jī)制尚不十分清楚，但胃動(dòng)力障礙、近端胃舒張功能受損、幽門(mén)螺旋桿菌感染、心理因素、內(nèi)臟高敏感是FD的發(fā)病機(jī)制之一[3]。促胃動(dòng)力藥物可以改善FD患者的部分癥狀，是其重要的治療措施。中焦脾氣虛弱，胃失和降是本病病機(jī)所在。枳實(shí)藥理作用廣泛，具有破氣除痞、化痰消積之功效，是消化處方中的常用藥材。現(xiàn)代藥理中枳實(shí)可增加胃腸收縮節(jié)律和奧狄括約肌張力。枳實(shí)中幾種黃酮類(lèi)成分橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷均可抑制平滑肌收縮，加快功能性消化不良大鼠的胃排空和小腸推進(jìn)速度，其中橙皮苷通過(guò)其增加胃動(dòng)素(MTL)的分泌來(lái)促進(jìn)胃排空和小腸推進(jìn)[4]。因此，本研究通過(guò)在體及離體大鼠實(shí)驗(yàn)探討枳實(shí)對(duì)FD大鼠胃排空功能MTL、VIP等相關(guān)胃腸激素水平的影響，為枳實(shí)改善功能性消化不良大鼠胃動(dòng)力障礙機(jī)制提供理論依據(jù)。

材料與方法

1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 健康普通級(jí) SD 大鼠 70只，雌雄各半，體質(zhì)量(20±2) g，由北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供，許可證號(hào)：SYXK(京)2012-0036。

2 藥物及試劑 枳實(shí)使用中藥顆粒劑，購(gòu)于南京中山制藥有限公司(國(guó)藥準(zhǔn)字Z10970017)，大鼠枳實(shí)劑量1.07g/(kg·d)。

3 實(shí)驗(yàn)方法 取小鼠 80 只，雌雄各半，自由進(jìn)食進(jìn)水。隨機(jī)分為空白對(duì)照組和觀察組，觀察組予大鼠枳實(shí)顆粒劑，按1.07g/(kg·d)枳實(shí)劑量加入蒸餾水，制成濃度為0.11 g/m1的混懸液，2 ml/d灌胃，連續(xù)給藥14 d。空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水，連續(xù)14 d。

4 觀察指標(biāo)

4.1 血清 MTL 和 VIP 的測(cè)定:各組動(dòng)物于用藥結(jié)束前1 d，不禁水，禁食18 h,麻醉固定，下腔靜脈取血4 ml，分別置于抗凝真空采血管中，4 ℃，3000 rpm離心10 min，取血清，置于-20 ℃冰箱中保存，待測(cè)。采用酶聯(lián)免疫分析方法進(jìn)行測(cè)定，步驟按試劑盒說(shuō)明書(shū)的方法進(jìn)行。酶聯(lián)免疫試劑盒購(gòu)自上海恒遠(yuǎn)生化試劑有限公司。

4.2 胃動(dòng)力指標(biāo)測(cè)定:末次給藥后禁食不禁水，24 h后均灌胃給予營(yíng)養(yǎng)性半固體糊劑3 ml/kg，記錄所灌半固體糊重。各組動(dòng)物于20 min后立即斷頭處死，賁門(mén)和幽門(mén)處結(jié)扎，剪取腸管，測(cè)幽門(mén)至回盲部的小腸總長(zhǎng)度，“墨汁在腸內(nèi)推進(jìn)距離”為從幽門(mén)至墨汁前沿的距離作為墨汁在腸內(nèi)推進(jìn)距離，小腸推進(jìn)比 = 墨汁推進(jìn)長(zhǎng)度/小腸全長(zhǎng)×100 %。沿胃大彎處剪開(kāi)胃，取胃稱(chēng)質(zhì)量，生理鹽水沖洗濾紙拭干后稱(chēng)胃凈質(zhì)量，計(jì)算胃胃殘留率，胃中殘留率 =(胃全重-胃凈重)/所灌半固體糊 ×100%；胃排空率 =[1-(胃全質(zhì)量-胃凈質(zhì)量)/ 灌胃量]×100 %。

結(jié) 果

1 枳實(shí)對(duì)大鼠血清MTL 和 VIP含量的影響 觀察組大鼠血漿MTL含量明顯高于正常對(duì)照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；與正常對(duì)照組相比，觀察組大鼠血漿VIP含量明顯降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表1。

表1 枳實(shí)對(duì)大鼠血清MTL 和 VIP含量的影響(pg/ml)

注：與對(duì)照組比較，?P<0.05

2 兩組大鼠胃排空率、小腸推進(jìn)比、胃殘留率比較 觀察組大鼠胃排空率、小腸推進(jìn)比明顯高于對(duì)照組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；觀察組大鼠胃殘留率明顯少于對(duì)照組大鼠，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見(jiàn)表2。

表2 兩組大鼠胃排空率、小腸推進(jìn)比、胃殘留率比較(%)

