離子色譜法測定郁李仁藥材中的二氧化硫殘留量

王佳慧 夏洋

郁李仁（semen pruni）味辛甘苦、性平，具有潤腸通便、利水消腫之功，臨床治療便秘、水腫和小便不利等癥，療效良好[1]。中藥常熏硫來防霉防蛀，熏硫可能改變藥的材性狀和成分[2-3]，二氧化硫殘留還可能危害人體健康[4-5]。我國藥典中規定天麻等十種中藥材的二氧化硫殘留應低于400 mg/kg，其他中藥材應低于150 mg/kg[6-7]。目前還沒有用離子色譜法測定郁李仁中二氧化硫殘留量的文獻報道。本文用此法測定郁李仁中二氧化硫殘留量，可避免酸堿滴定法測定帶來的誤差。本法測定結果可靠，測試時間短，檢出限低，是測定郁李仁中二氧化硫殘留量的有效方法。

1 儀器與方法

1.1 儀器

Milli-Q超純水機（Integral 15型，美國millipore公司）；電子分析天平（瑞士 METTLER-TOLEDO公司）；ICS-90 離子色譜儀（美國戴安公司）。

1.2 試劑

硫酸根離子標準溶液（1 mg/ml，中國計量科學研究院，批號：GBW（E）080266）；超純水（電阻率18.2 MΩ/cm）；其他使用的試劑均為分析純。郁李仁（購自沈陽市的中藥藥房），取已知未熏硫的郁李仁自制熏硫樣品。

1.3 試驗方法

1.3.1 色譜條件 色譜柱：Dionex Ionpac離子色譜柱（AS11A型）；流速1.0 ml/min；柱溫30 ℃；流動相：12 mmol/L KOH溶液；進樣量 20 μl。

1.3.2 熏硫樣品的制備 把郁李仁均勻放在通風櫥內的架子上，將硫磺點燃放入通風櫥密閉24小時，制備熏硫郁李仁。

1.3.3 供試液的制備 將郁李仁粉碎，過二號篩，精密稱取10 g裝入水蒸汽蒸餾裝置，加入50 ml水和5 ml鹽酸，密封容器，開始蒸餾。配制3% H2O2作為接收液，接收至接近100 ml停止蒸餾，用超純水定容，以0.45 μm微孔濾膜濾過，取續濾液作為供試品溶液，用離子色譜測定其中的硫酸根，再換算出二氧化硫含量。熏硫郁李仁同法處理制備供試液。

2 結果

2.1 專屬性

將樣品供試液依據色譜條件分析，供試液的其他成分不干擾硫酸根的測定，硫酸根離子的保留時間約7.52 min，理論塔板數大于2 000，郁李仁樣品供試液的離子色譜圖，見圖1，二氧化硫殘留以硫酸根離子的形式定量，硫酸根色譜峰與相鄰峰的分離度大于1.5。

2.2 線性范圍

采用外標法定量，將硫酸根標準品溶液稀釋成濃度為0.5 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L、10.0 mg/L、25.0 mg/L和50.0 mg/L的標準品溶液，經離子色譜儀分析，測定硫酸根離子色譜峰面積，以硫酸根離子的質量濃度C（mg/L）為橫坐標，硫酸根離子的色譜峰面積A為縱坐標，進行線性回歸。標準曲線方程為A=0.112 6C-0.031 5（r=0.999 8），硫酸根離子的線性范圍在0.5～50.0 mg/L內呈良好的線性關系。

圖1 硫酸根離子標準品溶液（A）和熏硫郁李仁（B）離子色譜圖

2.3 定量限和檢測限的測定

將硫酸根標準品溶液逐級稀釋，測量出3倍基線噪音信號時的硫酸根離子濃度，作為方法的檢測限，測量出10倍噪音信號時的硫酸根離子濃度，作為方法的定量限。結果表明，二氧化硫的檢測限和定量限分別為0.08 mg/L和0.27 mg/L。

