淺析微生物標本培養前涂片革蘭染色鏡檢的臨床研究意義

胡品

貴航貴陽醫院，貴州貴陽 550000

微生物培養、檢驗對患者臨床治療有著指導作用，近年來，隨著細菌耐藥性不斷升高，微生物檢測在臨床中的應用率越來越高。微生物檢測能夠對患者疾病診斷、治療進行指導，微生物檢驗結果直接影響患者用藥合理性和治療效果，而微生物標本培養前開展革蘭染色鏡檢直接影響檢驗結果，同時能夠降低資源浪費[1]。該次研究在2017年4月—2018年4月間以136份微生物標本為樣本，調查微生物標本培養前涂片革蘭染色鏡檢的意義，旨在為臨床提供參考依據，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以該院送檢的136份微生物標本為樣本，包括門診樣本和住院部樣本。其中痰液標本32份、尿液標本53份、分泌物標本41份，其他標本10份。金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌來自我省檢驗中心。

1.2 方法

涂片染色鏡檢：于載玻片中心滴一滴生理鹽水，用無菌棉簽蘸取少許標本混入生理鹽水中，而后采用無菌針將標本與生理鹽水混勻，放在通風處自然風干。標本風干后放在酒精燈上加熱干燥，而后進行革蘭染色、鏡檢。

培養與鑒定：將標本接種在不同的平板上，包括血平板、巧克力板等，將接種后的平板放在5.0%二氧化碳、33～37℃環境中培養24～48 h。而后觀察培養菌、優先致病菌，并提取上述菌落進行涂片、染色、鏡檢。

1.3 判定標準

合格標準：痰液標本為膿性、粘稠性或血性樣，低倍鏡視野中白細胞數量不低于25個，鱗狀上皮細胞數量不高于10個視為合格標本。部分標本白細胞數量會低于25。如若發現形態明顯的致病菌或致病菌的染色形態要立刻進行培養并回報結果[2]。

尿液標本在油視鏡觀察下平均每個視野有一個以上細菌則證明感染可能性非常高，需要進行進一步篩查。若油視鏡下視野達到平均每個視野有一個以上的細菌標準則視為合格標本。

涂片、培養結果符合性：涂片中疑似致病菌形態、性質與培養結果基本相同視為符合。

1.4 統計方法

文中數據采用SPSS 18.0統計學軟件處理，采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 標本合格率以及菌種

136份標本中合格標本125份，不合格的標本9份。有4份為痰液標本，有3份為尿液標本，有2份為其他標本。痰液標本中肺炎克雷伯菌檢測數量最多，13個；尿液標本中屎腸球菌檢測數量最多，6個；分泌物標本中大腸埃希菌檢測數量最多，8個；其他標本中大腸埃希菌檢測數量最多，4個。見表1。

表1 菌落培養狀況

2.2 合格涂片與培養結果符合率

痰液標本鏡檢結果與培養結果的符合率為66.7%、尿液標本符合率為77.8%、分泌物標本符合率為 85.0%、其他標本符合率為 100.0%（χ2=1.25、1.17、1.09、1.00，P＜0.05），詳見表 2。

表2 涂片與培養結果符合率

3 討論

涂片鏡檢是將微生物標本制成涂片進行革蘭染色而后在顯微鏡下觀察微生物形態確定是否存在致病菌以及致病菌種類[3-4]。涂片鏡檢能夠對細菌種類進行鑒別，了解細菌耐藥類型以及耐藥程度，對患者疾病進行診斷，對需要補充的檢查進行提示，判斷標本合格率，更有利于細菌的鑒定[5-6]。

結果可見，136份標本中合格標本125份，不合格的標本9份。有4份為痰液標本，有3份為尿液標本，有2份為其他標本。不合格的涂片均符合上述標準，因此，在開展培養前需要對涂片進行鏡檢，針對不合格的標本進行篩除。篩除不合格的標本不僅能夠提升檢驗準確率，有利于患者疾病診斷，同時能夠指導臨床合理用藥，同時也能夠降低患者經濟損失，也能夠減少醫療資源浪費[7-9]。

在表2中可見，痰液標本鏡檢結果與培養結果的符合率為66.7%、尿液標本符合率為77.8%、分泌物標本符合率為85.0%、其他標本符合率為100.0%，兩者差異有統計學意義。針對不符合的標本進行分析后我們認為，導致結果誤差的因素與以下原因有關。①涂片過薄或標本取材部位不當；②細菌在鏡下呈現的狀態不同，容易混淆；③接種過程中標本被污染或標本保存不當受到污染。

在張國英等[10]的研究中可見，365份送檢標本中不合格標本17份，348份合格標本中培養陽性93份，痰液標本、尿液標本、分泌物標本和其他標本的涂片與培養結果符合率分別為76.6%、62.5%、87.1%、80.0%。與該院的結果基本相同，證明了該院獲得的研究數據和結果可靠。也證明了在標本培養前開展涂片鏡檢會直接影響微生物檢驗結果，為臨床提供感染信息，對疾病用藥、預防進行指導。

綜上所述，在微生物標本培養前開展革蘭染色鏡檢能夠有效保證結果的準確性，具有非常重要的應用價值。