血清HBsAg、HBV DNA水平及相關(guān)性在慢性HBV感染過程的變化和意義

胡金燕 林坤培 周蘭

【摘要】 目的：探討血清HBsAg、HBV DNA水平及相關(guān)性在慢性HBV感染過程的變化和意義，為慢性HBV感染患者的治療和預后評估提供必要的理論依據(jù)。方法：將2014年1月-2017年8月本院收治的80例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為研究對象，結(jié)合患者HBV感染的不同階段將其分為IT組（免疫耐受）、IC組（免疫清除）、LR組（低復制期）、ENH組（再活動期），每組20例。比較慢性HBV感染過程中不同階段血清HBsAg、HBV DNA水平，分析血清HBsAg與HBV DNA相關(guān)性。結(jié)果：四組慢性HBV感染患者血清HBsAg、HBV DNA水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。進一步分析IT組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最高，LR組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最低，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。IT、IC兩組患者HBV DNA水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。IT、LR、ENH組患者血清HBsAg與HBV DNA無相關(guān)性，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。結(jié)論：慢性HBV感染患者在不同階段的血清HBV持續(xù)感染不同階段HBsAg滴度具有顯著性差異，IT期最高，其次為IC和ENH期，LR期最低，血清HBsAg水平僅在IC期與HBV DNA呈現(xiàn)正相關(guān)，慢性HBV感染患者的血清HBsAg在自然病程中不同階段水平變化有助于預測疾病進程和評估抗病毒治療的效果.

【關(guān)鍵詞】 乙型肝炎病毒； 乙肝表面抗原； 乙型肝炎病毒DNA； 相關(guān)性

【Abstract】 Objective：To explore the changes and significance of serum HBsAg and HBV DNA levels and their correlation in the process of chronic HBV infection，and to provide the necessary theoretical basis for the treatment and prognosis evaluation of patients with chronic HBV infection.Method：A total of 80 cases of chronic HBV infection treated in our hospital from January 2014 to August 2017 were divided into IT（immune tolerance） group，IC（immune clearance） group，LR（low replication period） group，and ENH（reactivation period） group according to different stages.The levels of serum HBsAg and HBV DNA in different stages of chronic HBV infection were compared，the correlation between serum HBsAg and HBV DNA was analyzed.Result：The serum levels of HBsAg and HBV DNA in four groups of patients with chronic HBV infection were significantly different （P<0.05）.Further analysis showed that the serum levels of HBsAg and HBV DNA in IT group were the highest，while the serum HBsAg and HBV DNA levels in LR group were the lowest（P<0.05）.There was no significant difference in HBV DNA level between IT group and IC group（P>0.05）.No correlation was found between serum HBsAg and HBV DNA in IT，LR and ENH groups（P>0.05）.There was a positive correlation between serum HBsAg and HBV DNA in patients of IC group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion：HBsAg titers in patients with chronic HBV infection at different stages of persistent HBV infection are significantly different at different stages of infection，with the highest IT period followed by IC and ENH stages，the lowest LR stage，serum HBsAg level only at IC stage and HBV DNA presentation Positive correlations between serum HBsAg levels in patients with chronic HBV infection at different stages of their natural history are helpful in predicting disease progression and assessing the effectiveness of antiviral therapy.

【Key words】 Hepatitis B virus； Hepatitis B surface antigen； Hepatitis B virus DNA； Correlation

First-authors address：Luoding Peoples Hospital，Luoding 527200，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.15.003

乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）在我國呈現(xiàn)中度流行的趨勢，流行病學調(diào)查顯示近年來我國1～60歲人群乙型肝炎表面抗原（hepatitis B surface antigen，HBsAg）攜帶率為8.13%，其中5歲以下兒童HBsAg攜帶率不到1.00%，據(jù)推算慢性HBV感染的患者>9 000萬，其中慢性乙型肝炎患者>2 000萬，臨床上HBV治療的目的是促使HBsAg消失、表面抗體出現(xiàn)[1-2]。HBsAg定量檢測逐漸應用于臨床慢性HBV感染的治療與研究中，臨床醫(yī)生逐漸重視HBsAg定量值與HBV的關(guān)系[3]。既往研究顯示慢性HBV感染患者的血清HBsAg水平與抗病毒治療效果、停藥后持續(xù)應答情況密切相關(guān)，并且能夠評估患者在自然情況HBV是否自身清除，但是IT（免疫耐受）、IC（免疫清除）、LR（低復制期）、ENH（再活動期）不同階段慢性HBV感染患者血清HBsAg定量分布特點的研究在我國缺乏[4-5]，基于以上本研究旨在探討分析血清HBsAg、HBV DNA水平及相關(guān)性在慢性HBV感染過程的變化和意義，為慢性HBV感染患者的治療和預后評估提供必要的理論依據(jù)，現(xiàn)報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 將2014年1月-2017年8月本院收治的80例慢性乙型肝炎病毒感染患者作為研究對象。納入標準：（1）經(jīng)實驗室檢查確診為慢性HBV感染；（2）符合2010年中華醫(yī)學會肝病分會、中華醫(yī)學會感染病學分會《慢性乙型肝炎防治指南》[6]；（3）合并其他肝炎病毒及艾滋病毒感染。排除標準：（1）合并酒精性、非酒精性脂肪肝；

