室溫下注射用頭孢西丁穩定性研究*

王洪銳，徐玉紅，何 英

（1.廣東省深圳市寶安區福永人民醫院，廣東 深圳 518103； 2.中山大學附屬第八醫院，廣東 深圳 518033）

藥品效期是指藥品在規定貯藏條件下，能維持其質量標準的最大期限。每種藥品都標示有經藥品監管部門批準的貯藏條件及有效期，嚴格遵守藥品規定的貯藏條件，并在效期內使用，是保證藥品安全性和有效性的重要前提。而實際情況是，市場上流通使用的藥品，說明書【貯藏】項標示為冷處及陰涼處貯藏的藥物越來越多，而在藥品供應、使用的終端環節，如急救車、醫院藥房備藥環節，患者出院帶藥環節及臨床配液給藥環節，很難保證藥品在貯存、使用全過程中完全符合貯藏條件[1－5]。頭孢西丁為半合成的第2代頭孢菌素類抗菌藥物，對革蘭陽性菌、革蘭陰性菌及厭氧菌均有殺滅作用，且具有高度抗β－內酰胺酶性質，臨床應用廣泛。注射用頭孢西丁需遮光、密閉、在陰涼干燥處保存（不超過20℃），但醫院藥房、配液室等終端貯存、使用環節多不能滿足此貯存條件，常需要26℃空調室溫環境下短暫貯存藥品。本研究中采用藥物穩定性長期及加速試驗方法，觀察室溫貯藏條件下注射用頭孢西丁的穩定性，為在溫度變異條件下藥品的短期貯存管理提供依據。現報道如下。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

Agilent 1100型高效液相色譜儀，包括G1311A四元泵、G1322A真空脫氣機、G1315B－DAD檢測器、D1316A柱溫箱，rheodyne－7725i手動進樣器、Chem-Station工作站（美國安捷倫公司）；UV－2201型紫外分光光度計（日本島津公司）；AG285型電子天平（梅特勒托利多儀器有限公司）；pHS－3C數字pH計（上海精科雷磁儀器廠）；DGX－90703B－1型電熱鼓風干燥箱（10～250℃，溫度波動范圍為±1℃，上海福瑪實驗設備有限公司）。

1.2 試藥

頭孢西丁對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號為130572－201102，質量分數為95.3%，供含量測定用）；注射用頭孢西丁（海南某制藥有限公司，批號分別為 140301，140602，141001，規格為每支 2.0 g）；甲醇、乙腈均為色譜純（德國Merck公司）；其他試劑均為分析純，水為高純水。所有試劑及緩沖液使用前均經0.45μm微孔濾膜濾過。

2 方法與結果

2.1 含量及有關物質測定[6]

色譜柱：ZorbaxEclipseXDB－C18柱（250mm×4.6mm，5μm）；流動相：水 －乙腈 －冰醋酸（81∶19 ∶1）；檢測波長：270nm；流速：1.0mL ／min；柱溫：25℃；進樣量：10μL。系統適用性試驗符合藥典要求。有關雜質含量測定采用梯度洗脫法進行。

2.2 長期穩定性試驗

取足夠數量3個批號的注射用頭孢西丁（試驗開始日期距離標示生產日期不超過6個月），以市售原包裝形式分別貯存在18，26，30℃3個溫度條件下放置6個月，首次測定分析后每隔1個月取樣測定分析。比較含量、雜質、酸度、澄清度和顏色變化情況，以評估注射用頭孢西丁在規定貯藏條件下和非規定貯藏條件下的質量穩定性。結果顯示，在18℃和26℃貯存6個月后，其質量可維持穩定；在30℃貯存6個月后，批號為141001的藥品標示含量不達標，顏色及雜質總量接近高限。結果見表1至表3。

2.3 殺菌效力試驗

選取質控菌株金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及1株臨床分離經生化鑒定為肺炎克雷伯菌且對頭孢西丁敏感的菌株為試驗對象，采用常量肉湯稀釋法比較不同溫度條件下貯存0，3，6個月后3批注射用頭孢西丁最小抑菌／殺菌濃度（MIC／MBC）的變化情況。

結果各批號注射用頭孢西丁在18℃和26℃貯存6個月后，對金黃色葡萄球菌ATCC29213、大腸埃希菌ATCC25922及臨床分離的肺炎克雷伯菌的 MIC／MBC未發生變化；30℃貯存6個月后，批號為140602及141001的藥品在3個月或6個月時對上述菌株 MIC發生變化，但按美國臨床和實驗室標準化協會（clinicaland laboratory standard institute，CLSI）標準規定[7]，仍在規定范圍內。

