不同劑量平胃消導(dǎo)膠囊對(duì)功能性消化不良大鼠胃腸動(dòng)力的影響

胡柳丹 楊 斌 時(shí)昭紅

(武漢市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院消化內(nèi)科，湖北 武漢 430022)

消化不良分為功能性消化不良(FD)及器質(zhì)性消化不良，其中FD是指胃及十二指腸因功能紊亂而引發(fā)的胃部疾病，屬于非器質(zhì)性疾病的一組臨床綜合征〔1〕。調(diào)查顯示，F(xiàn)D的發(fā)病率非常高，在普通人群中20%～40%伴有不同程度的FD，并且部分地區(qū)的FD患者在消化內(nèi)科門診就診患者中的比例甚至高達(dá)50%〔2〕。由于FD會(huì)破壞患者的胃腸平衡狀態(tài)，導(dǎo)致胃動(dòng)力不足，進(jìn)而引發(fā)腹瀉或便秘，同時(shí)還可造成腹痛和腹脹，長(zhǎng)期病情反復(fù)的FD患者甚至有發(fā)展成胃癌的危險(xiǎn)。有報(bào)道提出，F(xiàn)D歸屬于中醫(yī)的“脘痞”及“胃痛”范疇，其病在胃，同時(shí)還可涉及肝、脾等其他臟器，通過健脾胃及消食導(dǎo)滯等方式進(jìn)行治療可獲得較好的療效〔3〕。平胃消導(dǎo)膠囊有助于提高患者胃腸動(dòng)力，但有關(guān)其用藥劑量及相關(guān)療效等方面的報(bào)道較少。本研究分析不同劑量的平胃消導(dǎo)膠囊對(duì)FD模型大鼠胃腸動(dòng)力的影響，為臨床治療FD提供相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。

1 材料和方法

1.1材料

1.1.1實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與分組 選擇SPF級(jí)大鼠120只，均為8周齡的雄性Wistar大鼠，由武漢大學(xué)心血管病研究所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供(合格證號(hào)：SYXK(鄂)2015-0053)。體重200～220 g，平均(209.87±3.24)g。依據(jù)隨機(jī)數(shù)字表法分成對(duì)照組、模型組、多潘立酮組、平胃消導(dǎo)膠囊大劑量組(大劑量組)、平胃消導(dǎo)膠囊中劑量組(中劑量組)及平胃消導(dǎo)膠囊小劑量組(小劑量組)，每組20只。本次實(shí)驗(yàn)已經(jīng)獲得了醫(yī)院動(dòng)物倫理委員會(huì)的審核批準(zhǔn)。

1.1.2儀器與試劑 (1)BL-420F型生物機(jī)能檢測(cè)系統(tǒng)，購(gòu)自成都市(儀器廠)泰盟電子有限公司；(2)實(shí)驗(yàn)室自制的Ag-Agcl雙極電極(選擇長(zhǎng)、寬、厚度分別為9 mm、3 mm、0.12 mm的金屬銀片制作Ag-Agcl電極，再用直徑2 mm、長(zhǎng)度10 cm的漆包線制作引線柱)；(3)大鼠固定器(型號(hào)為350DSQ，購(gòu)自上海市中勝科教設(shè)備公司)；(4)血清胃促生長(zhǎng)素(GH)和血管活性腸肽(VIP)酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA)試劑盒(均購(gòu)自上海市恒遠(yuǎn)生物科技公司)。

1.2方法

1.2.1造模處理 除對(duì)照組外，通過夾尾激怒法對(duì)其余5組大鼠進(jìn)行造模，將各組每5只大鼠裝在1個(gè)籠內(nèi)，采用長(zhǎng)海綿鉗夾夾住其中2只大鼠的尾部遠(yuǎn)端約1/3位置，確保不破皮，被夾大鼠因此激怒而尋釁同其他大鼠廝打，最終激怒全籠大鼠。此種刺激30 min/次，每隔3 h實(shí)施1次刺激，4次/d，共刺激7 d。待大鼠呈現(xiàn)緊張和焦慮反應(yīng)，且進(jìn)食量較正常喂養(yǎng)明顯下降50%以上時(shí)表明造模成功。

