浙貝母SO2的滴定法檢測與本底調查

宗侃侃，朱瑜萍，孫彩霞，戴芬，趙學平

(1.磐安縣中藥材研究所，浙江 磐安 322300； 2.浙江經貿職業技術學院，浙江 杭州 310018；3.浙江省農業科學院 農產品質量標準研究所，浙江 杭州 310021)

浙貝母為百合科植物浙貝母FritillariathunbergiiMig.的干燥鱗莖，具有清熱散結、化痰止咳等功效，常用于治療風熱犯肺、痰火咳嗽、肺癰、乳癰、瘡毒等[1]，是著名的浙八味之一。在中藥材領域，硫磺熏蒸加工方法作為傳統的中藥材保護方法，起初用于少數富含淀粉、不易干燥的中藥材，但由于其能使藥材色澤美觀，延長貯藏期，提高藥材水分含量而獲得更大利益，故硫磺熏蒸在中藥材的初加工和貯存環節得到廣泛應用[2]。硫磺熏蒸會改變中藥材的藥性和化學成分，從而影響藥效，甚至危害人體健康。2005年版《浙江省中藥飲片炮制規范》及2010年版《中國藥典》都已經取消了硫磺熏蒸的加工方法，各浙貝母主產區也先后頒布了在加工中禁止使用硫磺的規定。根據2015年版《中國藥典》，山藥等10種中藥材的SO2殘留量不得超過400 mg·kg-1，其余不得超過150 mg·kg-1。浙貝母并不在山藥等10種中藥材之列，即SO2量不得超過150 mg·kg-1[3-4]。

為了解浙貝母主產區干燥浙貝母SO2的本底含量，建立了滴定法檢測浙貝母中SO2的方法，并對各地采集的新鮮浙貝母經過干燥后的產品進行了檢測，為了解浙江省各地浙貝母SO2的本底值提供參考數據。

1 材料與方法

1.1 供試材料

浙江省浙貝母生產主要集中在磐安縣、縉云縣、東陽市和寧波市海曙區等4個市縣(區)，共計收集35個樣品，其中磐安縣13個，縉云縣10個，東陽市10個，寧波市海曙區章水鎮2個。浙貝母干樣品主要來自生產基地采集后烘干品，農戶將浙貝母樣品采收后，清洗去除泥土，使用自備的烘干機或者送往集中加工點，在60 ℃左右烘干。樣品采集時間為2017年5—6月。浙貝母干樣采集后用粉碎機制成粉末分別放入分裝容器中。于4～8 ℃下保存、備用。

過氧化氫、鹽酸、焦亞硫酸鉀-EDTA、蔗糖、氫氧化鈉、碘、淀粉、溴酚藍均為分析純，99.5%純氮氣由杭州林德氣體公司提供。

1.2 分析方法

參照2015年版《中國藥典》中SO2的檢測方法(酸蒸餾-碘滴定)。取5.0 g干浙貝母粉末，精密稱定，置兩頸圓底燒瓶中，加水300 mL，連接分液漏斗，從分液漏斗加入 6 mol·L-1鹽酸溶液10 mL，并導入氮氣(流速100 mL·min-1)至瓶底，連接回流冷凝管，在冷凝管的上端連接導氣管，將導氣管插入50 mL 起泡器底部。起泡器內加3 mL過氧化氫溶液和淀粉指示液0.1 mL作為吸收液，滴加氫氧化鈉標準溶液使過氧化氫溶液呈中性。加熱兩頸圓底燒瓶內的溶液至沸，并保持微沸約30 min，控制氮氣的流速為每秒產生1～2個氣泡。采用0.01 mol·L-1氫氧化鈉標準溶液滴定起泡器內的溶液，至藍色或藍紫色持續20 s不褪色。

W1=32×103cV/m。

式中：W1為試樣SO2含量；c為氫氧化鈉標準溶液濃度；V為滴定耗用氫氧化鈉標準溶液的體積；32為每摩爾氫氧化鈉相當于SO2的質量數值；m為試樣質量；103為g與kg的換算系數。

