豬場豬瘟免疫情況調查及首免日齡優化試驗

卓婷

摘 要：目的：調查豬場豬瘟的免疫情況以及通過優化試驗確定最佳首免日齡。方法本次論文選擇對規模化豬場的豬瘟免疫的整體情況進行調查，在調查基礎上，進行仔豬豬瘟首免日齡試驗，得到仔豬最佳的首免日齡。結果：2017年整體的豬瘟抗體水平均不夠理想，整體平均抗體水平陽性率只有66.45%，低于70%的陽性保護率水平。2018年，整體的豬瘟抗體水平有了大幅度的提高，平均陽性率達到了83.17%0最佳首免日齡試驗，14日齡免疫組和21日齡免疫組的抗體水平在免疫一周后均出現較大幅度的下降。兩周后，14日齡免疫組抗體水平仍在下降，21日齡免疫組上升緩慢。28日齡免疫組，在免疫后兩周整體的抗體水平均有明顯的上升，而35日齡免疫組兩周內抗體上升較緩慢。結論：對不同階段的豬群的抗體水平調查發現，哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬的抗體水平較為理想，保育豬抗體水平陽性率為全場不同階段豬群最低。為達到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應是仔豬28日齡。

關鍵詞：豬瘟；首免日齡；免疫情況；預防

中圖分類號：S858.28 文獻標識碼：A 文章編號：1004-7344（2018）21-0247-02

豬瘟又叫爛腸瘟，是由豬瘟病毒引起的一種急性、熱性、接觸性傳染病。該病是對豬危害較大的一種傳染病。資料報導21世紀前五年豬瘟發病率20～25%，每年豬瘟死亡占飼養量的3～5%，占病死豬30%[1]。

1 豬瘟發病的特點

1.1 流行特點

不分品種、性別、年齡，一年四季發生。目前主要發生于免疫豬群，早的十幾日齡，晚的成年豬。也可發生于初產和經產的母豬。據報導帶毒母豬產出的仔豬有長期病毒血癥，可持續排毒，病程緩慢，先后于2～11日齡引起死亡[2]。

1.2 癥狀特點

一般體溫升高、稽留熱，皮膚粘膜，尤其耳根、胸腹皮膚發紺呈敗血經過（見圖）。病程長的拱背，寒戰，厭食，初便秘后腹瀉、便秘交替發生，當糞便惡臭時附粘液，多在1周死亡，不死的轉慢性，體溫時高時低，食欲時好時壞，病程20d以上，多數轉歸死亡[3]。

2 豬瘟診斷

2.1 臨床診斷

根據上述流行特點和臨床癥狀，剖檢變化及治療情況進行綜合診斷。

2.2 實驗室診斷

（1）豬體免疫試驗：用病料接種易感豬觀察發病的情況，方法是取4只小豬，2只注免化弱毒苗，兩只對照，注苗12～14d后接病料免疫豬不發病，未免疫豬發病則判豬瘟陽性[4]。

（2）兔體交叉免疫試驗：根據豬瘟強毒不引起家兔的體溫反應，但能使家兔產生免疫力，當用兔化弱毒攻擊時不引起體溫升高的表現，先用病料接種兔，再用兔化弱毒攻擊。如病料含強毒可引起體溫反應。

2.3 免疫程序

（1）常規免疫程序：配種前注射過豬瘟苗的母豬。含有母源抗體仔豬。首免日齡20～25日齡，二免為50～60日齡。體弱，食欲不正常，發病豬注苗效果不好[5～6]。

（2）超前免疫：初生仔豬在吃乳前1～1.5h首免，斷奶后或60日齡2免。當豬場長期受豬瘟病毒嚴重污染時，仔豬免疫受到母源抗體影響，20日齡接種，使一部分豬成為易感豬，因個體差異母抗水平一致，如提前免疫受母抗干擾更多，推遲免疫得到抗體的保護降低。所以超前免疫是凈化豬場的好辦法，但母豬多在夜間分娩，同時產仔房溫度高，給免疫接種帶來一定困難[7～9]。

一般豬胎70日齡免疫系統對抗原刺激產生免疫應答，而仔豬獲得的母源抗體3h產生，6～12h達高峰[10]。

3 豬場豬瘟免疫情況調查

3.1 材料與方法

3.1.1 血清的來源

2017～2018年間，隨機采集11個規模化豬場，共6910份不同階段豬群的血清樣品，其中2017年3293份；2018年3617份。不同豬群采集記錄如表1所示。對仔豬從前腔靜脈進行采血，別的豬群要從耳緣靜脈進行采血。對血樣采集完成后，采取常規處理，將血清分離，并置于零下20℃保存，待測。