1.2.2用藥干預(yù) 平胃消導(dǎo)膠囊(甘肅中醫(yī)學(xué)院研制，批號(hào)Z12002224)，其中藥量配比為威靈仙∶枳實(shí)∶莪術(shù)∶萊菔子∶青皮=1∶2∶1∶2∶1，將配制好的藥材水煎并濃縮成粉干，制成膠囊，膠囊規(guī)格為0.5 g/粒，每粒中含有藥粉0.4 g。在造模成功后次日起大劑量組給予3.2 g/kg生藥和蒸餾水配制成的0.32 g/ml的混懸液灌胃，中劑量組給予1.6 g/kg生藥和蒸餾水配制成的0.16 g/ml的混懸液灌胃，小劑量組給予0.8 g/kg生藥和蒸餾水配制的0.08 g/ml的混懸液灌胃。多潘立酮組，將2.7 mg/kg的多潘立酮片磨粉后與蒸餾水配制成0.27 mg/ml混懸液灌胃，對(duì)照組和模型組給予等體積的蒸餾水灌胃。各組灌胃為1次/d，每次1 ml/100 g，共灌胃7 d。

1.2.3埋置電極 各組大鼠在灌胃7 d后，在其胃竇的漿膜表層埋置Ag-Agcl雙極電極，具體步驟：術(shù)前禁食16 h，利用1 mg/kg的20%氨基甲酸乙酯實(shí)施腹腔內(nèi)注射麻醉。取仰臥位并固定，實(shí)施常規(guī)消毒，在劍突下方作一正中切口，將胃竇部暴露出來，距離幽門上約5 mm的胃竇前壁進(jìn)行電極埋置。使用導(dǎo)線穿越腹肌，從皮下潛行到兩肩胛頸部并將其引出，而后固定并逐層將腹壁縫合，應(yīng)用3 d青霉素以預(yù)防感染，術(shù)畢大鼠恢復(fù)7 d。

1.3觀察指標(biāo) 術(shù)后第8天記錄各組大鼠的胃電活動(dòng)，在記錄前的18 h開始禁食但不禁水，記錄時(shí)將大鼠固定在固定器上，將后背頸導(dǎo)線同BL-420F型生物機(jī)能檢測(cè)系統(tǒng)相連，參數(shù)設(shè)置情況：時(shí)間常數(shù)為5 s，高頻濾波為100 Hz，X軸速度為2.56 s/div，對(duì)每只大鼠行連續(xù)監(jiān)測(cè)記錄2 h，每3 min是1個(gè)時(shí)間區(qū)段。檢測(cè)并計(jì)算區(qū)段中胃竇消化間期的移行綜合肌電(IMC)周期和IMCⅢ相時(shí)程及IMCⅢ相發(fā)生率(發(fā)生次數(shù)/總周期×100%)。記錄胃電完成后，用含5%碳末懸液的1 ml/100 g混合固體糊灌胃，劑量為2 g/只，固體糊是將2.5 g羧甲基纖維素鈉、4 g奶粉、2 g糖及2 g淀粉與62.5 ml蒸餾水及1 ml碳素墨水共同配制為75 ml糊狀物，重量約75 g。30 min后經(jīng)股靜脈采血2 ml，后將大鼠處死并剖開腹腔，對(duì)胃賁門及幽門進(jìn)行結(jié)扎，然后取胃，通過濾紙擦干后稱量全重，順著胃大彎將胃體剪開，洗去內(nèi)容物，再稱量?jī)糁兀概趴章?〔1-(胃全重-胃凈重)/總灌胃量〕×100%。再取出小腸擺直在白紙上，檢測(cè)小腸的總長(zhǎng)度L(自幽門到回盲部距離)和碳末推進(jìn)的距離L0(自幽門到碳末推進(jìn)的前端距離)，腸推進(jìn)率為L(zhǎng)0/L×100%。將采集到的2 ml血液以3 000 r/min離心10 min，而后提取血清，應(yīng)用ELISA法檢測(cè)GH和VIP水平，有關(guān)操作均嚴(yán)格依照說明書的步驟進(jìn)行處理。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS21.0軟件，分別用t檢驗(yàn)、χ2檢驗(yàn)、單因素方差分析。