2 結果與分析

從表1可以看出，在35個浙貝母樣品中相對偏差最大值為5.0%，說明該檢測方法的準確性較好。

表1 各來源浙貝母樣品中SO2的檢測情況

注：-表示未檢出。

磐安采集的13個樣品中，SO2最低值為22 mg·kg-1，最大值為165 mg·kg-1。SO2超過150 mg·kg-1的樣品有3個，樣品超標率為23.1%，含量超標分別為4.6%、4.6%和10.0%。縉云采集的10個樣品中，2個樣品SO2未檢出，檢出最大值樣品為149 mg·kg-1，均未超過150 mg·kg-1的限量標準。東陽采集的10個樣品中，SO2最低值為16 mg·kg-1，最大值為92 mg·kg-1，均未超標。海曙采集的2個樣品，SO2含量分別為47和70 mg·kg-1，均未超標。

總體來看，浙江省浙貝母生產基地SO2本底含量較低，最大含量超標率為10.0%，91.4%樣品的本底值符合《中國藥典》(2015年版)的規定。

3 討論

3.1 SO2檢測方法的改進

目前，SO2常用測定方法有滴定法[5]、比色法[6]、離子色譜法[7]和頂空氣相色譜法[8]等。其中，滴定法因操作簡單且測定成本低廉一直被視為經典方法沿用至今，主要有直接碘量法、酸蒸餾-碘量法和酸蒸餾-堿滴定法3種。《中國藥典》收錄酸蒸餾-碘量法為SO2測定的標準方法。酸蒸餾-碘量法的主要原理是氧化還原，將待測產品中的硫元素經過蒸煮氧化，氮氣帶出并吸收。檢測結果以指示劑的變色為終點。該方法受樣品蒸餾時間、氮氣通入量、吸收液吸收量、滴定終點判斷等因素的控制。在本實驗中，樣品在圓底燒瓶的蒸餾時間設置為30 min，起泡器內加3 mL過氧化氫溶液作為吸收液，延長蒸餾時間可以增加待測產品中硫元素的蒸出，增加吸收液體積可以保證蒸出的SO2吸收完全，但同時會降低檢測工作的效率，增加檢測過程中的試劑消耗和試驗誤差。據此提出以下建議：1)圓底燒瓶中樣品的蒸餾時間不宜太短或者太長，可以根據樣品的數量和性質設置30 min左右的蒸餾時間，待測樣品預處理研磨成粉末狀有利于SO2的氧化帶出；2)起泡器選擇底面積比較小的，增加吸收液高度，以減少SO2的逸出；3)對于SO2含量低的樣品，可適當降低氫氧化鈉溶液的濃度，以提高檢出靈敏度[9]。

3.2 國內外中藥材SO2限量標準的對比

針對目前SO2殘留問題，國際上已經在食品和中藥材領域制定了相關的限量標準[10]，如國際食品法典委員會(CAC)的《General Standard For Food Additives Codex Stan 192—1995》，我國《食品添加劑使用標準》(GB 2760—2014)也規定了SO2的限量標準(表2)。

表2 國內外中藥材及相關產品SO2限量的比較

相對于普通食品，現有國內外法規規定藥材中SO2的限量比較嚴格，CAC規定，冷凍水果和干蔬菜中SO2的限量為500 mg·kg-1，而中藥材則為150 mg·kg-1。GB 2760—2014規定，干制蔬菜SO2的限量為400 mg·kg-1，蜜餞涼果SO2的限量為350 mg·kg-1。

3.3 制定浙貝母SO2限量標準的建議

SO2屬于低毒物質，相比較于黃曲霉毒素和農藥殘留而言，對人體健康的危害性不是特別大。僅有特殊人群需要在一定的時期內定量服用中藥材，與普通食品的膳食暴露有很大區別。因此，從風險評估角度，中藥材中SO2的限量不應比普通食品的嚴格。本實驗僅采集了2017年度規模型浙貝母生產基地的樣品進行檢測，目前，我國對浙貝母中SO2的本底含量沒有常規的監測，建議在連續3～5年常規監測和風險評估的基礎上，制定合理的SO2限量標準。