血清前蛋白轉化酶枯草溶菌素9、親環素A與冠心病影響因素及冠狀動脈病變的關系

潘廣杰 李松森 陳 艷 陳繪麗 梁 爽

(鄭州大學附屬洛陽中心醫院心血管內科，河南 洛陽 471000)

冠心病(CHD)發病機制仍是近年來國內外臨床研究的重點〔1，2〕。前蛋白轉化酶枯草溶菌素(PCSK)9作為一種絲氨酸蛋白酶，可能直接參與CHD發生發展，PCSK9抑制劑或可作為CHD治療藥物處于研發過程〔3〕。親環素(Cyp)A作為一種炎癥蛋白在動脈粥樣硬化斑塊中大量表達，提示CypA可能參與了CHD患者動脈粥樣硬化斑塊的形成過程〔4〕。本課題分析血清PCSK9、CypA水平與CHD影響因素及冠狀動脈病變程度的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 經院內倫理委員會同意，選取2013年4月至2016年2月洛陽中心醫院治療的106例因胸痛或胸悶且經冠狀動脈造影確診的CHD患者為研究組，男69例，女37例，年齡56～79歲，平均(73.5±12.4)歲。同期健康體檢志愿者34例為對照組。兩組年齡、體重指數(BMI)及性別比差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2排除標準 合并擴張型心肌病、風濕性心臟病；6個月內有急性心肌梗死及腦血管意外發作史；存在嚴重的肝、腎、腦和內分泌功能障礙，嚴重的心功能不全；合并感染、腫瘤或免疫系統疾病；3個月內接受過降脂、降壓或降糖治療。

1.3CHD影響因素及判斷標準 收集性別、BMI、是否存在高血壓、糖尿病、是否吸煙、是否存在冠心病家族史和高血脂。BMI<24.0 kg/m2為正常，24.0～27.9 kg/m2為超重，≥28.0 kg/m2為肥胖。吸煙史：煙齡5年，每日平均吸煙≥10支，既往有規律吸煙史，但現在已戒煙<6個月者視為吸煙。CHD家族史：患者一級親屬中有CHD，包括有心絞痛、心肌梗死和曾經行冠脈搭橋或介入手術。高血脂：膽固醇、三酰甘油和低密度脂蛋白(LDL)任何一項升高者為血脂異常。

1.4CHD病變 CHD病變范圍：冠脈受累、單支、雙支、三支〔4〕。CHD狹窄程度：以美國心臟病學會和美國心臟病學院指南為診斷標準，主要冠狀動脈左主干、左前降支、左回旋支或右冠狀動脈單支或以上管腔直徑狹窄≥50%診斷為CHD，依狹窄程度分類：狹窄<50%為輕度狹窄，狹窄50%～74%為中度狹窄，狹窄75%～99%為重度狹窄，狹窄100%為閉塞病變〔5〕。

1.5血清PCSK9、CypA的檢測 收集清晨空腹靜脈血3 ml，置于普通試管中，離心得分離血清，檢測血清PCSK9和CypA，檢測采用雙抗夾心酶聯免疫吸附法，試劑盒由上海朗頓生物科技有限公司提供。

1.6統計學方法 采用SPSS20.0統計軟件進行t、χ2、單因素方差分析、Spearman相關分析。

2 結 果

2.1血清PCSK9、CypA水平與CHD影響因素的關系 影響CHD的各種因素中，高血壓、糖尿病和高血脂者PCSK9和CypA水平顯著高(P<0.05)，性別、體重指數、是否吸煙和存在CHD家族史對PCSK9和CypA水平影響不大(P>0.05)，見表1。

表1 血清PCSK9、CypA水平與CHD影響因素的關系

2.2血清PCSK9、CypA與冠狀動脈病變的關系 隨著冠狀動脈病變范圍和冠狀動脈狹窄程度的增大，血清PCSK9和CypA明顯增高(P<0.05)，見表2。

表2 血清PCSK9、CypA與冠狀動脈病變的關系

3 討 論

CHD是多個危險因素影響的疾病，大量研究顯示CHD的危險因素有性別、BMI、是否存在高血壓、糖尿病、是否吸煙、是否存在CHD家族史和高血脂等〔5〕。

PCSK9是一種前蛋白轉化酶，其基因突變可導致嚴重的家族性高膽固醇血癥。PCSK9作為一種分泌性蛋白存在于血液中，本課題結果顯示PCSK9一定程度可用于評估CHD患者代謝狀況，其解釋可能有以下幾點〔3，6～11〕：①PCSK9可通過功能獲得性基因突變方式增強降解LDL受體(LDLR)的能力，從而使血脂尤其是LDL膽固醇(LDL-C)不能有效清除而升高；②當頸動脈血流速度降低，血流剪應力也顯著降低，血流剪應力異常處的氧化應激明顯增加，血管內皮細胞及平滑肌細胞PCSK9表達增加(平滑肌細胞是唯一表達和分泌活性PCSK9 的血管細胞)，該部位更容易形成動脈粥樣硬化，促進血管狹窄，在人動脈粥樣斑塊中可檢測到PCSK9表達，同時PCSK9在糖尿病患者動脈粥樣硬化發生過程還起著長期的貢獻作用；③PCSK9參與血管壁炎癥反應，促進血管內皮細胞及單核巨噬細胞的凋亡。PCSK9 siRNA可有效抑制清道夫受體CD36表達及氧化型LDL誘導的人外周血單核細胞系(THP)-1源性巨噬細胞及臍靜脈內皮細胞凋亡。

CypA屬于高度保守的蛋白質，在生物界廣泛存在，生物學功能及活性多種多樣。與PCSK9相似，本課題結果顯示CypA在預測CHD的病變程度方面具有重要價值，原因在于〔4，8，12～14〕：①CypA能趨化并活化炎性細胞，趨化中性粒細胞、單核/巨噬細胞、T淋巴細胞等聚集于炎癥反應部位，將上述炎性細胞活化所產生多種炎性因子如白細胞介素(IL)-8、IL-6、基質金屬蛋白酶(MMPs)、腫瘤壞死因子(TNF)-α等用于加強血管內皮的炎癥反應，例如MMP-9可以破壞血管內皮完整性，為炎性細胞浸潤、遷移提供一定基礎，形成動脈粥樣硬化斑塊；②CypA誘導血管壁的巨噬細胞大量攝取氧化LDL轉化為泡沫細胞，沉積在血管壁，為CHD發生提供脂類物質基礎；③CypA還可以通過激活細胞外調節蛋白激酶(ERK)1/2、蛋白激酶B(Akt)、非受體酪氨酸激酶(JAK)通路促進血管平滑肌細胞的增殖和遷移，血管平滑肌細胞從中膜遷移入內膜，在內膜增殖和分泌細胞基質成分，參與血管狹窄和動脈粥樣硬化過程，進一步的研究也提示血清CypA水平還可作為糖尿病患者血管炎癥病變程度的指標。

本課題局限在于標本數量較少，女性受試者以絕經后女性為主，絕經后女性雌激素分泌減少，是否對PCSK9或CypA水平產生影響，仍需要進一步研究。