3.1.2 診斷試劑

采用美國IDEXX公司的豬瘟抗體阻斷ELISA試劑盒。

3.1.3 儀器設備

96孔酶標儀（美國寶特BIO-TEK公司，型號ELX800）、臺式離心機（上海安亭科學儀器廠，型號LXJ-IIC）、海爾冰箱（BCD-215KS）。

3.2 豬瘟抗體檢測方法

3.2.1 樣品和檢測試劑

被檢血清樣品；CSFV抗原包被板：CSFV陰、陽性對照血清；樣品稀釋液；（10x）洗滌液；HRPO標記的CSFV酶標抗體；TMB底物和終止液等。

3.2.2 檢測方法的原理

該檢測方法主要是采用阻ELISA原理，通過被CSFV包被的微量包被板，來檢測被測血清樣品中的CSFV抗體。室溫下，加入的被測樣品經過孵育，如果被測樣品中含有特異性的CSFV抗體，那么就會與CSFV抗原產生結合，繼而會阻斷HRPO標記的抗CSFV酶標抗體和抗原的結合。通過HRPO與TMB底物進行反應，反應后的顯色的深淺程度，可以判斷出酶標抗體和包被抗原的結合程度。

3.2.3 結果判斷

結論成立的條件：陽性對照：阻斷率>50%；陰性對照：平均OD值>0.500。

判斷條件如下：

陽性判定：阻斷率≧40%，被測樣品中有CSFV抗體存在；

陰性判定：阻斷率≦30%，被測樣品中無CSFV抗體存在；

可疑判定：30%≦阻斷率≦40%，該檢測結果的樣品來源動物要在數天之后進行抗體再次檢測。

3.3 豬群的整體豬瘟抗體水平情況（見表2）

4 合適首免日齡試驗

4.1 試驗設計

在調查基礎上，對規模化豬場進行仔豬豬瘟首免日齡試驗，進而全面的了解哺乳仔豬母源抗體消長的規律，為確定最佳的首免日齡，制定科學合理的免疫程序提供依據。出生仔豬分別于0，1，7，14，21，28，35，42日齡從前腔靜脈采血2～3mL，進行血清分離，檢測抗體，每天對試驗仔豬的精神狀態，飲水、飲食，糞便、尿液進行觀察，看是否出現明顯的異常表現。

4.2 抗體檢測結果

5 討 論

通過對規模化豬場2017年和2018年共6910份的血清樣品進行了抗體檢測，結果表明，2017年的豬瘟抗體的水平都不理想，測試結果的整體平均陽性率要低于70%。2018年整體的豬瘟抗體的水平均有著顯著的提高，對不同階段的豬群，進行抗體水平調查，調查結果發現哺乳仔豬、種公豬、后備豬、育肥豬抗體水平都比較理想，其中保育豬的平均抗體水平是豬群最低。

首免日齡為28日齡的免疫組，免疫后兩周內抗體水平明顯上升，疫苗免疫效果比其他首免日齡免疫組要理想。結合哺乳仔豬在14日齡母源抗體水平開始下降，到35日齡時半數仔豬達不到臨界保護值的母源抗體水平消長規律，認為以28日齡為首免日齡的免疫方案較適合C畜牧公司。為達到較為理想的免疫效果，最佳的首免日齡應是仔豬28日齡。

參考文獻

[1]黃紅梅，陳鳳蓮，華 俊，等.廣西豬瘟病毒流行現狀及與HCLU免疫原性比較分析[A].中國畜牧獸醫學會動物傳染病學分會第三屆豬病防控學術研討會論文集，2015：105～109.

[2]羅 勇.陳刨夫，楊建疆，等.豬瘟疫苗超一前免疫效果觀察[J].畜牧獸醫雜志，2013，25（3）：6～7.

[3]黃 夏，覃芳蕓，等.廣西種豬場豬瘟免疫抗體調查與分析[J].中國獸醫雜志，2016，42（1）：26～27.

[4]江明甫，楊 紅，等.豬瘟免疫程序篩選優化研究[J].疫病防治，2015，1：29～30.

[5]丁明孝，陸 寧，陳建日.豬瘟病毒及其疫苗研究[C].謝慶閣，翟中和，主編.畜禽重大疫病免疫研究進展.北京：中國農業科技出版社，2016.

[6]吳建敏，蔣冬福，等.廣西豬瘟流行現狀的調查分析[J].中國獸醫科技，2012，32（2）：16～18.

[7]王火平.仔豬豬瘟超前免疫的研究.[J].福建畜牧獸醫，2015，27（4）：8～9.

[8]張 宇，張憲強.對仔豬豬瘟疫苗乳-前免疫技術的研究.民營科技，2017，7：17～19.

[9]陸文俊，黃 夏，等.廣西部分種豬場豬瘟抗體監測和免疫效果分析[J].畜牧與獸醫，2012.34（7）：26～27.

[10]劉 莉，金璐娟，楊 旭，等，規模化豬場仔豬豬瘟母源抗體消退規律[J].黑龍江畜牧獸醫，2014（10）：46～47.

收稿日期：2018-6-12

作者簡介：卓 婷（1979-），女，助理獸醫師，主要從事動物檢疫和動物防疫工作。