人腦膠質瘤培養組織對化療藥物的敏感性

徐立新,張 偉,師忠芳,董麗萍,閆 旭,袁 芳

腦膠質瘤是最常見的中樞神經系統惡性腫瘤，臨床采用手術、放療和化療的綜合治療，有效化療是延長術后腦膠質瘤患者生命的必要手段之一[1]。但由于血腦屏障和腫瘤耐藥現象的存在，化療藥物的療效仍然不盡如人意[2]，術后腦膠質瘤患者選擇適合的化療藥物對提高療效、減輕不良反應有重要意義。本研究用體外藥敏檢測法比較了腦膠質瘤標本對臨床5種常用化療藥的敏感性，并分析了其與患者病理分級的相關性；電鏡觀察了膠質瘤敏感藥物標本的超微結構，對作用機制進行初步探討，為術后膠質瘤患者選擇合適的化療方案提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料 112例標本選自2013-01至2015-12北京天壇醫院腦膠質瘤患者手術切除的腦膠質瘤組織。男74例，女38例；年齡12～71歲，平均(42.95±11.79)歲；初發97例，復發15例。按照WHO腦膠質瘤分類標準：Ⅱ級53例，Ⅲ級20例，Ⅳ級39例。

1.2 試劑 組織塊培養液為含10%胎牛血清的RPMI-1640培養液。化療藥物尼莫司汀(ACNU)、順鉑(DDP)、替莫唑胺(TMZ)、長春新堿(VCR)、替尼泊甙(VM26)五種單獨用藥及DDP+VM26組合用藥，所試驗藥物濃度均為血漿峰濃度，分別為0.7、0.25、0.5、2.0、0.05 mg/ml。

1.3 組織培養藥敏檢測法 根據文獻[2]的方法進行實驗。手術當日取無污染組織標本，切割成1 mm3大小的組織塊，放置于有濾紙的24孔培養板中，加入組織塊培養液300 μl，37 ℃ 、5%CO2培養箱中孵育。第2天用江蘇先聲藥業有限公司開發的TECIA(tissue culture-end point staining- computer image analysis, TECIA)圖像分析系統測定組織塊面積(area, A)，然后除對照孔外，每孔加入化療藥物3 μl，112例標本除觀察5種化療藥外，其中88例增……