聚乳酸納米泡的制備及性質

黃凌萍 宋佳 丁潔瓊(通訊作者) 羅斌華(通訊作者)

（1湖北科技學院藥學院 湖北 咸寧 437100）

（2咸寧市中心醫院湖北科技學院附屬第一醫院 湖北 咸寧 437100）

（3湖北科技學院基礎醫學院 湖北 咸寧 437100）

臨床超聲成像使用的對比劑是SonoVue脂質微泡，粒徑為2～8μm，由于不能穿越血管壁內皮細胞進入到組織，不能增強血管外組織病變區域的超聲成像，所以它們屬于血池顯影對比劑[1-2]。近年來，隨著納米技術的廣泛應用，納米泡作為新型超聲成像對比劑的研究引起人們的重視[3-4]。腫瘤血管壁間隙大約在380～780nm，納米泡就有可能穿越腫瘤血管內皮細胞，進入腫瘤實體，并在靶向基團特異性的作用下長時間停留在腫瘤病灶組織，因而可以增強血管外微小腫瘤病灶組織超聲成像，改善腫瘤組織超聲診斷效果。

1.儀器與藥品

高剪切乳化機（上海弗魯克有限公司），細胞超聲破碎儀（賽飛有限公司），超聲成像系統（美國 philips公司），全氟戊烷（北京百靈威科技有限公司），聚乳酸（濟南正罡科技有限公司）。

2.實驗方法

2.1 聚乳酸納米泡的制備

聚乳酸用適量二氯甲烷溶解，然后向溶液中加入0.5mL全氟戊烷（PFP），在10000 rpm條件下，高剪切形成O1/O2型初乳；將初乳加入到聚乙烯醇（PVA）水溶液中，在攪拌的作用下形成O1/O2/W型預復乳；然后超聲處理形成納米乳。攪拌過夜，固化形成納米泡，放置于4℃冰箱中保存備用。

2.2 納米泡的粒徑表征

動態光散射法測定納米泡的粒徑及多分散系數。測定條件為溫度為25℃，激光粒度儀參數為He-Ne激光（λ=633nm），4mW，角度為90°。

2.3 納米泡的體外穩定性研究

取4℃冰箱中保存的納米泡溶液適量，用生理鹽水進行稀釋，取適量進行測定粒徑，測定時間分別為0，5，10，15，20，25，30，60，90天，將得到的粒徑數據根據時間繪制曲線，通過不同時間點測定粒徑數據來評價納米泡在儲存過程中的穩定性。

2.4 納米泡的體外超聲成像研究

2.4.1 超聲成像研究 取4℃冰箱中保存的納米泡溶液適量，加入到乳膠手套中，手套放在37℃恒溫水浴中，進行成像研究，對照品分別是生理鹽水和耦合劑。

2.4.2 納米泡的擊破試驗 取4℃冰箱中保存的納米泡溶液適量，加入到乳膠手套中，手套放在37℃恒溫水浴中，用超聲波（較強的機械指數）瞬間將聚乳酸納米泡進行擊破，擊破之前和之后分別進行一次成像。

3.結果與討論

3.1 聚乳酸納米泡的制備

本研究采用乳化溶劑揮發法制備聚乳酸納米泡，囊心是液態的全氟戊烷。

3.2 納米泡的粒徑

納米泡外觀呈乳白色，稀釋后有明顯藍色乳光，納米泡的平均粒徑為318.4±5.1 nm，PDI為0.167±0.020。

3.3 納米泡的體外穩定性研究

檢測的納米泡粒徑在這段時間內變化較小，且粒子的多分散系數也都小于0.1，表明納米泡在儲存的這段時間內表現出較好的穩定性。

3.4 納米泡的體外超聲成像研究

3.4.1 納米泡的超聲成像 如下圖1所示，在超聲波的輻照下，納米泡在手套中呈現出一個個亮點(如圖2C所示)，這些均勻密集的亮點形成了超聲高信號，能增強超聲成像，而對照品生理鹽水和耦合劑中，未見到亮點(如圖2AB所示)。

圖1 納米泡體外成像A 生理鹽水，B耦合劑，C聚乳酸納米泡

圖2

3.4.2 納米泡的擊破試驗 聚乳酸納米泡在擊破之前與之后的超聲成像結果如圖1所示，可以發現，在擊破之后的整個視野內，納米泡出現的亮點明顯減少，而且，在擊破之后成像的圖片上，明顯發現乳膠手套的底部，有很多較大的亮點出現，其產生的原因是擊破之后的納米泡會釋放出全氟戊烷氣體，這些氣體分散在液體中，會聚集增大，產生較大的氣泡，所以成像的圖片上亮點增大。