幽門螺桿菌感染檢測方法的研究進展

焦冬菊，孫 軫 綜述，謝佳平 審校

(1.泰山醫學院，山東泰安 271000；2.山東省聊城市人民醫院消化內科 252000)

幽門螺桿菌(HP)感染的發病率在地理上雖有所不同，但約50%的世界人口為HP的感染者[1]。世界衛生組織已把HP列為第一類致癌因子，并明確為胃癌的危險因子。HP感染還被認為是非賁門胃癌發生的最重要危險因素，在全球范圍內，約占此類胃癌的90%，占所有癌癥的5%[2]。此外，HP感染還與兒童鐵缺乏、維生素B12缺乏、特發性血小板減少性紫癜和生長遲緩有關[3]。因此，早期診斷和根除HP是降低胃癌發生風險的關鍵步驟。而及時、準確的HP檢測是治療的前提和基礎。現就HP感染檢測方法的研究進展作一綜述。

1 非侵襲性檢測方法

1.1尿素呼氣試驗 尿素呼氣試驗基于HP脲酶(脲酶是一種將尿素轉化為氨和二氧化碳的酶，不存在于哺乳動物細胞中)的產生，包括13C尿素呼氣試驗和14C尿素呼氣試驗。

13C尿素呼氣試驗仍是一個高精度的診斷測試，雖不是一個真正的定量試驗，但可用于HP負荷的半定量評價。已經有研究證實，高細菌負荷與三聯療法的成功率呈負相關，而對于四聯療法組之間差異無統計學意義(P>0.05)[4]。然而，UBiT試劑盒已被證實具有較高的假陽性結果，可能是由于缺乏檸檬酸和較低的DOB閾值(2.5‰)[5]。西班牙的一項研究，應用UBiT試驗檢測HP與細菌培養、組織學檢測、快速尿激酶試驗相比，假陽性結果為44/272例(16.2%)。當再附加進行2項PCR檢測(基于尿素和16S rDNA)時，44例中只有12例(27%)假陽性結果確定是真陽性[6]。

有研究顯示，14C尿素呼氣試驗對HP感染的診斷準確性進行了分析，14C尿素呼氣試驗診斷的敏感性為0.96%，特異性為0.93%，表明14C尿素呼氣試驗診斷HP感染具有良好的敏感性和特異性[2]。

1.2糞便抗原檢測 糞便抗原檢測是指檢測糞便標本中HP抗原的存在，面臨的主要問題是患者的依從性，這危及了測試的成本效益問題。一個全面的建模分析顯示，糞便抗原檢測的依從性約為48%，相比之下，尿素呼氣試驗和血清學檢測的依從性為86%[7]。

1.3血清學檢測 血清學檢測的優點即非侵入性，在接受治療(質子泵抑制劑和抗菌藥物)或急性出血患者中不會產生假陰性結果[8]。但其無法區分過去和現在的HP感染,因而不能反映HP的現狀感染，也不能用于療效觀察。此外，人類宿主的個體遺傳差異對HP抗體水平有很大的影響。

2 侵襲性檢測方法

2.1快速尿素酶試驗 快速尿素酶試驗基于HP的尿素酶活性，能將檢測試劑轉化為氨，導致pH值升高，從而使pH監測儀的顏色發生變化。一般而言，商業性快速尿素酶試驗的特異性約為95%～100%以上，敏感性約為85%～95%以上。然而，不同的商業試劑取得的結果需不同的反應時間。早于推薦時間閱讀尿素酶試驗可能導致假陰性結果[9]。此外，活檢標本存在細菌密度、H2受體拮抗劑、質子泵抑制劑、鉍劑、抗菌藥物、胃酸缺乏和出血，所有這些都增加了假陰性結果的可能性[10]。而且，對尿素酶試驗在兒童HP檢測中的應用的敏感性仍存在爭論。

2.2細菌學培養 細菌培養在管理HP治療失敗、抗菌藥物耐藥性及敏感性研究中起著重要作用。此外，細菌培養還可以分離HP，以便進一步分析其表型和基因型特征，從而更好地了解病原體，提供治療評價。然而，培養HP既費時又費力，且HP是一種非常挑剔的細菌，其培養結果嚴重依賴于環境。細菌分離的敏感性在實驗室之間差別很大。另外，宿主因素如胃炎活性高、細菌負荷低、出血、飲酒、使用H2受體拮抗劑、質子泵抑制劑(PPI)、抗菌藥物等對培養陽性率有不良影響。在培養之前，抗菌藥物至少停藥4周，其他藥物至少停藥2周[11]。根據活檢的數量、培養基、運輸方式和方法的不同，培養基檢測的敏感性從50%～95%，特異性為95%[12]。

2.3組織學檢測 組織學檢測有助于深入了解胃黏膜狀況。有研究報道，消化性潰瘍患者不管是否出血，相比細菌培養、血清學和快速尿激酶試驗，組織學檢查最準確[13]。但影響組織學診斷準確性的因素也很多，如取組織部位、大小和數目，染色方法，是否應用質子泵抑制劑、抗菌藥物，以及病理學檢測人員的經驗等。

2.4多聚酶鏈反應(PCR) 診斷測試越來越依賴于分子測試，它可以提供比常規方法更快、更準確和敏感的檢測方法，并有擴增的可能，從而用于其他用途，如抗菌藥物耐藥性和毒力因子的檢測及細菌定量。此外，PCR還可用于致病基因的鑒定，以及與抗菌藥物耐藥性相關的特異性突變檢測。不管怎樣，PCR擴增核酸技術普遍被應用，包括常規PCR和實時PCR。然而，常規PCR技術只能進行單基因定性檢測，不能做定量分析，而且不具備高通量和多重選擇性[14]。實時PCR技術的敏感性和重現性則很容易受探針選擇的影響[15]。