2 結(jié) 果

2.1各組大鼠GH及VIP水平對(duì)比 各組大鼠的GH及VIP水平整體比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。模型組和中、小劑量組的GH水平明顯低于對(duì)照組，且模型組明顯低于多潘立酮組和大、中、小劑量組，大劑量組明顯高于多潘立酮組和中、小劑量組，且中劑量組也明顯高于小劑量組，多潘立酮組也明顯高于中、小劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。模型組的VIP水平明顯高于其他5組，大劑量組低于多潘立酮組和中、小劑量組，中、小劑量組明顯高于多潘立酮組，且中劑量組也明顯低于小劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表1。

表1 各組大鼠GH及VIP水平對(duì)比

與對(duì)照組相比：1)P<0.05；與模型組相比：2)P<0.05；與多潘立酮組相比：3)P<0.05；與小劑量組相比：4)P<0.05；與中劑量組相比：5)P<0.05；下表同

2.2各組大鼠胃竇消化間期的IMC結(jié)果對(duì)比 各組大鼠的IMC周期、IMCⅢ相時(shí)程及MICⅢ相發(fā)生率整體比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。模型組、多潘立酮組和中、小劑量組的IMCⅢ相時(shí)程和MICⅢ相發(fā)生率明顯低于對(duì)照組，且多潘立酮組和大、中、小劑量組高于模型組，小劑量組又低于多潘立酮組和大、中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)，而大劑量組的MICⅢ相發(fā)生率明顯大于多潘立酮組和中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。模型組的IMC周期明顯高于其他五組，小劑量組又明顯高于多潘立酮組和大、中劑量組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表2。

表2 各組大鼠胃竇消化間期的IMC結(jié)果對(duì)比

2.3各組胃排空率和腸推進(jìn)率對(duì)比 各組大鼠的胃排空率和腸推進(jìn)率整體比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。其他5組的胃排空率和腸推進(jìn)率明顯低于對(duì)照組，且模型組又低于多潘立酮組和大、中、小劑量組，而中、小劑量組又明顯低于大劑量組和多潘立酮組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。見表3。

表3 各組胃排空率和腸推進(jìn)率的對(duì)比

3 討 論

FD屬于功能性的胃腸道疾病，臨床研究發(fā)現(xiàn)，導(dǎo)致FD的病因十分復(fù)雜，胃動(dòng)力不足及患者的心理和環(huán)境等因素均可能會(huì)對(duì)FD的發(fā)病造成一定影響〔4，5〕。目前雖然已經(jīng)確定FD發(fā)病可能是由多種原因共同作用的結(jié)果，但其具體病因及發(fā)病機(jī)制尚未明確，臨床上對(duì)于FD的治療通常是對(duì)癥給予西藥方案，在藥物選擇方面主要是多潘立酮或莫沙必利，其雖然在短期內(nèi)可獲得一定效果，但是仍有較高的復(fù)發(fā)率，不利于長(zhǎng)期服用。祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為，F(xiàn)D主要病機(jī)在于脾胃虛弱，加之氣機(jī)不利以及胃失和降，因此在治療過程中需注重健脾胃、消食導(dǎo)逆〔6〕。平胃消導(dǎo)膠囊即為一種較好的和胃消食導(dǎo)逆藥物。

