廣西產拳卷地錢中農藥殘留檢測

王躍峰 牛思琪 笪舫芳 王劍 朱華

【摘 要】 目的：對廣西產拳卷地錢中總六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC）、總滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT）和五氯硝基苯9種有機氯農殘進行測定，為控制拳卷地錢安全限量提供實驗數據，為開發(fā)利用拳卷地錢藥材資源提供安全性保障。方法：利用氣相色譜法對以上9種有機氯農殘進行測定。結果：拳卷地錢中總六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）未檢出；總滴滴涕（ op′-DDT、pp′-DDE、pp′-DD、Tpp′-DDD之和）未檢出；五氯硝基苯未檢出。參考《中國藥典》收載的人參、西洋參藥材及其飲片品種項下“農藥殘留量”部分檢查限度，可見9種有機氯農殘檢出結果均合格。結論：由于農藥品種繁多，性質各異，近幾年其檢測技術主要是色譜法，其中以氣相色譜應用最為廣泛，該法檢測靈敏度高、簡便快捷、分離效果好，可作為拳卷地錢農殘安全限量監(jiān)測及質量控制的有效手段。

【關鍵詞】 拳卷地錢；農藥殘留；測定

【中圖分類號】R284.1 【文獻標志碼】 A【文章編號】1007-8517（2018）02-0026-03

Abstract：Objective Determination of 9 organochlorine pesticide residues of total 666 （α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC）， total DDT （pp′-DDE， pp′-DDD， op′-DDT， and pp′-DDT）， pentachloronitrobenzene in Marchantia convoluta.To provide experimental data for the control of safety limits of Marchantia convoluta， for the development and utilization of medicinal of Marchantia convoluta resources to provide security protection. Methods The above nine kinds of organochlorine pesticide residues were determined by gas chromatography.Results The total 666 （δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC ） were undetected， the total DDT（op′-DDT、pp′-DDE、pp′-DD、Tpp′-DDD） were undetected，pentachloronitrobenzene was not detected.The “Chinese Pharmacopoeia” contained ginseng， American ginseng herbs and their Pieces under the “pesticide residues” check limit “，9 kinds of organochlorine pesticide residue detection results are qualified.Conclusion Due to the wide variety of pesticides，different nature，in recent years， its detection technology is mainly chromatography，the most widely used gas chromatography，the method of detection of high sensitivity， simple and quick， good separation effect.it can be used as an effective means for the monitoring and quality control of pesticide residues.

Keywords：Marchantia convoluta；Pesticide residues；Determination

中藥材是人們用以防病、治病的特殊商品，因其具有療效獨特、資源豐富、不良反應少等優(yōu)勢[1]，在國內外掀起了綠色消費熱潮。為滿足日益增長的市場需求，中藥材開始像水稻、蔬菜等農作物一樣，進行農業(yè)化人工種植[2]。大面積種植中藥材易造成病蟲害相互傳染，且栽培過程中藥農嚴重依賴具有高效、速效、經濟等特點的化學農藥，而過量施用農藥或施用農藥不當致使中藥材農藥殘留量超標，不僅影響藥材療效，甚至會直接危害人體健康。隨著中藥被檢出重金屬和農殘等安全限量超標的報道頻頻出現，中藥材及其制劑的質量安全受到質疑，嚴重制約了中藥材及其產品走向國際舞臺[3-5]。

為進一步加強中藥材的質量控制，增加中藥的安全性指標，在2015年版《中國藥典》的基礎上，經國家藥典委員會組織有關單位和專家對黃曲霉毒素、重金屬及有害元素、農藥殘留量等有害物質的控制方法、限度值以及重點品種進行了試驗研究[6-8]。《中國藥典》收載的人參、西洋參藥材及其飲片品種項下增加“農藥殘留量”部分檢查項目，限度為“含總六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）不得過0.2 mg /kg；總滴滴涕（op′-DDT、 pp′-DDE、pp′-DDT、pp′-DDD之和）不得過0.2 mg /kg；五氯硝基苯不得過0.1 mg /kg”。

廣西產拳卷地錢來源為地錢科地錢屬植物拳卷地錢（Marchantia convoluta Gao et Chang），為廣西民間常用中草藥之一。其始載于《西藏苔蘚植物志》，廣泛分布在西藏、廣西、貴州等高寒山區(qū)[9]，是苔蘚植物中常見的中草藥之一，常用其外治燙傷骨折、體癬、瘡病不斂，內治黃疸性肝炎，獲得了較好的療效[10-11]。近年來，我國對中藥中農殘的研究報道屢見不鮮，農殘檢測主要采用氣相（GC）、高效液相（HPLC）、氣相-質譜聯用（GC-MS）等檢測方法[12-15]。筆者就拳卷地錢中總六六六（ δ-BHC、γ-BHC、β-BHC、α-BHC 之和）、總滴滴涕（op′-DDT、 pp′-DDE、pp′-DDT、pp′-DDD之和）和五氯硝基苯9種有機氯農殘進行測定，為控制拳卷地錢安全限量提供實驗數據，以期為開發(fā)利用拳卷地錢藥材資源提供安全性保障。

1 儀器與材料

1.1 藥材來源 拳卷地錢采集于廣西南寧市高峰林場，經生藥學專家韋松基教授教授鑒定為地錢科地錢屬植物拳卷地錢（Marchantia convoluta Gao et Chang）。

