miRNAs調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)細(xì)胞功能研究進(jìn)展

陳笑梅，牟雅琳，呂 鵬，劉 剛

(廈門大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，分子影像暨轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)研究中心，福建 廈門 361102)

動(dòng)脈粥樣硬化是導(dǎo)致心腦血管疾病的主要原因．典型動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程可分為4個(gè)階段：第1階段為啟動(dòng)期，即內(nèi)皮激活與損傷；第2階段為發(fā)生期，即內(nèi)膜下脂質(zhì)的沉積與泡沫細(xì)胞的形成；第3階段為進(jìn)展期，即血管平滑肌細(xì)胞增殖與遷移、斑塊內(nèi)壞死核心增大、血管新生等；最后的階段為終止期，即不穩(wěn)定性的斑塊破裂引發(fā)急性冠狀動(dòng)脈事件[1]．上述病理過(guò)程主要涉及內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的功能改變．

miRNAs是一類由內(nèi)源基因編碼的長(zhǎng)度為21～23個(gè)核苷酸的非編碼單鏈RNA分子，其廣泛存在于各種生物體的基因組中，如病毒、植物和多細(xì)胞動(dòng)物，參與轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)調(diào)控．目前，已經(jīng)有大量的研究表明miRNAs在動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用，本文中將分別就miRNAs對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞和巨噬細(xì)胞功能的影響進(jìn)行綜述．

1 動(dòng)脈粥樣硬化的分子細(xì)胞生物學(xué)基礎(chǔ)

動(dòng)脈壁是由內(nèi)皮細(xì)胞構(gòu)成的內(nèi)膜、血管平滑肌細(xì)胞構(gòu)成的中膜以及包含肥大細(xì)胞等物質(zhì)的外膜所組成的三層結(jié)構(gòu)(圖1(a))．在正常的生理?xiàng)l件下，內(nèi)皮細(xì)胞會(huì)阻擋外界物質(zhì)，如低密度脂蛋白(low density lipoprotein，LDL)以及外周血中的單核巨噬細(xì)胞等進(jìn)入到動(dòng)脈壁；但是在高血壓等病理?xiàng)l件下，內(nèi)皮細(xì)胞被激活，通透性改變，外界物質(zhì)就會(huì)穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入到中膜[2]．

內(nèi)皮細(xì)胞的激活與損傷是動(dòng)脈粥樣硬化的早期事件．在病理?xiàng)l件下，內(nèi)皮細(xì)胞被激活，通透性改變，使得外周血中的單核細(xì)胞、脂質(zhì)等物質(zhì)穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入到中膜，單核細(xì)胞發(fā)展為成熟巨噬細(xì)胞，并吞噬被氧化的低密度脂蛋白(oxidized LDL, ox-LDL)，發(fā)展成為泡沫細(xì)胞[3](圖1(b))．這一階段伴隨著內(nèi)皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)的表達(dá)上調(diào)、NF-κB信號(hào)通路的激活、血管細(xì)胞黏附分子1(vascular cell adhesion molecule-1, VCAM-1)的表達(dá)升高等特征[4]．

由于外周血中的單核細(xì)胞、脂質(zhì)等穿過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)入到中膜，導(dǎo)致中膜環(huán)境發(fā)生改變．中膜的血管平滑肌細(xì)胞開(kāi)始逐漸遷移至內(nèi)膜，其表型也發(fā)生改變，并促進(jìn)膠原蛋白、彈性蛋白等纖維帽成分的形成[5]；同時(shí)泡沫細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞在疾病發(fā)展過(guò)程中會(huì)發(fā)生死亡或部分凋亡，釋放出的胞外脂質(zhì)和自身的細(xì)胞碎片會(huì)逐漸積聚，慢慢形成脂質(zhì)壞死核心(圖1(c))．

血管平滑肌細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)化與移行在動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展過(guò)程中扮演著非常重要的角色．

最后病變進(jìn)一步發(fā)展，斑塊處的巨噬細(xì)胞和血管平滑肌細(xì)胞死亡或凋亡，釋放出的脂質(zhì)和細(xì)胞碎片逐漸堆積形成脂質(zhì)體核心，當(dāng)病變嚴(yán)重時(shí)，薄弱的纖維帽破裂可能導(dǎo)致血栓的發(fā)生(圖1(d))．

