鈣強化風味發酵乳的鈣吸收率研究

◎ 李國定，何麗媛，黃 浩

（1.廣州分析測試中心科力技術開發有限公司，廣東 廣州 510070；2.廣東省測試分析研究所（中國廣州分析測試中心），廣東 廣州 510070）

鈣是生命元素，可以促進骨骼的發育，鈣也是重要的機體信使物質，決定著機體反應靈敏程度與抗外界壓力的程度。機體攝入鈣，在胃中形成鈣離子，鈣離子通過血液輸送到各個器官，包括沉積到骨骼中。一旦骨鈣開始流失，就會造成骨質疏松癥。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

①儀器。Agilent55AA原子吸收分光光度計，安捷倫科技（中國）有限公司；BS224S電子天平，感量0.000 1 g，賽多利斯科學儀器（北京）有限公司；HL-1型鈣空心陰極燈，河北寧強光源公司制造。②試劑。超純水，一級水；氧化鑭，分析純，上海晶純生化科技股份有限公司；鹽酸，分析純，廣州化學試劑廠。

1.2 實驗方法

1.2.1 鈣標準儲備液的制備

量取1 000 mg/L鈣標準溶液2.5 mL鈣標準溶液于100 mL容量瓶中，以20 g/L氧化鑭溶液稀釋至刻度，此溶液為25 mg/L的鈣標準儲備液。

1.2.2 鈣標準工作液的制備

移取鈣標準儲備液0、1、2、3、4、5、6 mL，分別置于50 mL容量瓶中，加20 g/L氧化鑭溶液搖勻，得到濃度分別為0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 mg/L的系列鈣標準工作液。

1.2.3 分析條件

分析條件燈電流5 mA，波長422.7 nm，光譜通帶0.5 nm，空氣流量3.5 L/min，乙炔流量1.5 L/min，燈頭高度6 mm，氘燈背景校正。以鈣標準溶液含量和對應吸光度，繪制標準曲線或計算直線回歸方程，試樣吸收值與曲線比較或代入方程求得含量[1]。

1.3 樣品的制備

SD大鼠糞便前處理方法：飼料樣品經均勻混合過20目篩，鼠糞樣品80 ℃烘箱中烘干，置于干燥器中冷卻后磨細；根據鈣的含量，精確稱取烘干磨細的均勻樣品0.2 g于150 mL三角瓶中，上蓋表面皿。

風味發酵乳及其配制液、飼料及碳酸鈣溶液前處理方法：精確稱取1.0 g樣品，置于150 mL三角瓶中，加入10 mL 6 mol/L的鹽酸，開始慢慢一滴一滴加入，邊加入邊旋動，直到不冒泡為止，然后再快速加入，一邊旋動一邊加熱直到內容物近乎干燥，在加熱期間務必避免內容物濺出，用5 mL 6 mol/L鹽酸加熱溶解殘渣后，分多次5 mL超純水將試液轉移至50 mL比色管中，待冷卻后用超純水稀釋定容至50 mL并用濾紙過濾，待測[2]。

2 結果與討論

2.1 線性范圍

按“1.2.3”項下的分析條件進行測定，以鈣標準溶液含量和對應吸光度，繪制標準曲線或計算直線回歸方程，得到鈣元素的線性方程和相關系數，結果Y=0.050 55X+0.010 81，線性關系良好（R2=0.994 9）。

2.2 方法檢出限和準確度

將鈣標準系列溶液連續測定11次，以3倍空白的標準偏差除以標準曲線斜率，計算鈣的檢出限為0.082 4 mg/g，以國家標準物質牛血標準物質考察鈣測定的準確度，平行稱取3份各0.2 g標物60 ℃烘干恒重，經與樣品相同的前處理及測定分析后，總鈣測定結果（52.0±0.2）mg/L，位于證書標準值（51.6±0.9）mg/L范圍內，說明本分析方法準確可靠。

2.3 重復性試驗

準確稱取10份樣品混合均勻，分別稱取6份，按1.2.3項方法操作，進行分析，結果表明RSD為0.41%，重現性良好[3]。

2.4 回收率試驗

準確稱取10份樣品混合均勻，取樣量為樣品的一半，分為4組，每組分別稱取2份，其中1組為原樣，另外3組為加標樣，加標樣分別加入低、中、高3個不同濃度，按1.2.3項方法操作進行分析，分別測定回收率，回收率在90.2%～107.4%。

2.5 動物分組

60只大鼠在實驗室條件下檢疫1周后，按體重隨機分成5組，每組12只（或10只），包括受試物低、中、高3個劑量組[劑量分別為4.15、8.97、20.7 g/（kg·bw）]。將受試物摻入低鈣飼料中給予動物。低鈣合成飼料按《保健食品檢驗與評價技術規范》（2003年版）配方。

2.6 鈣含量測定

分別測定碳酸鈣配制液、風味發酵乳、普通飼料組、低鈣飼料組、中鈣飼料組、高鈣飼料組、SD大鼠糞便等6組不同樣品的鈣含量，測定結果，見表1。

表1 檢測結果數據表

2.7 討論

本實驗建立糞鈣含量的測定方法。采用火焰原子吸收分光光度法測定SD小鼠糞鈣的含量。結果表明所建方法靈敏、精確、快速、線性范圍寬，可用于糞鈣的含量測定。

實驗結果顯示，風味發酵乳可增加大鼠的身長、體重、股骨重量、骨鈣含量。實驗結果還顯示，高劑量組鈣表觀吸收率與碳酸鈣對照組相近，表明受試樣品可作為補鈣劑。依據國家衛生和計劃生育委員會《保健食品檢驗與評價技術規范》判定標準判斷，該風味發酵乳具有增加大鼠骨密度的作用[4]。

本實驗研究的風味發酵乳與直接補充碳酸鈣組的效果一致，具有明顯的增強骨密度作用，為科學補鈣提供了理論基礎和科學依據。