表1 注射用頭孢西丁18℃長期穩定性試驗結果

2.4 等溫加速試驗

采用經典恒溫法對注射用頭孢西丁在25℃的有效期進行推算。分別將若干支注射用頭孢西丁置40，50，60，70℃ 4個溫度條件下，分別在設定試驗時間（t）取樣進行含量測定，并計算其標示量（A）。結果見表4。得到的數據分別按0級、1級和2級化學反應動力學方程進行擬合，以獲得其最佳熱降解動力學方程。結果表明，在設定溫度范圍內，注射用頭孢西丁熱降解可用一級反應動力學方程ln C＝ln C0－Kt描述。不同溫度時間條件下的線性回歸方程及相關系數見表5，各方程斜率相反數即對應各溫度下的速率常數。根據阿侖尼烏斯（Arrhenius）公式，以速率常數（K）的自然對數（ln K）對熱力學溫度（T）的倒數作圖并進行線性回歸，得方程lnK＝ －9 269.6／T＋19.444（R2＝0.980 7）。將溫度 20℃和25℃分別代入方程，即可推算出注射用頭孢西丁在20℃及 25℃的速率常數分別為 K20＝5.07×10－6／h，K25＝8.62×10－6／h，按濃度下降至初始濃度的 10%為有效期計算，20℃有效期為29個月，與藥品說明書標識效期接近；25℃有效期為17個月，縮短約40%。假定初始標示含量為100.00%，在25℃貯存約6個月后，經推算，其標示含量約為初始標示含量的96.00%。

表2 注射用頭孢西丁26℃長期穩定性試驗結果

表3 注射用頭孢西丁30℃長期穩定性試驗結果

3 討論

目前，藥品穩定性研究文獻中，國內報道基本集中在藥品研發、臨床配液使用或與其他藥品相互配伍穩定性方面，關于市售完整包裝藥品在溫度波動情況下的穩定性研究基本沒有[8－10]。本研究中對需在陰涼處貯存的注射用頭孢西丁在非規定貯存溫度下的穩定性進行了初步研究。6個月長期穩定性試驗結果表明，注射用頭孢西丁在26℃和30℃ 2個非規定貯存溫度條件下分別貯存6個月和3個月后，其含量、有關物質、酸度及檢查項（溶液澄清度與顏色）仍符合法定質量標準要求，殺菌效力也未發生明顯變化，表明在此模擬貯存條件下和時限內，頭孢西丁質量仍相對穩定可靠。

表4 注射用頭孢西丁不同溫度、不同時間含量測定結果（標示含量）

表5 不同溫度時間條件下ln A－t回歸方程及相關系數

藥物有效期預測方法的理論基礎是化學動力學，為預測注射用頭孢西丁在常溫條件下的穩定性及有效期，本研究中采用經典恒溫法對其降解規律及有效期進行了研究和預測。結果表明，在試驗溫度范圍內，注射用頭孢西丁熱降解動力學模式最符合一級動力學反應特征。隨著溫度逐漸升高，注射用頭孢西丁的熱降解速率常數逐漸增大，符合溫度每升高10℃，反應速率常數增加2～4倍規律特征。研究結果證實，溫度對于注射用頭孢西丁的穩定性有較大影響，在20℃貯存，預測效期為29個月，與說明書標識有效期接近；25℃貯存時，預測效期為17個月，相比20℃縮短約40%。據此推測，假定標示含量為100.00%的注射用頭孢西丁從貯存溫度條件符合規定的醫院藥庫領出后，在25℃貯存6個月，藥品標示含量約為原始標示量的96.00%，含量項仍符合法定質量標準要求，與長期留樣試驗結果相符。如果按其藥品質量標準標示含量為90.00%～110.00%計算，藥品可在25℃貯存6個月的前提是初始標示量不得低于94.00%，且初始標示含量越低，25℃對應的貯存時間越短。在30℃溫度條件下，其推算有效期只有10個月。結果表明，溫度變化越劇烈，相應的使用效期縮短越明顯。

本研究為注射用頭孢西丁在醫院藥房、配液室等終端短暫超規定溫度存放提供了一定的參考依據，但也存在一定的局限。如研究只對某一廠家生產的注射用頭孢西丁在高于規定貯存溫度條件下的穩定性進行了研究，鑒于不同生產廠家生產的同一種藥品，工藝質量上可能存在差異，故研究結果不能武斷推及其他生產廠家的注射用頭孢西丁；即使同一廠家也可能存在工藝質量穩定性差異。對于易致過敏性的藥物，溫度變異下雜質變化對其致敏性的影響也需要重視。雖然本研究為注射用頭孢西丁可能發生的非規定溫度條件下的貯存提供了依據，但從監管、法律角度而言，尚無實際意義，在實際藥品貯存中應盡可能遵守藥品說明書。

藥品的穩定性取決于溫度、濕度等多種因素，對于完整包裝的市售藥品，溫度因素最關鍵，溫度升高常導致藥品降解加速、臨床療效下降，甚至毒性增加。鑒于在藥品流通運輸、貯存及使用過程中，特別是對于需陰涼處保存的藥品，不可避免地會出現超出溫度上限的情況，非規定貯存溫度條件下短期貯存藥品在世界范圍內均不可避免[1－5]。因此，對非規定貯存溫度條件下藥品質量維持程度，如藥品的最高耐受溫度、在某一溫度范圍內其可耐受的時間極限等進行研究有現實意義[11]。