普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白性能驗證

劉新剛，曹 科，沈 丹，吳蘇偉，唐 丹，陳運生，馬東禮

(廣東省深圳市兒童醫院檢驗科 518038)

根據《醫療機構臨床實驗室管理辦法》和《醫學實驗室質量和能力認可準則》的規定要求，實驗室應對設備、檢測系統或方法的主要分析性能進行驗證[1-2]。證實其能夠達到臨床檢測所要求的標準[3-4]。現參照相關文獻資料結合本實驗室工作實際情況，制定了相應的驗證方案，對普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白的主要性能進行驗證。報道如下。

1 材料與方法

1.1一般材料 該院住院患者的靜脈血標本。

1.2儀器與試劑 普門PA-900、PA-980特定蛋白分析儀及各自配套試劑和校準品。伯樂特定蛋白質控品(批號66342)和國際參考品ERM-DA474(歐洲標準局網站購買，批號6094)。

1.3實驗方法

1.3.1空白檢測 使用稀釋液當作標本檢測，每個通道檢測結果應小于0.5 mg/L。

1.3.2攜帶污染率 取高值、低值全血標本各1例依次測高值3次(H1、H2、H3)、低值3 次(L1、L2、L3)，計算攜帶污染率。攜帶污染率小于1%，結果為可接受。計算公式：攜帶污染率=|(L1―L3)|/(H3―L3)×100%。

1.3.3精密度 (1)批內精密度：取高值、中值、低值3個濃度的全血標本，每個檢測通道連續重復測定11次取后10次檢測結果，計算各檢測通道的均值(X)、標準差(SD)和變異系數(CV)。判斷是否小于廠家規定(CV≤5%)的性能指標。(2)日間精密度：取中值、低值2個濃度的伯樂質控品，每天在每個檢通道檢測1次，連續測定20 d，計算各檢測通道均值(X)、標準差(SD)和變異系數(CV)。判斷是否小于廠家規定(CV≤10%)的性能指標。

1.3.4儀器間比對 選20例(包含低、中、高濃度)全血標本，分別在PA-980和PA-900儀器各檢測1次，以PA-980儀器為參比儀器，計算偏差。判斷是否≥80%標本偏差≤12.5%。

1.3.5線性范圍驗證 選取高濃度(H)和低濃度(L)血清標本各1例。高值標本濃度約為200 mg/L,低值標本濃度約為0.5 mg/L。標本分別按H、4H+L、3H+2L、2H+3L、H+4L、L的比例進行稀釋，每個稀釋度重復測定2次，計算均值(X)。將實測值與理論值作比較，計算Y=bX+a，驗證線性范圍。判斷標準：斜率b值在1±0.05范圍內，相關系數(r)≥0.975(或R2≥0.95)即線性驗證合格。

1.3.6準確度 (1)國際參考品驗證：采用國際參考品(靶值41.2 mg/L)，分別在各通道檢測1次，計算偏差。要求偏差應≤5%。(2)廠家提供校準品驗證：分別在各通道檢測1次廠家提供5水平校準品，計算偏差。要求檢測濃度為0.5～5.0 mg/L偏差應≤10%，檢測濃度>5.0 mg/L，偏差應≤8%。

2 結 果

2.1空白檢測 各通道檢測結果均小于0.5 mg/L，空白檢測通過。見表1。

表1 空白檢測結果(mg/L)

2.2攜帶污染率 A、B、C通道攜帶污染率分別為0.29%、0.28%、0.24%，小于廠家≤1%的標準。見表2。

表2 攜帶污染率檢測結果

2.3精密度

2.3.1批內精密度 低、中、高值3個濃度的全血標本的批內精密度，A通道分別為2.73%、2.33%、1.71%；B通道分別為2.11%、2.77%、1.16%；C通道分別為1.73%、2.15%、1.10%。結果均小于廠家規定(CV≤5%)的性能指標。見表3。

2.3.2日間精密度 中值、低值2個濃度的伯樂質控品日間精密度，A通道分別為9.67%、4.95%；B通道分別為6.06%、3.58%；C通道分別為6.39%、4.80%。結果均小于廠家規定(CV≤10%)的性能指標。見表4。

表3 批內精密度檢測結果

表4 日間精密度檢測結果

2.4儀器間比對 經與PA-980比對，20例全血標本其中有18例檢測結果偏差≤12.5%。符合至少80%標本偏差應≤12.5%的廠家聲明。見表5。

表5 儀器間比對檢測結果

2.5線性范圍驗證 線性范圍驗證結果表明，所測超敏C-反應蛋白濃度為0.3～200.0 mg/L，線性范圍好，與理論值高度相關。見表6和圖1。

表6 線性范圍檢測結果

圖1 線性范圍驗證結果

2.6準確度驗證結果 (1)國際參考品驗證：國際參考品檢測結果A通道為42.55 mg/L、B通道為43.01 mg/L、C通道為43.19 mg/L，偏差分別為3.3%、4.4%、4.8%,均符合偏差小于5%的要求。(2)廠家提供校準品驗證：5個水平廠家校準品檢測結果與靶值的偏差均小于廠家的聲明。見表7。

表7 5水平廠家校準品驗證結果

3 討 論

C-反應蛋白是一種能與肺炎球菌C多糖反應形成復合物的急性時相反應蛋白，患者在各種急性炎性反應、組織損傷、心肌梗死、手術創傷、放射性損傷的疾病發作后數小時迅速升高，病情好轉后又迅速降至正常，其升高幅度與感染的程度呈正相關。C-反應蛋白可以反映急性炎性病情，具有臨床重要意義[5-6]。隨C-反應蛋白測定在臨床的廣泛應用，尤其與白細胞計數聯合檢驗的方法對兒科醫師制定治療方案具有重要的參考作用，有利于實現個性化治療的需要，同時，還可避免使用不必要的抗菌藥物，保證患兒的健康恢復[7]。傳統方法檢測血清C-反應蛋白標本用量大，兒童采血困難，同時床旁檢測人為影響因素多，可能影響檢測結果的準確度及精密度，對臨床造成誤診及漏診[8]。而全血(末梢血)C-反應蛋白的檢測快速、方便、經濟、結果準確可靠、創傷小，更容易被患兒及其家屬接受[9]。

通過對普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白主要性能進行驗證，本研究結果表明，普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白的空白檢測小于0.499，攜帶污染率小于1%，批內及日間精密度均符合要求。準確度驗證結果顯示，與國際參考品比較偏差均小于5%，與廠家標準品比較除低水平(5 mg/L)偏差約為8%外，其余4個水平偏差均小于5%，說明檢測結果準確可靠。線性范圍驗證實驗證實，普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白的線性范圍基本能夠滿足臨床標本的需要。儀器間比對證實2臺儀器之間結果具有可比性。

普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白，其用血量很少(僅需要10 μL)，開放進樣模式避免了死腔量對標本量的限制，且檢測速度快(60例/小時)能夠與血常規同步檢測,尤其適用于兒科門、急診患者血常規與C-反應蛋白同時檢測。

綜上所述，普門PA-900特定蛋白分析儀檢測超敏C-反應蛋白的各項性能指標能達到廠家聲明的標準，可用于臨床超敏C-反應蛋白的檢測。