高山紅景天在藥品檢驗(yàn)中含量測(cè)定方法研究

彭振宇 隋思博

【摘要】高山紅景天，我國(guó)古代第一部醫(yī)學(xué)典籍《神農(nóng)本草經(jīng)》中，紅景天被列為上品，稱其具有“主養(yǎng)命以應(yīng)天，無(wú)毒，多服久服不傷身”，“輕身益氣，不老延年”之功效。《月王藥珍》中也有關(guān)于紅景天的記載。據(jù)記載，清代康熙皇帝就曾欽封紅景天為“仙賜草”，并下令民間不得食用，指定其為宮廷專用的御用品。鑒于紅景天的特殊功效，早在七十年代中期國(guó)外就將其制成浸膏，給宇航員、飛行員、潛水員、運(yùn)動(dòng)員等作為保健品，廣泛用于保健醫(yī)學(xué)、運(yùn)動(dòng)醫(yī)學(xué)、軍事醫(yī)學(xué)、航天醫(yī)學(xué)及預(yù)防醫(yī)學(xué)。庫(kù)頁(yè)紅景天藥用記載源于《長(zhǎng)白山植物藥志》，藥用部位為全草，根及根莖。功效應(yīng)用 全草：滋補(bǔ)強(qiáng)壯，降壓，安神，用于氣虛體弱，病后畏寒，氣短乏力，肺熱咳嗽，咳血，白帶，腹瀉，跌打損傷，燙火傷，神經(jīng)癥，高原反應(yīng)。根及根狀莖：抗寒，抗疲勞，抗缺氧和適應(yīng)原作用。庫(kù)頁(yè)紅景天不但具有類似中醫(yī)“扶正固本”的適應(yīng)原樣作用，而且其藥理作用效果和強(qiáng)度是已知補(bǔ)益藥中罕見(jiàn)的。在長(zhǎng)白山地區(qū)，當(dāng)?shù)鼐用穹Q其為“長(zhǎng)生不老草”，神農(nóng)架地區(qū)亦稱之為“九死還生草”。

【關(guān)鍵詞】高山紅景天；藥品檢驗(yàn)；含量測(cè)定

【中圖分類號(hào)】R927.1 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】A 【文章編號(hào)】ISSN.2095-6681.2018.20..02

參照中國(guó)藥典2015年版一部紅景天項(xiàng)下和大株紅景天注射液項(xiàng)下含量測(cè)定方法，采用高效液相色譜法測(cè)定紅景天苷和酪醇的含量。

1 方法考察與結(jié)果

1.1 儀器與試藥

Agilent 1200液相色譜儀，LC-2010CHt高效液相色譜儀，對(duì)照品購(gòu)于中檢定院，供含量測(cè)定用，高山紅景天批號(hào)：110818-201507（含量99.4%），酪醇111676-200401；乙腈為色譜純，水為超純水，其它試劑均為分析純。

1.2 測(cè)定波長(zhǎng)的選擇

取紅景天苷、酪醇對(duì)照品適量，精密稱定，分別加甲醇溶解，在紫外區(qū)200～400 nm掃描，結(jié)果，紅景天苷、酪醇在275 nm附近有最大吸收，與大株紅景天注射液方法所采用的檢測(cè)波長(zhǎng)（278 nm）基本一致。故選定278 nm作為本品的測(cè)定波長(zhǎng)，見(jiàn)圖1、圖2。

1.3 流動(dòng)相的選擇

參照2015年版藥典的方法，采用乙腈-水系統(tǒng)為本法流動(dòng)相，通過(guò)試驗(yàn)，將二者比例調(diào)至7：93，在此條件下，供試品圖譜基線平穩(wěn)，供試品色譜圖中紅景天苷和酪醇能得到很好的分離，主峰前后無(wú)雜峰。

2 方法學(xué)驗(yàn)證

2.1 線性關(guān)系

取紅景天苷、酪醇對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1 mL含紅景天苷0.4536 mg（未折算純度）、酪醇0.031584 mg的混合溶液，分別精密吸取對(duì)照品溶液1、3、5、7、9 μL，進(jìn)樣測(cè)定，以對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，以峰面積值為縱坐標(biāo)，分別繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程，數(shù)據(jù)見(jiàn)圖3、圖4。結(jié)果紅景天苷在0.4536～4.0824 μg范圍內(nèi)，酪醇在0.031584～0.284256μg范圍內(nèi)，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性關(guān)系良好，符合外標(biāo)法定量測(cè)定的要求。

2.2 精密度試驗(yàn)

2.2.1 重復(fù)性

取同一份供試品溶液，按正文擬定的色譜條件，連續(xù)進(jìn)樣6次。結(jié)果表明6次測(cè)定的紅景天苷峰面積平均值為612，RSD=0.38%（n=6）酪醇峰面積平均值為167，RSD=0.88%（n=6），試驗(yàn)表明本法的精密度良好。

2.2.2 重現(xiàn)性

取同一供試品依正文的方法平行測(cè)定6份，計(jì)算，6份樣品測(cè)得紅景天苷含量的平均值為0.152%，RSD=1.22%（n=6），含量的平均值為0.89%，RSD=1.3%（n=6），酪醇含量的平均值為0.094%，RSD=2.2%（n=6），試驗(yàn)結(jié)果表明本法的重現(xiàn)性良好。

2.3 準(zhǔn)確度試驗(yàn)

精密稱取紅景天苷和酪醇對(duì)照品適量，加甲醇制成每1 mL

含紅景天苷0.9242 m（純度99.4%）g、含酪醇0.0848 mg的混合溶液，作為加標(biāo)對(duì)照品溶液。精密稱取同法測(cè)定已知含量的供試品6份，每份約1 g，置具塞錐形瓶中，分別精密加入加標(biāo)對(duì)照品溶液10 mL，再精密加入甲醇15 mL，按正文的方法提取、測(cè)定，計(jì)算回收率及RSD。結(jié)果：紅景天苷平均回收率為98.5%，RSD=2.26%（n=6），酪醇平均回收率為98.7%，RSD=2.83%（n=6）。

2.4 耐用性試驗(yàn)

色譜柱考察：實(shí)驗(yàn)中比較了Sepax Bio-C18（5 μm，Φ4.6×150 mm），Luna C18（5 μ，Φ4.6×25mm）兩種色譜柱，按照正文方法色譜條件進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，結(jié)果兩者均能較好地將紅景天苷和酪醇兩種成分分離，采用上述兩種柱進(jìn)行試驗(yàn)，供試品色譜峰分離良好，根據(jù)上述兩種柱的檢測(cè)結(jié)果，參考中國(guó)藥典2015年版一部紅景天項(xiàng)下，確定本品理論板數(shù)按紅景天苷計(jì)算應(yīng)不低于4000。

3 樣品測(cè)定及含量測(cè)定的測(cè)定

按正文含量測(cè)定方法，測(cè)定了本品10批樣品中紅景天苷、酪醇的含量，見(jiàn)表1，上述10批樣品，紅景天苷及酪醇的含量值差異較大，最大最小值相差4、5倍，與高山紅景天性狀相近的藥材7～10四批含量均較低，且批次較少，不具有代表性。故以對(duì)照藥材測(cè)定值60%為最低限，暫定本品按干燥品計(jì)算，含紅景天苷（C14H20O7）不得少于0.15%，含酪醇（C6H10O2）不得少于0.020%。紅景天苷、酪醇HPLC圖、紅景天苷樣品HPLC圖分別見(jiàn)圖3、

圖4。

參考文獻(xiàn)

[1] 《中國(guó)藥典》2015年版一部.

本文編輯：吳宏艷