(a)正常動(dòng)脈壁層狀結(jié)構(gòu)；(b)病變?cè)缙趦?nèi)皮細(xì)胞的激活；(c)病變發(fā)展期血管平滑肌細(xì)胞的表型轉(zhuǎn)化與移行；(d)病變后期血栓的發(fā)生(參考文獻(xiàn)[6]，經(jīng)修改)．圖1 動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的階段Fig.1 Stages in the development of atherosclerosis

2 miRNAs對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響

2.1 miRNA-126

miRNA-126特異性高表達(dá)于內(nèi)皮細(xì)胞中，研究表明其具有抑制動(dòng)脈粥樣硬化的作用．Harris等[7]的研究表明miRNA-126在內(nèi)皮細(xì)胞上有豐富的表達(dá)，可抑制黏附分子VCAM-1的表達(dá)．趨化因子配體12(CXC-chemokine ligand 12, CXCL12)的受體CXCR4由重組人G 蛋白信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)調(diào)控因子16(recombinant human regulator of G -protein signaling 16, RGS16)負(fù)調(diào)控，而miRNA-126可直接抑制RGS16的表達(dá)，增加CXCL12在內(nèi)皮細(xì)胞的表達(dá)，減少炎性細(xì)胞招募和血液血管平滑肌細(xì)胞祖細(xì)胞含量，形成更穩(wěn)定的斑塊，從而抑制動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展[8]．另有研究表明，miRNA-126的亞型miRNA-126-5p通過(guò)抑制內(nèi)皮細(xì)胞增殖負(fù)調(diào)控因子(delta-like 1 homolog,Dlk1)生成進(jìn)而促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，抑制動(dòng)脈粥樣硬化斑塊形成[9]．

2.2 miRNA-221/222

miRNA-221/222能夠促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的分化，但同時(shí)也抑制了內(nèi)皮細(xì)胞的增殖、遷移并促進(jìn)血管新生的活性，因此miRNA-221/222對(duì)于維持內(nèi)皮細(xì)胞的完整性與靜止?fàn)顟B(tài)有著重要的作用．Li等[10]發(fā)現(xiàn)在用高糖處理人臍靜脈而造成內(nèi)皮功能障礙時(shí)，可誘導(dǎo)miRNA-221的表達(dá)，進(jìn)而使干細(xì)胞因子c-Kit表達(dá)水平下降；而抗miRNA-221寡核苷酸(AMO221)對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞處理后，miRNA-221的表達(dá)水平下降，c-Kit的表達(dá)水平則上升．Surez等[11]發(fā)現(xiàn)在核糖核酸酶Ⅲ核酸內(nèi)切酶Dicer基因沉默后，eNOS的蛋白水平下調(diào)，而在內(nèi)皮細(xì)胞中轉(zhuǎn)染miRNA-221/222則可使eNOS的蛋白水平重新恢復(fù)．這些研究表明，miRNA-221/222通過(guò)調(diào)控c-Kit、eNOS來(lái)抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程．近年有研究表明，在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)的mi-RNA-221/222 可抑制血管緊張素Ⅱ誘導(dǎo)的E26轉(zhuǎn)錄因子1及其下游因子的表達(dá)，包括VCAM-1、單核細(xì)胞化學(xué)趨化蛋白1(monocyte chemotactic protein 1, MCP-1)和重組人血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體-1，從而阻止炎癥反應(yīng)的發(fā)生[12]．