2.5內鏡下觀察 HP感染的檢測，非侵襲性試驗(如血清學、尿素呼氣試驗或糞便試驗)非常方便。然而，這些試驗不能提供胃黏膜的實時信息。這在臨床非常重要，尤其對一些特殊患者，如有消化不良癥狀、癌癥家族史患者等。這些患者的內鏡檢查非常必要，但通過內鏡檢測HP感染的侵襲性試驗(如組織學、細菌培養或快速尿素酶試驗)需取活檢標本，導致不必要的損傷和醫療費用。此外，由于淋巴結的局部分布，隨機活組織檢查并不完全準確。而通過胃鏡征象實時識別胃內HP感染區域不僅可減少抽樣誤差和過多的工作負荷，還可提高實驗室早期胃惡性病變(需要全胃更細致檢查)的檢測功效。

內鏡下胃炎的京都分類，提出了19個內鏡表現來表征胃黏膜炎性和HP感染的存在[16]。TONGTAWEE等[17]觀察14個與HP感染相關的內鏡特征，其中6個特征與HP感染密切相關，對HP的診斷有明顯的敏感性和特異性。包括胃黏膜黏液、胃黏膜彌漫性發紅、胃底黏膜點狀發紅、皺襞增粗、黏膜水腫和規則排列的集合靜脈(D型和I型)。R型與HP診斷無明顯的相關性。表明傳統的內鏡特征可以用于診斷中國患者的HP感染，并有助于確定胃癌的危險因素。見圖1。

注：A表示RAC(R型)傳統內窺鏡觀察；B表示RAC(R型)放大內鏡觀察；C表示RAC(I型)；D表示RAC(D型)

圖1 HP感染相關的內鏡特征

HAYASHI等[18]的研究顯示,HP感染患者正常的規則排列的集合靜脈模式與類型A、B、C模式出現的頻率分別為9.4%、87.7%、98.1%、90.9%。所有異常模式對HP感染的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值分別為93.3%、89.1%、92.3%、90.6%，總體準確率91.6%。見圖2。

注：A表示正常型，集合靜脈規則排列模式，可見許多微小的紅點；B表示A型，馬賽克一樣的外觀，以深層皺褶或蛇皮樣外觀為特點；C表示B型，彌漫性均勻發紅；D表示C型，非典型模式呈現出不規則的紅槽

圖2 HP感染患者正常的規則排列的集合靜脈模式

有學者通過內鏡下窄帶成像技術將胃黏膜形態學分為5種，包括1型：集合靜脈規則排列；2型：錐形胃小凹；3型：棒狀胃小凹；4型：磨玻璃樣形態；5型：邊界為藍色的邊緣不規則的深褐色斑塊。有研究顯示，1型和2型胃黏膜形態學模式預測HP陰性狀態均比其他胃黏膜形態學模式差異有統計學意義(P<0.01)，而3型、4型或5型胃黏膜形態模式預測HP陽性狀態比其他胃黏膜形態學模式差異有統計學意義(P<0.01)。將3型、4型、5型胃黏膜形態學模式結合分析，對診斷HP感染有較好的敏感性、特異性、陽性預測值、陰性預測值(分別為94.28%、96.66%、98.50%、87.87%)。有研究表明，使用c-nbi胃鏡觀察HP感染的胃黏膜形態學模式與炎性分級有明顯的相關性。

有學者研究表明，內鏡下白光成像和窄帶成像技術所見黃斑瘤可在HP相關性胃炎胃黏膜的任何部位存在，代表HP相關性慢性胃炎淋巴濾泡的內鏡特征。

總之，基于常規胃鏡檢查觀察HP感染后胃黏膜特征使內鏡醫師及臨床醫師對HP相關性胃部疾病有了更直觀的認識，越來越廣泛地應用于有經驗的醫師對HP感染的檢測和治療。

3 其他檢測方法

有學者指出了一種新的HP檢測方法：多基因遺傳分析系統 (MGAS)，是一種基于16S rRNA作為定性基因(其在HP中高度保守、穩定表達)，ureC作為定量基因(其在HP中為單一拷貝)的定性定量分析方法。通過對胃鏡下收集的活檢標本進行快速尿素酶試驗、組織病理學、常規PCR、MGAS分析，結果顯示MGAS的敏感性和特異性分別為92.9和92.4%，陽性預測值和陰性預測值分別為96.0%和87.1%。所有上述參數均高于細菌培養(除特異性)、快速尿激酶試驗和組織病理學與常規PCR檢測接近。為HP感染的臨床檢測和治療效果監測提供新方法。

LI等[19]研究磁性石墨納米膠囊(MGNs)在原位靶向磁共振成像檢測HP中的應用。MGNs的磁性核心是磁共振成像的基礎，外殼能耐酸、耐腐蝕以保護內在磁性核心不被腐蝕。MGNs外殼的硼酸聚乙二醇復合物能與HP細胞壁肽聚糖逆性結合，而帶有功能性MGNs的HP可通過 T2加權磁共振成像和胃組織的拉曼成像而被檢測。結果表明，應用MGNs的增強MRI可能是一個有前途的、在非常苛刻的條件下診斷HP的平臺。

4 結 語

目前診斷方法的發展使HP感染的診斷更加準確，從而提高HP相關疾病的治療。HP感染檢測金標準可能不存在，但可根據HP流行地區的患病率、可行性，各種方法的優缺點及每例患者不同的臨床情況而選擇不同的方法。相信在將來針對不同的臨床用途、特定人群、基因型特征，會有更可靠、可準確的HP感染診斷方法以提高HP感染的診斷率。