注：與對(duì)照組比較，?P<0.05

討 論

中醫(yī)學(xué)中，F(xiàn)D屬于 “胃脘痛”、“痞滿”、“積滯”等范疇，臨床多見(jiàn)脾胃虛弱型，病位在胃腑，與勝臟密切相關(guān)，認(rèn)為中焦氣機(jī)不利，氣機(jī)壅滯結(jié)于胃脘之處是本病病機(jī)所在。主要分為脾虛氣滯、肝胃不和、脾胃濕熱、脾胃虛寒、寒熱錯(cuò)雜[5]。患者多因感受外邪入侵，邪氣入里，脾運(yùn)無(wú)力,則阻滯中焦,脾胃之氣升降不利。素體稟賦不足、脾胃功能不足，引起脹滿。脾胃失調(diào)，傷及脾胃,損傷中陽(yáng)。飲食不慎、食谷不化,阻滯胃脘,升降失司,胃氣痞塞。情志失和，損傷氣機(jī), 氣機(jī)逆亂,升降不利,形成痞滿。致脾胃虛弱，運(yùn)化無(wú)權(quán)，水谷精微輸布受阻，氣血化生無(wú)源，水濕內(nèi)生、脾氣受困，氣機(jī)阻滯中焦所致[6]。中醫(yī)理論認(rèn)為，脾主運(yùn)化，胃主受納，相互制約,協(xié)調(diào)互用，脾升則健，胃降則和，二者升降協(xié)調(diào)方可使脾胃能正常受納、運(yùn)化水谷。若脾運(yùn)無(wú)權(quán)，則運(yùn)化無(wú)力，故見(jiàn)頭暈乏力等癥；胃失和降，則濁氣不降，故見(jiàn)餐后飽脹不適、上腹燒灼感、脹滿、噯氣、反酸等癥[7]。中醫(yī)認(rèn)為本病多因脾胃受損，中焦不和，脾失健運(yùn)，升降失職。故本病的病機(jī)關(guān)鍵在脾氣得以健運(yùn)，胃氣得以和降，氣機(jī)得以暢順，則臟腑通安，化生有源，病癥乃愈[8]，臨床治療當(dāng)以健脾和胃,理氣降逆為主。西藥治療FD臨床效果不十分顯著，病情易反復(fù)，而中藥在治療FD具有絕對(duì)優(yōu)勢(shì)，效果顯著且副作用小，減輕患者的心理負(fù)擔(dān)。枳實(shí)具有破氣消積、化痰散痞之功效，副作用小，治療FD臨床效果顯著[9]。枳實(shí)的化學(xué)成分主要為黃酮類(lèi)成分、揮發(fā)油類(lèi)成分、生物堿類(lèi)成分及腺苷、檸檬甘素等其他成份，研究證實(shí)，理氣行滯、祛痰消積是黃酮類(lèi)成分的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，其中的橙皮苷、新橙皮苷、柚皮苷具有胃排空和小腸推進(jìn)作用[10]。

自主神經(jīng)系統(tǒng)和體液因素均可調(diào)節(jié)胃腸運(yùn)動(dòng)。功能性消化不良大鼠胃腸運(yùn)動(dòng)減弱，胃黏膜屏障被破壞，引起一系列胃腸肽的異常分泌[11]，血管活性物質(zhì)的合成和分泌改變，導(dǎo)致胃黏膜血管痙攣引起胃黏膜缺血，細(xì)胞代謝性酸中毒，細(xì)胞功能及代謝發(fā)生紊亂等一系列變化，最終導(dǎo)致胃腸黏膜細(xì)胞的損傷加重，胃黏膜的屏障功能受損。作為一種新發(fā)現(xiàn)的由腸嗜鉻細(xì)胞分泌的胃腸激素MTL可通過(guò)增加細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度促進(jìn)胃腸運(yùn)動(dòng)，將胃腸內(nèi)容物向遠(yuǎn)端推進(jìn)并防止其逆流，對(duì)消化間期胃腸道移行性收縮有重要作用，可引起胃腸蠕動(dòng)和腸道分節(jié)運(yùn)動(dòng)，加快胃排空[12-13]。血管活性腸肽是重要的肽類(lèi)神經(jīng)遞質(zhì)之一，保護(hù)腸黏膜，調(diào)節(jié)胃腸吸收。下調(diào)血管活性腸肽水平可增強(qiáng)大鼠胃腸平滑肌收縮，縮短食物在胃腸內(nèi)停留時(shí)間，破壞電解質(zhì)平衡，導(dǎo)致吸收障礙[14]。本文研究中，觀察組大鼠血清MTL 和 VIP水平明顯高于對(duì)照組，提示枳實(shí)可調(diào)節(jié)胃腸泌酸功能及胃腸動(dòng)力，增加胃動(dòng)素的分布增加及減少血管活性腸肽，進(jìn)而增加胃腸平滑肌的收縮強(qiáng)度和收縮持續(xù)時(shí)間[15]。

現(xiàn)代藥理研究顯示，枳實(shí)中的黃酮甙可大鼠平滑肌的非生理性收縮，可對(duì)抗乙酰膽堿、組織胺引起的痙攣性收縮[16]，進(jìn)而抑制提高胃腸電活動(dòng)，使胃腸平滑肌張力和運(yùn)動(dòng)功能增強(qiáng)。本文研究證實(shí)，觀察組大鼠的胃排空率、小腸推進(jìn)比明顯高于對(duì)照組大鼠,胃殘留率低于對(duì)照組大鼠。代永霞等研究枳實(shí)厚樸水煎液對(duì)小鼠胃排空的影響，結(jié)果顯示，單用觀察組胃中殘留率明顯低于對(duì)照組，枳實(shí)厚樸1∶1組胃中殘留率明顯低于對(duì)照組和單用觀察組，枳實(shí)可興奮胃腸平滑肌，增高胃電頻率，枳實(shí)、厚樸配伍可進(jìn)胃腸蠕動(dòng)，提高胃腸動(dòng)力，促進(jìn)胃排空，降低胃殘留率，與本研究結(jié)果一致[17]。黃愛(ài)華等應(yīng)用枳實(shí)黃酮后，新橙皮苷組和柚皮苷組的MTL低于對(duì)照組，橙皮苷組和正常對(duì)照組低于模型組，新橙皮苷組、柚皮苷組和橙皮苷組VIP高于正常對(duì)照組，正常對(duì)照組VIP低于模型組，表明枳實(shí)可增加MTL的分泌，減少VIP，改善功能性消化不良大鼠的胃排空[18]，與本研究結(jié)果一致。