（2）藥物性、中毒性肝炎；（3）重疊或合并其他病毒性肝炎；（4）自身免疫性肝炎、血色病、肝豆狀核變性、肝癌、血吸蟲肝病等其他肝病；（5）乙肝表面抗原和表面抗體同時陽性者、HIV及其他肝炎患者。研究方案經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會審查與備案，患者均知情同意自愿參與本研究并簽署知情同意書。根據(jù)《慢性乙型肝炎防治指南》結(jié)合患者HBV感染的不同階段將其分為IT組（免疫耐受）、IC組（免疫清除）、LR組（低復制期）、ENH組（再活動期），每組20例。見表1。

1.2 方法 （1）血清HBsAg定量檢測：采用新波生物的時間分段熒光免疫分析定量檢測血清HBsAg，檢測正常值：0～1 IU/mL，儀器：ARCHITECTi2000檢測儀。（2）血清HBV DNA檢測：采用廣州達安試劑，PCR法，檢測正常值HBV DNA<1.0E+

002 IU/mL，儀器：博日公司Line-Gene實時熒光PCR檢測儀。

1.3 統(tǒng)計學處理 SPSS 19.0統(tǒng)計軟件分析數(shù)據(jù)，正態(tài)分布計量資料（x±s）表示，非正態(tài)分布計量資料M（Q25，Q75）表示，組間比較采用方差分析，兩兩比較采用SNK分析，計數(shù)資料以率（%）表示，組間比較采用字2檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)性分析，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié)果

2.1 四組一般資料比較 IT組：男12例，女8例；年齡27～77歲，平均（59.35±5.12）歲。IC組：男13例，女7例；年齡23～79歲，平均（60.28±4.89）歲。LR組：男10例，女10例；年齡31～75歲，平均（58.75±5.15）歲。ENH組：男12例，女8例；年齡30～77歲，平均（59.91±5.96）歲。四組患者一般資料比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

2.2 慢性HBV感染過程中不同階段血清HBsAg、HBV DNA水平比較 四組慢性HBV感染患者血清HBsAg、HBV DNA水平比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。進一步分析IT組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最高，LR組患者血清HBsAg、HBV DNA水平最低，比較差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。IT、IC兩組HBV DNA水平比較，差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。見表2。

2.3 慢性HBV感染過程中不同階段血清HBsAg與HBV DNA相關(guān)性分析 IT、LR、ENH組患者血清HBsAg與HBV DNA無相關(guān)性，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。見表3和圖1。

3 討論

HBV的外膜蛋白是HBsAg，廣泛存在于患者血液和體液中，HBsAg本身沒有傳染性，但是在HBV感染中發(fā)揮著重要的作用[7]。正常人群在感染HBV 1周后血液中即可出現(xiàn)HBsAg，通常還伴有HBV的存在，因此臨床上將HBsAg作為診斷HBV感染的標志，并且可以通過檢測患者HBsAg、乙型肝炎e抗原（HBeAg）、HBV DNA等HBV標志物來判斷HBV的復制[8-9]，尤其是慢性HBV的抗病毒治療過程中評估和預測療效、停藥后持續(xù)應答情況的重要指標是HBeAg、HBV DNA，但是以往國內(nèi)外多數(shù)學者認為HBsAg對HBV的復制和病情程度不能有效的反映[10-11]。近年來國內(nèi)外研究發(fā)現(xiàn)慢性HBV感染的不同階段的HBsAg水平與多個因素有關(guān)，持續(xù)定量監(jiān)測HBsAg可以反映患者的病情嚴重程度、治療后的療效及停藥后的復發(fā)情況[12-13]，因此在臨床上認為持續(xù)定量監(jiān)測慢性HBV感染患者HBsAg在反映復制情況和評估抗病毒治療的預后具有重要的意義。