2.3 miRNA-21

內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitor cells, EPCs)是能夠增殖分化為成熟內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞，具有促進(jìn)新生血管生成、修復(fù)損傷血管以及改善內(nèi)皮細(xì)胞功能的作用，從而抑制動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程．Zuo等[13]發(fā)現(xiàn)動(dòng)脈粥樣硬化病變和暴露于低氧環(huán)境的EPCs中，miRNA-21的表達(dá)量上調(diào)，且EPCs的增殖能力增強(qiáng)，miRNA-21通過(guò)靶向結(jié)合E3泛素連接酶1(WW domain containing E3 ubiquitin protein ligase 1, WWP1)的3′-非轉(zhuǎn)錄區(qū)抑制WWP1 的表達(dá)，進(jìn)而激活轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β(TGF-β)信號(hào)通路，抑制EPCs的增殖，發(fā)揮誘導(dǎo)動(dòng)脈粥樣硬化的作用．此外，Zhou等[14]通過(guò)振動(dòng)剪切應(yīng)力誘導(dǎo) miRNA-21在人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中表達(dá)，發(fā)現(xiàn)miRNA-21能增加VCAM-1、MCP-1等黏附分子的表達(dá)水平，促進(jìn)單核細(xì)胞在內(nèi)皮細(xì)胞上的黏附．

2.4 miRNA-155

miRNA-155與內(nèi)皮細(xì)胞功能的關(guān)系密切，但其在動(dòng)脈粥樣硬化中的作用尚存在爭(zhēng)議．Wu等[15]的研究顯示在腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激的內(nèi)皮細(xì)胞中，miRNA-155可調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞的炎癥反應(yīng)，降低NF-κB-p56和黏附分子的表達(dá)，抑制巨噬細(xì)胞黏附到內(nèi)皮細(xì)胞上，發(fā)揮抗炎作用．另有研究表明miRNA-155通過(guò)靶向結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子BACH1(1型血色素氧化酵素HO-1的抑制劑)的mRNA，促進(jìn)HO-1的表達(dá)，保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞而發(fā)揮抗炎作用[16]．然而miRNA-155也是炎癥介質(zhì)誘導(dǎo)免疫反應(yīng)的中樞調(diào)節(jié)器，因此被認(rèn)為是一種促進(jìn)炎癥的小分子RNA．

Sun等[17]的研究指出，miRNA-155對(duì)內(nèi)皮功能具有不利作用，可直接抑制內(nèi)皮細(xì)胞中eNOS的表達(dá)進(jìn)而減少NO的生成，使內(nèi)皮舒張功能受損．由于miRNAs的多靶點(diǎn)作用機(jī)制及動(dòng)脈粥樣硬化各階段病理性改變的復(fù)雜性，miRNAs可表現(xiàn)出多種甚至相反的生物學(xué)作用．因此，miRNA-155是否通過(guò)影響內(nèi)皮功能對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化產(chǎn)生影響需要進(jìn)一步的實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證．

2.5 miRNA-92a

Liu等[18]的研究顯示，miRNA-92a可能通過(guò)調(diào)控內(nèi)皮細(xì)胞中Krüppel樣因子2(Krüppel-like factor 2, KLF2)和KLF4的表達(dá)水平來(lái)發(fā)揮作用，KLF2和KLF4可作為miRNA-92a的靶點(diǎn)，通過(guò)上調(diào)miRNA-92a的表達(dá)抑制KLF2和KLF4的表達(dá)，從而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展．Loyer等[19]的研究表明miRNA-92a在ox-LDL存在時(shí)，更容易在低血流剪切力的內(nèi)皮細(xì)胞中高表達(dá)，進(jìn)而加劇ox-LDL對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的損傷．另一研究顯示，在高濃度尿酸的情況下，miRNA-92a的表達(dá)下調(diào)可促進(jìn)KLF2的表達(dá)，進(jìn)而抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子A的表達(dá)，最終抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程[20]．

除了以上5種miRNAs外，miRNA-10a、miRNA-712、miRNA-98、miRNA-103、miRNA-34a、miRNA-204和miRNA-146等也對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞具有一定的調(diào)控作用，從而影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程(表1)．

表1 miRNAs對(duì)內(nèi)皮細(xì)胞的調(diào)控

注：MKK4.絲裂原活化蛋白激酶4；SOCS5.細(xì)胞因子信號(hào)抑制蛋白5；MAP3K7/10.絲裂原活化蛋白激酶3K7/3K10；PIK3R.磷酸酯酶；E-selectin.E選擇素；βTRC.β轉(zhuǎn)導(dǎo)重復(fù)相容蛋白；TIMP3.基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑3；MMP.基質(zhì)金屬蛋白酶；LOX-1.植物血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1；SIRT1.去乙酰化酶1．↑表示促進(jìn)，↓表示抑制，下同．

