探討不同方法對結核菌檢測的臨床比較

張皎月

【摘 要】目的：探討BD960快速結核菌培養與羅氏結核菌培養在結核菌檢驗中的結果分析。方法：隨機選取2017年我院500例患者的痰液標本先抗酸染色后記錄涂片結果，然后同時接種于羅氏培養基與BD960結核菌培養進行檢測，并對其結果進行分析。結果：500例痰標本涂陽結果123例，涂陰結果377例，其中涂陽的123例中BD960培養全為陽性，陽性率100%，羅氏結核菌培養陽性120例，陽性率97.6%，涂陰的377例中BD960培養陽性45例，陽性率11.9%，羅氏結核菌培養陽性14例，陽性率3.71%，污染率在涂陽的123例中羅氏培養2.44%，BD960培養0.81%，在涂陰的377例中羅氏培養污染率3.45%.，BD960培養1.59%，陽性結果出現時間羅氏結核菌培養最早13天，平均18.5天，BD960培養最早4天，平均9天。結論：BD960快速結核菌培養比傳統的羅氏培養陽性率高，污染率低，培養時間也比羅氏結核菌培養明顯縮短，自動化程度高，所以在結核病的早期診斷中具有重要的臨床價值。

【關鍵詞】羅氏結核菌培養；BD960快速結核菌培養；抗酸桿菌涂片

【中圖分類號】R378.91 【文獻標識碼】A 【文章編號】2095-6851（2018）08--02

結核病是由結核分枝桿菌感染引起的慢性傳染病。結核菌可能侵入人體全身各種器官，但主要侵犯肺臟，稱為肺結核病。結核病是青年人容易發生的一種慢性和緩發的傳染病。潛伏期4～8周。其中80%發生在肺部，其他部位（頸淋巴、腦膜、腹膜、腸、皮膚、骨骼）也可繼發感染。人與人之間呼吸道傳播是本病傳染的主要方式。傳染源是接觸排菌的肺結核患者。近年來，隨著環境污染和艾滋病的傳播，結核病發病率越發強烈。全球感染結核病菌的病例逐年上升，至今大約三分之一的全球人口被感染，因感染結核菌死亡的人數超過其它任何一種傳染病。在發展中國家有25%因結核病死亡的患者是可挽救的，由于診斷治療的延誤以及不規范用藥導致的多重耐藥菌株對結核病患者直接構成致命的威脅，因此對結核分枝桿菌的感染進行快速診斷和鑒定是有效治療和控制其傳播的首要措施。本實驗旨在通過對兩種不同方法檢測結核菌的陽性率與污染率以及培養陽性時間的比較，探討其臨床診斷評價，對結核菌的檢測具有重要的臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 隨機抽取2017年我院結核病患者的500例痰標本，其中，男性275例，女性225例，年齡在18～60歲之間，平均年齡39歲，患者的年齡，性別等資料無顯著差異。

1.2 方法 BD960結核菌培養是將痰液消化，離心，沉淀后將其接種到液體培養管，培養管的成分為改良的培養肉湯，10%CO2，管底包埋對O2濃度敏感的熒光物質。當管內有結核分枝桿菌生長時，管內O2濃度下降，管底熒光顯示劑在特定光源激發下釋放熒光，其強度變化直接反映管內分枝桿菌生長情況，從而快速判斷是否有分枝桿菌生長。

傳統的羅氏結核菌培養前處理與BD960培養相同，不同的是接種的培養基為羅氏斜面培養基。培養基含有細菌生長所必需的碳源、氮源、無機鹽等生長元素，能滿足結核分枝桿菌良好的生長環境，然后置35℃溫箱內培養1～4周，觀察結果。菌落呈顆粒、結節或花菜狀，乳白色或米黃色，不透明。

1.3 觀察指標 記錄檢驗結果，比較兩種方法的陽性檢出率，分析檢驗數據。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0軟件予以統計學分析，臨床資料采取檢驗（計數），P<0.05說明差異具有統計學意義。

2 結果

經比較，BD960結核菌培養的陽性率高于羅氏結核菌培養，污染率低于羅氏結核菌培養，陽性出現時間短，差異有統計學意義。（P<0.05）見表1

3 討論

結核病是全世界首屈一指的傳染病殺手，每天奪走4500多人的生命。其病程長，病死率高。羅氏培養基由于內含孔雀綠可抑制雜菌的生長，所以便于用于結核菌的分離和長期培養。并作為結核病診斷的“金標準”。[1]該方法簡單、經濟，易于推廣使用。但由于結核分枝桿菌細胞壁的脂質含量較高，影響營養物質的吸收，故在一般培養基中每分裂一代需要18-24小時，其分裂周期長，生長繁殖緩慢，陽性檢出率低，不易標準化，給臨床的及時診斷和治療帶來諸多困難。[2]所以迫切需要一種快速、簡便的技術方法，能夠在最短時間內提高結核菌的檢出率，縮短患者診斷和治療所需的時間。BD960快速結核菌培養就是在這樣的背景下研發成功，使快速分離結核分枝桿菌成為現實。由于液體培養基中接觸營養面大，細菌生長較為迅速。一般1～2周即可生長。本實驗結果表明，痰涂片檢查并不能鑒定細菌活力與分枝桿菌菌種，痰涂片陽性結果并不能真正反映患者在化療過程中的病理進展情況，痰涂片陰性結果中仍有標本結核菌培養為陽性，所以僅以痰涂片檢查結果作為痰菌是否轉陰的結果是不全面的。[3]而兩種培養方法中，無論痰涂片是陽性和陰性的患者，BD960快速結核菌培養的陽性率均高于羅氏結核菌培養，差異有統計學意義。（P<0.05）在本組的500例痰標本中，羅氏培養污染16例，BD960培養污染7例，BD960快速培養的污染率明顯低于羅氏培養，差異有統計學意義。（P<0.05）

同時從兩種培養方法出現結果的時間顯示，傳統的羅氏培養時間需要56天左右沒有結核菌生長才能判定為陰性，而BD960快速結核菌培養只需要42天左右。其中，陽性結果的出現時間，BD960快速液體培養比羅氏培養也明顯縮短。

結核病的確診主要依靠病原學檢查?？顾崛旧科栃月实颓也荒軈^分死菌與活菌。結核菌的分裂周期較長，用傳統的羅氏培養法檢測，雖然方法簡單，經濟，易于推廣，但培養周期長，難以滿足臨床對結核病的診斷和治療。而BD960液體結核菌培養法檢測分枝桿菌，具有自動化程度高，陽性率高，污染率低，檢測時間短等優點，在結核病的早期診斷中具有重要的應用價值，值得臨床推廣使用。

參考文獻

吳雪瓊，張宗德，樂軍。分支桿菌分子生物學[M]。北京；人民軍醫出版社，2010；2-3。

于景波，結核菌分離培養方法對照與分析[J]。中國保健，2010，18（3）：131-132。

胡真寶，王蕓蕾，柳正衛。初治涂陽肺結核患者147例治療兩個月末痰培養結果分析[J]。中國基層醫藥，2012，19（11）：1601-1602。