慢性HBV感染的自然過程通常分為IT（免疫耐受）、IC（免疫清除）、LR（低復制期）、ENH（再活動期）4個期，不同的階段血清HBsAg、HBV DNA水平有著各自的特點，研究慢性HBV感染的自然疾病過程，可以判斷疾病的預后、藥物的治療效果、藥品經(jīng)濟學提供必要的佐證依據(jù)，慢性HBV感染的自然過程中使用HBsAg 定量技術(shù)可以動態(tài)的監(jiān)測患者血清HBsAg的水平，因此定量技術(shù)監(jiān)測HBsAg探究慢性HBV感染疾病過程已經(jīng)成為臨床研究的熱點[14]，并且國外已經(jīng)有研究顯示：慢性HBV感染患者的不同階段HBsAg水平具有顯著性的差異，但是國內(nèi)此類的研究較少[14-15]，本研究顯示：所有患者均未接受抗病毒治療，慢性HBV感染的患者HBsAg水平差異顯著，IT組患者血清HBsAg水平最高，IC組患者HBsAg水平開始下降，LR組患者血清HBsAg水平最低，而ENH組患者血清HBsAg水平又開始上升，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05），與Yao等[16]學者研究一致，提示：慢性HBV感染患者血清HBsAg表達與其免疫背景密切相關(guān)。

慢性HBV感染患者的血清HBsAg與HBV DNA的相關(guān)性分析顯示：IC組患者血清HBsAg與HBV DNA呈正相關(guān)性，差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05），而其余階段患者的血清HBsAg與HBV DNA水平無相關(guān)性，差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），分析原因：機體在感染HBV后特異性的免疫反應迅速建立，有效控制HBV DNA的復制，減少HBsAg的合成，因此IC期患者的血清HBsAg與HBVDN呈正相關(guān)性，Martinot-Peignoux等[17]國外學者認為僅僅在急性乙型肝炎時者的血清HBsAg與HBV DNA水平具有相關(guān)性，而感染的不同階段無相關(guān)性，與本研究不一致，可能與研究對象的種族、病毒基因有關(guān)，而本研究未進行病毒基因類別和種族的研究，IT、LR、ENH階段的患者血清HBsAg與HBV DNA水平無相關(guān)性，即不能通過定量檢測血清HBsAg評估HBV的復制程度，可能與基因突變等HBsAg等合成復雜性有關(guān)，但是這個還需要今后進一步研究和證實，因此，慢性HBV感染者只有在IC特定的時期血清HBsAg可以評估HBV DNA的復制程度，在臨床上要綜合考率HBV感染者所處的階段、病毒基因型、e抗原癥狀等因素。

近年來隨著臨床HBsAg定量技術(shù)的不斷與運用，促使診斷HBV感染的基本標志物血清HBsAg有了新的認識，cccDNA是存于與肝細胞中具有轉(zhuǎn)錄活性的遺傳物質(zhì)，能夠?qū)BV感染細胞的數(shù)量做出準確的反應，但是檢測其含量是必須在肝組織中進行，極易損傷患者的肝組織，導致cccDNA在臨床上的應用受到了限制[18]，而血清HBsAg與cccDNA相關(guān)性顯著，即可認為血清HBsAg也能反應感染細胞的數(shù)量，是HBV感染無創(chuàng)傷的標志物[19]，因此，慢性HBV感染患者血清HBsAg在感染過程中的變化、與HBV DNA水平的相關(guān)性及評估抗病毒治療的效果在臨床上逐漸受到重視，利用血清HBsAg與病毒復制的關(guān)系評斷HBV攜帶者的疾病活動情況，早期血清HBsAg下降程度在患者抗病毒治療過程中可以評估治療的效果，同時停藥后血清HBsAg可以預測患者持續(xù)應答情況[20]。

綜上所述，慢性HBV感染患者在不同階段的血清HBV 持續(xù)感染不同階段HBsAg滴度具有顯著性差異，IT期最高，其次為IC和ENH期，LR期最低，血清HBsAg水平僅在IC期與HBV DNA呈現(xiàn)正相關(guān)，慢性HBV感染患者的血清HBsAg在自然病程中不同階段水平變化有助于預測疾病進程和評估抗病毒治療的效果。

參考文獻

[1]王曉琳，鄒桂舟，葉珺，等.乙肝表面抗原在慢性乙型肝炎病毒感染臨床不同階段的變化[J].實用醫(yī)學雜志，2014，30（17）：2765-2767.