3 miRNAs對(duì)血管平滑肌細(xì)胞功能的影響

3.1 miRNA-143/145

miRNA-143/145是豐富表達(dá)于血管平滑肌細(xì)胞的兩個(gè)高度保守的miRNAs編碼的雙順?lè)醋踊虼兀ㄟ^(guò)一些轉(zhuǎn)錄因子如血清反應(yīng)因子、共激活因子、心肌素和心肌素相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子等，對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的分化起著至關(guān)重要的作用[31]．有文獻(xiàn)報(bào)道m(xù)iRNA-143/145是調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換的關(guān)鍵因子，其過(guò)表達(dá)可以上調(diào)與血管平滑肌細(xì)胞表型轉(zhuǎn)換相關(guān)因子的表達(dá)，如血管平滑肌α肌動(dòng)蛋白(smooth muscle α-actin，SMα-actin)和肌球蛋白重鏈，從而促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞向收縮型轉(zhuǎn)變[32]．Cheng等[33]發(fā)現(xiàn)miRNA-145是正常大鼠頸動(dòng)脈中表達(dá)最豐富的mi-RNA，在血管平滑肌細(xì)胞中選擇性表達(dá)，并且在用血小板衍生生長(zhǎng)因子(PDGF)所誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞去分化模型以及球囊擴(kuò)張損傷的大鼠頸動(dòng)脈模型中，miRNA-145是血管平滑肌細(xì)胞的一種表型標(biāo)志物與表型調(diào)節(jié)物．Cordes等[34]發(fā)現(xiàn)miRNA-143/145靶向轉(zhuǎn)錄因子網(wǎng)絡(luò)包括KLF4、鈣調(diào)蛋白激酶和轉(zhuǎn)錄因子家族成員ETS-1(E-twenty-six-1)，可促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞分化并抑制其增殖．另有研究顯示，miRNA-143/145敲除的大鼠動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞上SMα-actin和肌球蛋白重鏈的表達(dá)明顯下調(diào)，導(dǎo)致偽足小體形成，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖和移行[35]．miRNA-143主要調(diào)控血小板源性生長(zhǎng)因子受體α和蛋白激酶C-ε 的表達(dá)，而miRNA-145則通過(guò)調(diào)控集束蛋白表達(dá)影響偽足小體的形成[36]．上述研究表明miRNA-143/145對(duì)血管平滑肌的表型及分化有調(diào)控作用，可以抑制動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程．

3.2 miRNA-221/222

Liu等[37]發(fā)現(xiàn)在小鼠受傷的血管平滑肌細(xì)胞中miRNA-221/222的表達(dá)量上調(diào)，并出現(xiàn)血管平滑肌細(xì)胞的增殖，而在敲除miRNA-221/222的小鼠模型中，其血管平滑肌細(xì)胞的增殖被抑制，這種現(xiàn)象的出現(xiàn)是由于miRNA-221/222靶向結(jié)合細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制蛋白p27和p57，進(jìn)而調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞的增殖與移行．另外，Davis等[38]用分子模擬技術(shù)過(guò)表達(dá)miRNA-221/222，可減少血管平滑肌細(xì)胞收縮型標(biāo)記物表達(dá)，促進(jìn)血管平滑肌細(xì)胞增殖和移行，而拮抗miRNA-221/222則產(chǎn)生相反作用．上述研究表明，miRNA-221/222在血管平滑肌細(xì)胞的增殖和移行過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用．

3.3 miRNA-663

Li等[39]發(fā)現(xiàn)miRNA-663在PDGF-BB刺激的血管平滑肌細(xì)胞中表達(dá)下調(diào)，但在分化的血管平滑肌細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)．另外，過(guò)表達(dá)miRNA-663可以上調(diào)與血管平滑肌細(xì)胞分化相關(guān)因子的表達(dá)，如SMα-actin、肌動(dòng)蛋白相關(guān)蛋白SM22α、鈣調(diào)節(jié)蛋白和肌球蛋白重鏈，并抑制PDGF-BB誘導(dǎo)的血管平滑肌細(xì)胞增殖和移行[39]．過(guò)表達(dá)miRNA-663可顯著抑制下游因子的表達(dá)，如轉(zhuǎn)錄因子Jun B、肌球蛋白輕鏈9 (myosin light chain 9, MYL9)和基質(zhì)金屬蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9, MMP-9)[39]．這些結(jié)果表明，miRNA-663 是通過(guò)靶向Jun B /MYL9來(lái)調(diào)控血管平滑肌細(xì)胞表型的轉(zhuǎn)化．

