復方克林霉素磷酸酯凝膠的制備及質量控制

戴薇薇

摘 要：本實驗研究復方克林霉素磷酸酯凝膠的制備方法并建立反相高效液相色譜法測定復方克林霉素磷酸酯凝膠中維A酸的含量。方法：采用Inertsil ODS-3液相色譜柱，甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5），檢測波長為346nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。維A酸在5～25ug·mL-1范圍內呈良好的線性關系。維A酸平均回收率為99.3%。結論：本制劑穩定、可靠，測定方法簡便、準確。

關鍵詞：乳膏；制備；測定

維A酸是體內維生素A的代謝中間產物，主要影響骨的生長和促進上皮細胞增生、分化、角質溶解等代謝作用。維A酸用于治療尋常痤瘡、銀屑病、毛發紅糠疹、毛囊角化病、鱗狀細胞癌及黑色素瘤等疾病。復方克林霉素磷酸酯凝膠主要用于痤瘡。本實驗研究復方克林霉素磷酸酯凝膠的制備方法并建立反相高效液相色譜法測定復方克林霉素磷酸酯凝膠中維A酸的含量。

1 儀器與試藥

1.1 儀器：百靈LA114型電子天平（常熟市百靈天平儀器有限公司）；長城獅鼎SHB-III型臺式循環水式多用真空泵（鄭州長城科工貿有限公司）；美國澤拉布Super超越系列全觸屏超純水系統（上海和泰儀器有限公司）；青島盛瀚色譜柱溫箱（青島盛瀚色譜技術有限公司）；CH3030CH3030超級恒溫油槽（上海平軒科學儀器有限公司）；600220液相保護柱（天津琛航科苑科技發展有限公司）；蘭博OV3000大容量柱溫箱（天津市蘭博實驗儀器設備有限公司）；紫外分光光度計（尤尼柯（上海）儀器有限公司）。

1.2 色譜柱：Inertsil ODS-3液相色譜柱（上海卓好實驗室設備有限公司）。

1.3 對照品：維A酸 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4 試劑及輔料：磷酸氫二鈉（上海玻爾化學試劑有限公司）、甲醇（上海玻爾化學試劑有限公司）、冰醋酸（上海玻爾化學試劑有限公司）、乙腈（上海玻爾化學試劑有限公司）、三乙胺（上海玻爾化學試劑有限公司）、磷酸（上海玻爾化學試劑有限公司）。三乙醇胺（陜西圣瑞醫藥科技有限公司）、甘油（陜西圣瑞醫藥科技有限公司）、維A酸（陜西圣瑞醫藥科技有限公司）、維生素E（江蘇科鼐生物制品有限公司）。

2 制備方法

2.1 處方

克林霉素磷酸酯、三乙醇胺、甘油、維A酸、維生素E等。

2.2 制備

復方克林霉素磷酸酯凝膠的制備：取克林霉素磷酸酯和維A酸溶解后，加三乙醇胺、甘油、維生素E等混合均勻，分裝，即得。

3 質量控制

3.1 性狀

本品為微黃色透明半固體凝膠。符合《中國藥典》2015年版對凝膠的要求。

3.2 含量測定

3.2.1 流動相的選擇

分別考察甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（pH=2.2）-水（80：20）；甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；乙腈-水（體積比為65∶35）；甲醇-水（80：20，含0.1%三乙胺）；乙腈-0.2%（質量分數）磷酸（體積比25：75）；0.01mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（pH=2.2）-水（50：50）不同比例的流動相，結果以甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）；為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5）為流動相。

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[1-7]。流動相：甲醇-水-冰醋酸（75∶25：0.5），檢測波長：346nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。理論板數按維A酸峰計算應不得低于2000。

3.2.2 對照品溶液的制備

精密稱取維A酸對照品適量，置容量瓶中，加甲醇制成每1mL含10ug的溶液，即得。

3.2.3 供試品溶液的制備

取適量供試品精密稱定，置具小燒杯中，精密加入異丙醇10mL，用甲醇轉移至50ml容量瓶中并稀釋定容，超聲處理5分鐘，放冷，濾過。取續濾液，即得。

3.2.4 專屬性試驗

依照處方取克林霉素磷酸酯、三乙醇胺、甘油、維生素E等，按樣品制備工藝制成陰性對照樣品，依上述方法測定，結果在維A酸出峰處陰性液無色譜峰，結果陰性試驗沒有干擾，表明本方法專屬性良好。

3.2.5 精密度試驗

精密稱取維A酸對照品適量，加甲醇使溶解，制成濃度為10ug·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.91%，表明本方法精密度良好。

3.2.6 對照品的線性考察

精密稱取維A酸對照品5mg，置100ml容量瓶中，加入甲醇溶液使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取1、2、3、4、5mL，置于10mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照3.2.2項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，維A酸在5～25μg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

3.3 微生物限度檢查

按照《中國藥典》2015年版附錄所載方法測定，結果符合規定。

4 討論

近來凝膠劑引起了藥學人員的極大關注，其使藥物緩慢釋放，具有長效、減低不良反應等優點。凝膠制劑，前景十分廣闊。本制劑穩定、可靠，符合中國藥典相關規定。測定復方克林霉素磷酸酯凝膠三批樣品中維A酸的含量，分別為標示量的百分之九十八點九、百分之九十九點八、百分之一百點一。

參考文獻

[1]徐蓮琴，徐曉弘，李丙陽，李士峰，鄒清波，安英健.RP-HPLC法測定迪維霜和維A酸凝膠中維A酸的含量[J].藥物分析雜志，2002（04）.

[2]張志勤，王棟，邵豐德，韓國柱，唐澤耀.復方維A酸乳膏化學穩定性研究及有效期預測[J].中國新藥雜志，2015（02）.

[3]陸松偉，虞慧華，陳方劍，宋洪杰.用雙波長紫外分光光度法測定尿囊素維E乳膏中維生素E的含量[J].藥學服務與研究，2015（05）.

[4]徐蓮琴，徐曉弘，李丙陽，李士峰，鄒清波，安英健.RP-HPLC法測定迪維霜和維A酸凝膠中維A酸的含量[J].藥物分析雜志，2002（04）.

[5]汪濤，鄧樹海，萬發里，宋燕青，張四喜.維A酸注射液的含量及有關物質的HPLC測定[J].中國醫藥工業雜志，2006（10）.

[6]蔡樂，姚蘭，白林.維A酸軟膏中維A酸的含量測定及有關物質的檢查[J].中國藥物應用與監測，2015（03）.

[7]魏立明，宋霞，宋三孔，楊效宇，焦海勝.HPLC雙波長法同時測定復方維A酸軟膏中2主藥的含量[J].中國藥房，2012（08）.