1.2 農藥標準品 α-六六六標準品、β-六六六標準品、γ-六六六標準品、δ-六六六標準品、P-P-滴滴涕標準品、P-P-滴滴滴標準品、P-P-滴滴伊標準品、O-P-滴滴涕標準品、純度≥99.99%；

1.3 試劑 石油醚、苯、丙酮、乙酸乙酯、無水硫酸鈉、正己烷等試劑均為分析純；40g/L氯化鈉水溶液；弗羅里硅土：層析用，于620℃灼燒4 h后備用，用前140℃烘2 h，趁熱加5%水滅活。

1.4 儀器 氣相色譜儀（ECD檢測器）；旋轉蒸發(fā)儀；電動振蕩器；高速離心機；200 g小型粉碎機；組織搗碎機；10μL微量注射器：髙速分散器；硅鎂吸附劑預處理小柱。

2 方法與結果

2.1 有機氯農藥多種殘留量的測定

2.1.1 試樣制備 取所采集的干燥拳卷地錢經粉碎機粉碎，過20目篩制成試樣。

2.1.2 提取 稱取10g試樣（精確到0.00lg），加入100mL三角瓶，加入20mL石油醚，于振蕩器上振搖0.5h。凈化：①層析柱的制備：玻璃層析柱中先加入1 cm高無水硫酸鈉，再加入5g 5%水脫活弗羅里硅土，最后加入1 cm高無水硫酸鈉，輕輕敲實，用20 mL石油醚淋洗凈化柱。②凈化與濃縮：吸取試樣2mL，用100mL石油醚-乙酸乙酯（95∶5）洗脫，收集洗脫液于蒸餾瓶中，于旋轉蒸發(fā)儀上濃縮近干，石油醚少量多次溶解殘渣，定容至1.0mL，供氣相色譜分析。

2.1.3 測定

2.1.3.1 氣相色譜參考條件 色譜柱：石英彈性毛細管柱，0.25 mm（內徑）×15m；氣體流速：氮氣40mL/min，尾吹氣60mL/min，分流比1∶[KG-*3/5]50；溫度：180℃升至230℃，30 min；檢測器、進樣口溫度250℃。

2.1.3.2 色譜分析 吸取1μL試樣液注入氣相色譜儀，記錄色譜峰的保留時間和峰高。再吸取1μL混合標準使用液進樣，記錄色譜峰的保留時間和峰高。根據組分在色譜上的出峰時間與標準組分比較定性；用外標法與標準組分比較定量。

2.2 五氯硝基苯殘留量的測定

2.2.1 標準品制備 五氯硝基苯標準貯備液和中間液：準確稱取五氯硝基苯0.0100g，用正己烷溶解，100mL容量瓶定容，濃度為100μg/mL；供試液，稀釋100倍，標準中間液濃度：1μg/mL。五氯硝基苯標準使用液：取中間液配制成：0.005、0.010、0.050、0.100、0.150μg/mL系列標準使用液。載體：Chromsorb W AW 80～100目。固定液：OV-17 和 QF-1。

2.2.2 提取 稱取經粉碎過40目篩的試樣5.0g置于50mL離心管中，加20 mL正己烷，高速分散器 （10000 r/min）分散4min，離心（2000 r/min）5min，將提取液移入25mL容最瓶中，向離心管中加5mL正己炫，按上法再提取一遍，將提取液合并，定容至25.0mL。

2.2.3 凈化預處理 柱的凈化：1mL丙酮-正己烷（1+9）分兩次淋洗，再用1mL正己烷淋洗。將提取液5mL過柱，K-D濃縮器集于液體收，丙酮-正己烷（1+9）3mL淋洗，淋洗液并入上述K-D濃縮器，吹氮氣濃縮至1mL，備用。

2.2.4 氣相色譜參考條件 進樣口溫度：23℃；檢測器溫度：230℃；柱箱溫度：190℃；載氣（N2）流速：50 mL/min；色譜柱：內徑3 mm，柱長1.5 m，玻璃柱，內裝涂以1.5%OV-17+2%QF-l固定液，載體為80～100目Chromsorb W AW。

2.2.5 測定 五氯硝基苯標準使用液、試樣各1μL注入氣相色譜儀，測定，計算五氯硝基苯的含量。檢測結果見表1。

3 討論

由于農藥品種繁多，性質各異，近幾年其檢測技術主要是色譜法，其中以氣相色譜應用最為廣泛。該法檢測靈敏度高、簡便快捷、分離效果好，可作為拳卷地錢農殘安全限量監(jiān)測及質量控制的有效手段。筆者采用氣相色譜法對9種有機氯進行測定，結果為總六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC之和）未檢出；總滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT 之和）未檢出；五氯硝基苯未檢出。參考《中國藥典》收載的人參、西洋參藥材及其飲片品種項下“農藥殘留量”“檢查限度”含總六六六（ α-BHC、β-BHC、γ-BHC、 δ-BHC之和）不得過0.2 mg /kg；總滴滴涕（ pp′-DDE、pp′-DDD、op′-DDT、pp′-DDT 之和）不得過0.2 mg /kg；五氯硝基苯不得過0.1 mg /kg，可見9種有機氯農殘檢出結果均合格。

拳卷地錢采于廣西南寧高峰林場，為南寧市近郊，但其為野生藥材，與農作物交集較少，生長在較天然環(huán)境下，故農殘含量結果未檢出說明其生長環(huán)境農藥污染不明顯。

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