除上述3種miRNAs外，miRNA-92a、miRNA-135b-5p、miRNA-499a-3p、miRNA-let-7g、miRNA-99a和miRNA-504 等也與血管平滑肌細(xì)胞調(diào)控有關(guān)，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化的進(jìn)程(表2)．

4 miRNAs對(duì)巨噬細(xì)胞功能的影響

4.1 miRNA-155

Li等[44]發(fā)現(xiàn)鈣調(diào)控?zé)岱€(wěn)定蛋白(calcium-regulated heat stable protein 1, CARHSP1)是miRNA-155的一個(gè)靶點(diǎn)，提高miRNA-155的表達(dá)可通過(guò)調(diào)控巨噬細(xì)胞中CARHSP1-TNF-α通路來(lái)延緩泡沫細(xì)胞的形成．Tian等[45]通過(guò)qRT-PCR技術(shù)發(fā)現(xiàn)miRNA-155在載脂蛋白E基因敲除(APOE-/-)小鼠的巨噬細(xì)胞中高表達(dá)，認(rèn)為細(xì)胞調(diào)控因子HMG盒轉(zhuǎn)錄因子1(HMG-box transcription factor 1，HBP1)是mi-RNA-155 的新作用靶點(diǎn)，通過(guò)遞送miRNA-155拮抗劑抑制miRNA-155的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)吞噬能力明顯減弱，且APOE-/-小鼠的斑塊明顯消退．Wei等[46]發(fā)現(xiàn)miRNA-155可以直接抑制轉(zhuǎn)錄因子B淋巴細(xì)胞瘤蛋白6(B-cell lymphoma 6 protein，Bcl-6)的表達(dá)，進(jìn)而抑制促炎因子NF-κB信號(hào)通路．Lu等[47]發(fā)現(xiàn)miRNA-155還可靶向結(jié)合酪氨酸激酶受體c-Fms，從而抑制單核細(xì)胞分化成巨噬細(xì)胞，減少巨噬細(xì)胞對(duì)纖維帽的降解，進(jìn)而穩(wěn)定動(dòng)脈粥樣斑塊．

4.2 miRNA-125a-5p

巨噬細(xì)胞通常分為M1和M2兩種類型，其中M1型巨噬細(xì)胞可促進(jìn)炎癥反應(yīng)(即經(jīng)典活化)，而M2型巨噬細(xì)胞則可抑制炎癥反應(yīng)(即選擇性活化)[48]．巨噬細(xì)胞的極化在動(dòng)脈粥樣硬化過(guò)程中發(fā)揮著重要的作用[49]．Banerjee等[50]發(fā)現(xiàn)miRNA-125a-5p在M2型巨噬細(xì)胞中的表達(dá)量高于M1型巨噬細(xì)胞，能夠抑制巨噬細(xì)胞的經(jīng)典活化，促進(jìn)選擇性活化．Chen等[51]利用轉(zhuǎn)染技術(shù)導(dǎo)入miRNA-125a-5p抑制劑，發(fā)現(xiàn)巨噬細(xì)胞對(duì)脂類的攝取能力顯著提高，并上調(diào)相關(guān)清道夫受體的表達(dá)和促進(jìn)炎癥細(xì)胞因子的分泌，認(rèn)為mi-RNA-125a-5p 可能部分參與調(diào)控ox-LDL刺激的單核細(xì)胞中的炎癥反應(yīng)、脂質(zhì)攝取和靶蛋白氧化固醇結(jié)合蛋白相關(guān)蛋白-9(ORP9)基因的表達(dá)，而該過(guò)程有可能起到了抑制動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)展的作用；通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)，在人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞株THP-1中抑制miRNA-125a-5p表達(dá)后，各種炎癥因子如IL-2、IL-6、TNF-α及TGF-β表達(dá)水平增加，同時(shí)巨噬細(xì)胞的清道夫受體表達(dá)也上調(diào)，脂質(zhì)攝入增加．以上研究表明miRNA-125a-5p發(fā)揮著抑制動(dòng)脈粥樣硬化的作用．