2.4 精密度和重復性試驗

以5.0 mg/L的硫酸根標準溶液計算精密度，依法分析測定6次，計算精密度，取自制熏硫郁李仁樣品，各制備6份供試品溶液，測定計算重復性。結果硫酸根離子峰面積的RSD%為1.21%，熏硫郁李仁樣品的RSD為4.16%，表明方法的精密度和重復性良好。

2.5 穩定性試驗

將制備好的熏硫郁李仁樣品供試液，分別在0 h、1 h、2 h、4 h、8 h、12 h和24 h進樣，記錄峰面積。結果峰面積RSD為4.68%，表明供試液在24 h內具有良好的穩定性。

2.6 回收率試驗

以1號郁李仁樣品進行回收率試驗，精密稱取10 g樣品，分別加入2.0 ml、4.0 ml和8.0 ml的無水亞硫酸鈉溶液，無水亞硫酸鈉溶液中相當于含有116 mg/L的二氧化硫，制成含高中低3個濃度的樣品，每個濃度制備3份樣品，按照2.3項下制備供試液，離子色譜分析，計算回收率。結果郁李仁樣品在0.23 mg、0.46 mg和0.93 mg三個水平的平均回收率在98.4%～101.6%之間，RSD小于5%。

2.7 樣品含量測定

采用本方法對采集的6份樣品、2份自制熏硫郁李仁樣品進行測定，結果6份采集樣品均未檢出二氧化硫，而自制熏硫郁李仁樣品中二氧化硫殘留量為45.308 mg/kg和42.662 mg/kg。

3 討論

3.1 中藥材熏硫對藥性的影響

中藥材常熏硫來防腐防蟲蛀，在硫磺熏蒸時會有一定數量的硫附著在藥材表面，可能會影響中藥材本身的藥性[2]。硫磺性溫味酸，有小毒，有益火助陽之功，熏硫后的中藥材如用于益火壯陽的方劑可起到協同的功效，反之則會降低治療效果甚至起反作用[3-5]。因此，需要嚴格控制中藥材中的二氧化硫殘留量。

3.2 二氧化硫殘留量測試方法選擇

我國2015年版藥典中規定了三種測定二氧化硫殘留量的方法，即酸堿滴定法（第一法）、氣相色譜法（第二法）和離子色譜法（第三法）[7]。目前，第一法為常用方法，但對郁李仁等含有苦杏仁苷化合物的中藥材容易誤判，這是由于苦杏仁苷在酸性環境中會水解產生氰化氫，也會消耗堿液[8]。本文采用離子色譜法測定郁李仁的二氧化硫殘留量，可避免苦杏仁苷帶來的假陽性干擾。

3.3 離子色譜分析條件的優化

參考文獻方法對分析條件進行優化[8-15]，考察了10 mmol/L、12 mmol/L和15 mmol/L的KOH 溶液為流動相時硫酸根離子分離情況，濃度為12 mmol/L時硫酸根離子與相鄰色譜峰可完全分離。考察了柱溫變化對檢測結果的影響，柱溫升高會使得硫酸根離子色譜峰保留時間提前，幅度不大，為了兼顧方法的實用性，本法最終選擇30 ℃作為試驗用柱溫條件。考察了0.8 ml/min、1.0 ml/min和1.2 ml/min三個流速對測量結果的影響，結果流速1.0 ml/min時色譜峰峰形較好。以優化后的色譜條件分析，供試液的其他成分不干擾硫酸根離子測定，與相鄰峰間分離度大于1.5，可用于郁李仁藥材的二氧化硫殘留量測定。

3.4 建立的郁李仁藥材二氧化硫殘留量測定方法評價

建立的離子色譜法分析郁李仁藥材中的二氧化硫殘留量，方法穩定可靠、重現型好，適用于郁李仁藥材的二氧化硫殘留量控制。通過分析多批郁李仁樣品和熏硫后的郁李仁樣品，表明本法分析郁李仁藥材中的二氧化硫殘留，測定結果不受藥材中其他物質的干擾，方法簡便快速，可用于控制郁李仁藥材的質量。