本研究結(jié)果提示了大劑量的平胃消導(dǎo)膠囊對(duì)于FD模型大鼠的GH和VIP水平具有最佳的改善作用。分析原因，可能與平胃消導(dǎo)膠囊所含的各項(xiàng)中藥材發(fā)揮了較強(qiáng)的功效有關(guān)。中醫(yī)認(rèn)為FD患者多數(shù)受到飲食、勞倦或情志傷害，進(jìn)而易引發(fā)食積、濕熱及痰瘀等癥狀，致使胃部氣機(jī)阻滯和升降失常，從而干擾胃部的正常收納、和降等功能〔7〕。平胃消導(dǎo)膠囊是由枳實(shí)、莪術(shù)及萊菔子和青皮等中藥組成。其中枳實(shí)專泄胃實(shí)，能夠開導(dǎo)堅(jiān)結(jié)，并且可行氣寬胸。因此，其對(duì)腹間實(shí)滿及痰癖停水等癥狀均有顯著功效。而莪術(shù)味苦、辛性溫，可歸于肝、脾經(jīng)，能夠消食化積，對(duì)腹脹痛、積聚及宿食不消等癥均有顯著功效。萊菔子則性平味辛、甘，可歸于脾、胃、肺經(jīng)，能夠消食除脹及降氣化痰，并能用于治療飲食停滯及脘腹脹痛等。威靈仙可通經(jīng)鎮(zhèn)痛，并且可幫助消積，利于消痰破堅(jiān)。青皮能夠疏肝破氣，并且可消積化滯，可用于脘腹脹痛的治療。《本草綱目》中曾記載青皮利于改善氣滯下食，且有利于破積膈氣，故可有效改善FD的癥狀。同時(shí)，本研究還發(fā)現(xiàn)，大劑量平胃消導(dǎo)膠囊對(duì)FD模型大鼠的胃電活動(dòng)具有明顯的改善作用。原因可能與大劑量的平胃消導(dǎo)膠囊加快了胃排空和腸蠕動(dòng)等因素有關(guān)。相關(guān)研究顯示，平滑肌電活動(dòng)與機(jī)械運(yùn)動(dòng)緊密關(guān)聯(lián)，空腹條件下，胃IMC的4個(gè)時(shí)相規(guī)律性進(jìn)行，但僅為輕微收縮，僅在IMCⅢ相出現(xiàn)胃竇強(qiáng)烈收縮，此時(shí)胃內(nèi)壓明顯上升，促使胃腔內(nèi)的殘留物自幽門排出〔8〕。而大劑量的平胃消導(dǎo)膠囊改善了此種胃排空作用，因此也優(yōu)化了FD模型大鼠的胃電活動(dòng)。此外，本研究結(jié)果顯示，大劑量的平胃消導(dǎo)膠囊對(duì)于FD模型大鼠的胃排空和腸推進(jìn)均具有明顯改善作用。原因可能與平胃消導(dǎo)膠囊的藥理學(xué)機(jī)制有關(guān)，大劑量的平胃消導(dǎo)膠囊更有利于發(fā)揮中藥材的有關(guān)功效，從而獲得更優(yōu)的治療效果〔9〕。枳殼能夠?qū)ξ改c平滑肌起到雙向調(diào)節(jié)作用，一方面可使胃腸興奮，促進(jìn)其蠕動(dòng)；另一方面還可使胃腸平滑肌的自身張力及解痙作用明顯下降。莪術(shù)對(duì)于胃電節(jié)律的失衡可發(fā)揮改善效果，并對(duì)胃腸平滑肌具有一定的影響，能夠增強(qiáng)胃動(dòng)力。而萊菔子則能夠刺激膽堿興奮，進(jìn)而促進(jìn)胃壁肌肉收縮，增強(qiáng)胃排空。威靈仙能改善腸道平滑肌的運(yùn)動(dòng)功能，進(jìn)而提高食管及腸管的蠕動(dòng)能力。諸藥聯(lián)用，最終優(yōu)化了FD模型大鼠的胃腸動(dòng)力。