表2 miRNAs對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的調(diào)控

注：JNK.c-Jun氨基末端激酶；MEF2C.肌細(xì)胞增強(qiáng)因子-2C；AGT.血管緊張素原；AT2R.血管緊張素Ⅱ受體；ACE-1/2.血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑1/2；E1k-1.核轉(zhuǎn)錄因子E-26樣蛋白；mTOR.哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白；IGF-1R.胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體；Grb10.生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白10；Erg2.Eag相關(guān)蛋白2．

4.3 miRNA-147

Toll樣受體(Toll-like receptor, TLR)是天然免疫系統(tǒng)中特異的Ⅰ型跨膜受體及病原模式識(shí)別受體，在急性炎癥反應(yīng)、細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和細(xì)胞凋亡中起重要作用[52]．Liu等[53]在脂多糖喂養(yǎng)的小鼠巨噬細(xì)胞中，觀察到多種TLR均可刺激產(chǎn)生miRNA-147，而mi-RNA-147 可負(fù)調(diào)控TLR相關(guān)的信號(hào)，證明TLR刺激可誘導(dǎo)miRNA-147的表達(dá)，從而阻止過(guò)度的炎癥反應(yīng)這一負(fù)反饋環(huán)路．

4.4 miRNA-33

增加三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ATP-binding cassette transporter A1, ABCA1)的表達(dá)對(duì)高密度脂蛋白(high density lipoprotein, HDL)的產(chǎn)生及逆向膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)至關(guān)重要[54]．研究發(fā)現(xiàn)，用miRNA-33抑制劑對(duì)小鼠進(jìn)行處理，ABCA1表達(dá)增加，HDL水平上升，細(xì)胞膽固醇外排功能增強(qiáng)[55]．在非洲綠猴體內(nèi)注射miRNA-33抑制劑，12周后也發(fā)現(xiàn)血漿中HDL持續(xù)上升，動(dòng)脈粥樣硬化進(jìn)程減緩[56]．過(guò)表達(dá)mi-RNA-33 可引起ABCA1 mRNA、蛋白質(zhì)及血漿HDL水平下降[57]，而抑制內(nèi)源性miRNA-33表達(dá)會(huì)增加ABC-A1 蛋白的表達(dá)[58]．Ouimet等[55]認(rèn)為miRNA-33可靶向巨噬細(xì)胞中關(guān)鍵的調(diào)控子和效應(yīng)因子，減少脂滴的分解代謝．

此外，其他相關(guān)研究揭示miRNA-342-5p、miRNA-21、miRNA-223、miRNA-9和miRNA-181a等均對(duì)巨噬細(xì)胞功能具有調(diào)控作用，進(jìn)而影響動(dòng)脈粥樣硬化病變發(fā)展(表3)．

5 展 望

近年來(lái)，對(duì)miRNAs與動(dòng)脈粥樣硬化之間關(guān)系的研究逐漸增多，成為一個(gè)新興且熱門的領(lǐng)域．以mi-RNAs 為基礎(chǔ)來(lái)治療干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化前景廣闊，但仍有很多問(wèn)題急需解決，如：同一miRNA同時(shí)具有多個(gè)作用靶點(diǎn)，可同時(shí)作用于多種細(xì)胞，以及代謝穩(wěn)定性等．通過(guò)深入揭示miRNAs與靶基因之間的調(diào)控機(jī)制，進(jìn)一步發(fā)展miRNAs相關(guān)遞送技術(shù)如納米基因載體系統(tǒng)，可有助于達(dá)到預(yù)防和干預(yù)動(dòng)脈粥樣硬化的目的．

表3 miRNAs對(duì)巨噬細(xì)胞的調(diào)控

注：ABCG1.三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白G1；NPC1.膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1；AKT1.擬南芥鉀離子運(yùn)輸?shù)鞍?；STAT3.信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子蛋白3；JAK1.酪胺酸蛋白激酶1；ACTA1.骨骼肌蛋白α1．