[2]鄭怡娟，余雪平，郭如意，等.慢性HBV感染者HBsAg/HBV DNA比率的檢測及其臨床意義[J].中國人獸共患病學報，2016，32（6）：558-563.

[3]周怡，史恩溢，曹誼，等.HBsAg陰性獻血者隱匿性HBV感染的血清學特征及其與病毒載量的關(guān)系[J].臨床輸血與檢驗，2017，19（6）：570-573.

[4]矯淑媛，張學平.HBsAg定量與HBV-DNA 聯(lián)合檢測在慢性乙型肝炎中的臨床意義[J].標記免疫分析與臨床，2015，22（12）：1245-1247.

[5]孫院紅.慢性乙型肝炎患者血清HBsAg及HBV-DNA定量檢測的意義[J].中國民康醫(yī)學，2017，29（14）：5-6，10.

[6]王貴強，王福生，成軍，等.慢性乙型肝炎防治指南（2015年更新版）[J].臨床肝膽病雜志，2015，31（12）：1941-1960.

[7]余思雨，李成忠.慢性HBV感染者不同臨床階段HBsAg定量檢測及其相關(guān)性研究進展[J].肝臟，2016，21（3）：214-218.

[8]張金穎，劉蘭，張永萍.慢性乙型肝炎血清HBsAg定量及HBsAg/HBV DNA比值與肝組織病理炎癥活動度的相關(guān)性分析[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2017，26（24）：2679-2681.

[9]戴二黑，李敏然.HBsAg定量檢測技術(shù)進展及其臨床意義[J].世界華人消化雜志，2017，25（26）：2322-2328.

[10] Perez-Oliva A B，Lachaud C，Szyniarowski P，et al.USP45 deubiquitylase controls ERCC1-XPF endonuclease-mediated DNA damage responses[J].EMBO J，2015，34（3）：326-343.

[11]陳瀑，林群，鄒麟，等.慢性乙型肝炎病毒感染自然史中HBsAg和HBsAb共存血清學模式分析[J].中國微生態(tài)學雜志，2018，30（1）：70-74.

[12] Seo S I，Choi H S，Choi B Y，et al.Coexistence of hepatitis B surface antigen and antibody to hepatitis B surface may increase the risk of hepatocellular carcinoma in chronic hepatitis B virus infection：a retrospective cohort study[J].J Med Virol，2014，86（1）：124-130.

[13] Wiegand J，Wedemeyer H，F(xiàn)inger A，et al.A decline in hepatitis B virus surface angtigen（HBsAg）predicts clearance，but does not correlate with quantitative HBeAg or HBV DNA levels[J].Antiver Ther，2008，13（4）：547-554.

[14]符曉莉，王磊，劉峰.乙肝病毒感染不同階段血清HBsAg定量值及其與HBV DNA水平和年齡的相關(guān)性[J].山東大學學報（醫(yī)學版），2013，51（5）：94-98.

[15]孫丹鳳，陸許貞，謝新生，等.慢性乙型肝炎及肝硬化患者乙型肝炎表面抗原及乙型肝炎病毒DNA定量檢測的臨床意義[J/OL].中華危重癥醫(yī)學雜志（電子版），2017，10（3）：172-175.

[16] Yao C C，Hung C H，Hu T H，et al.Incidence and predictors of HBV relapse after cessation of nucleoside analogues in HBeAg-negative patients with HBsAg ≤ 200 IU/mL[J].Sci Rep，2017，7（1）：1839.

[17] Martinot-Peignoux M，Carvalho-Filho R，Lapalus M，et al. Hepatitis B surface antigen serum level is associated with fibrosis severity in treatment-na?ve，e antigen-positive patients[J].

J Hepatol，2013，58（6）：1089-1095.

[18]周洪波，李晶媛，趙勇華.乙型肝炎病毒感染不同階段HBsAg定量變化的研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報，2013，47（4）：350-351.

[19]鮑騰，胡慶剛，葉珺，等.HBsAg水平在慢性HBV感染者疾病進展中的動態(tài)監(jiān)測價值[J].臨床肝膽病雜志，2017，33（8）：1475-1478.

[20]陳瀑，史靜，鄒麟.HBsAg定量檢測在慢性乙型肝炎自然病程中的意義[J].中國微生態(tài)學雜志，2013，25（8）：928-930，938.