不同藥劑對南方根結線蟲的室內毒力測定

李秋捷，陸秀紅，黃金玲，張禹，劉志明*，曾東強*

(1.廣西大學 農學院，廣西 南寧 530003； 2.廣西農業科學院 植物保護研究所，廣西 南寧 530007)

根結線蟲病是重要農作物病害之一，據孔祥義[1]的文獻記載，南方根結線蟲(Meloidogyneincognita)是引起農作物根結線蟲病的主要種群。目前對根結線蟲病的防治主要以化學藥劑為主[2-3]。以高效、低毒、對環境友好為特點的新型非熏蒸類殺線蟲劑正不斷出現，并且逐漸取代上一代高毒性的殺線蟲劑藥劑。本試驗主要通過測定氟吡菌酰胺等4種殺線劑對南方根結線蟲的毒力，為根結線蟲的相關的防治研究以及田間防治提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑(拜耳作物科學有限公司)，75%噻唑膦乳油(河北三農農用化工有限公司)，200 g·L-1丁硫克百威乳油(蘇州富美實植物保護劑有限公司)，1.8%阿維菌素乳油(中國農科院植保所廊坊農藥中試廠)。

試驗對象為南方根結線蟲2齡幼蟲。從廣西壯族自治區農業科學院溫室中的辣椒根部分離出南方根結線蟲的卵塊，經單卵塊接種在辣椒上純化培養后，采集病根，挑取卵囊進行孵化，獲得大量南方根結線蟲2齡幼蟲。

1.2 方法

1.2.1 藥劑的密度測量

試驗需要測定的LC50為質量濃度，使用藥劑均以毫升為計量單位，需要測定密度進行體積-質量換算。將50 mL燒杯放置在千分天平上，去皮，然后將上述藥劑各加1 mL至燒杯中，記錄質量，計算出各藥劑的密度。

1.2.2 藥液的配制

將41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑用水稀釋成5、2.5、1.25、0.625和0.312 5 mg·L-1，75%噻唑膦乳油稀用水釋成100、50、25、12.5、6.25 mg·L-1，將200 g·L-1丁硫克百威乳油用水稀釋成1 200、600、300、150、75 mg·L-1，將阿維菌素乳油用水稀釋成0.08、0.04、0.02、0.01和0.005 mg·L-1。

1.2.3 線蟲懸浮液的制備

從根結線蟲病發病較為嚴重的辣椒的根部挑取根結線蟲卵囊置于培養皿內，每皿放置卵囊100個。培養皿置于恒溫箱中以25 ℃進行孵化。每24 h在體視顯微鏡下使用一次性滴管收集根結線蟲至20 mL西林瓶中，制備線蟲懸浮液，根結線蟲懸浮液的濃度約為400頭·mL-1。

1.2.4 藥劑毒力的測定

取24孔細胞培養板(6×4)，每孔滴入線蟲懸浮液0.5 mL。每列為1個濃度處理，重復4次，各孔滴入藥液0.5 mL，使各藥劑在孔板中的濃度為41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑2.5、1.25、0.625、0.312 5、0.156 3 mg·L-1，75%噻唑膦乳油50、25、12.5、6.25、3.125 mg·L-1，200 g·L-1丁硫克百威乳油600、300、150、75、32.5 mg·L-1，1.8%阿維菌素乳油0.040、0.020、0.010、0.005、0.002 5 μg·L-1。

1.3 根結線蟲的死亡判斷與統計分析

1.3.1 死亡判斷

可從線蟲形態來對根結線蟲的死亡做出快速判斷，死亡的線蟲身體僵直或有呈角度的彎折，未死亡的根結線蟲蟲體有呈弧度的彎折(圖1～2)。若從根結線蟲的形態無法明確判斷線蟲的死亡與否，可采用針刺法進行判斷。

圖1 未死亡的根結線蟲

1.3.2 數據統計

使用Excel對數據進行記錄與整理，使用IBM SPSS Statistics 23對數據進行分析。處理24、48 h后，使用倒置顯微鏡觀察孔板內線蟲的死亡情況，記錄根結線蟲總數以及死亡數，計算校正死亡率。

圖2 死亡的根結線蟲

2 結果與分析

2.1 藥劑密度

由表1可知，本次試驗中1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲的毒力最高，并且明顯高于75%噻唑膦及200 g·L-1丁硫克百威。

表1 4種藥劑的密度

2.2 毒力

由表2可知，24、48 h處理的1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲的LC50分別為0.009 785和0.008 481 μg·L-1；41.7%氟吡菌酰胺懸浮對南方根結線蟲的毒力低于1.8%阿維菌素乳油，但明顯高于75%噻唑膦乳油以及200 g·L-1丁硫克百威乳油；200 g·L-1丁硫克百威乳油對南方根結線蟲的毒力明顯低于上述藥劑。

表2 4種殺線蟲劑對根結線蟲的毒力測定運算結果

75%噻唑膦乳油與200 g·L-1丁硫克百威乳油對南方根結線蟲24、48 h毒力相差較大。75%噻唑膦乳油24、48 h的毒力分別為35.036、20.302 mg·L-1，丁硫克百威乳油的24、48 h毒力分別為567.777、171.374 mg·L-1。上述2種藥劑的48 h毒力明顯高于24 h毒力。

3 討論

1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲表現出較高毒力，24h和48h處理對南方根結線蟲的LC50分別為0.009785和0.008481μg·L-1，該結果與已有試驗結果有較大差異。朱衛剛等[4]測定的1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲的LC50為1.48mg·L-1，張俊龍等[5]測定的1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲的LC50為14.926mg·L-1，這可能是南方根結線蟲不同地域抗藥性水平有差異所致，需要更進一步的試驗證實。鄒雅新等[6]測定的1.8%阿維菌素乳油對南方根結線蟲處理24和48h的LC50分別為0.00851和0.00734mg·L-1，與本次試驗的測定結果相近。另外，相對于75%噻唑膦乳油和200g·L-1丁硫克百威乳油而言，41.7%氟吡菌酰胺懸浮劑對南方根結線蟲也表現出了較高的毒力。