老年腦惡性膠質瘤患者血清TGF-β和GFAP的表達及與臨床預后的關系

張極星 張淑榮 趙 亮 黃麗娟 王占強 高鳳全 (齊齊哈爾醫學院附屬第三醫院神經外科，黑龍江 齊齊哈爾 6000)

腦膠質瘤約占顱腦腫瘤的60%，在顱腦各部位均可能發生。近年來老年患者的發病率逐年增加，且老年患者身體各項功能下降明顯，化療耐受力較差，常出現意識障礙、高熱、肺部感染等并發癥，預后較差〔1〕。根據世界衛生組織(WHO)分級將腦膠質瘤分為Ⅰ～Ⅳ級，其中Ⅲ～Ⅳ級為腦惡性膠質瘤〔2〕。手術是臨床治療腦惡性膠質瘤的關鍵，手術后同步進行放化療具有較好的臨床療效，能有效改善患者的預后〔3〕。治療后應及時隨訪患者的情況，觀察是否存在復發的風險，進而及早進行干預延長患者的生命〔4〕。然而，術后病理組織取材較麻煩，因此尋找血清學標志物來監測患者的預后具有重要意義。血清膠質纖維酸性蛋白(GFAP)是一種星形膠質細胞的標志蛋白，當中樞神經系統損傷時會表達升高，腦膠質瘤患者GFAP也會明顯升高，且具有較高的特異性〔5〕。轉化生長因子(TGF)-β與多種腫瘤發生和發展存在較大關系，與腦惡性膠質瘤的發生、發展也存在一定關系〔6，7〕。本研究旨在分析腦惡性膠質瘤患者血清TGF-β和GFAP的表達及其與臨床預后的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2011年1月至2014年1月選取齊齊哈爾醫學院第三附屬醫院進行治療的老年腦膠質瘤患者70例作為研究組。納入標準:①年齡≥60歲;②均經病理確診為腦膠質瘤;③分級為Ⅲ～Ⅳ級;④患者及家屬均知情同意。排除標準:①不能耐受手術者;②術后未接受放化療者;③存在其他部位惡性腫瘤者。研究組男37例，女33例，年齡60～78歲，平均(67.3±3.5)歲，隨訪3年，根據患者生存期分為預后良好組25例(生存期≥3年)和預后不良組45例(生存期＜3年)。另選取健康體檢者60例為對照組，其中男32例，女28例，年齡61～78歲，平均(66.9±3.2)歲。各組一般資料比較差異均無統計學意義(均P＞0.05)。本研究經醫學倫理委員會批準。

1.2 方法 所有患者行手術治療，手術后2～4 w開始進行放化療治療，放化療前行CT檢查定位，根據手術殘留腫瘤及術前水腫情況進行放療治療，給予電子直線加速器6MVX進行曲線60 Gy/30 F 95%劑量照射，2 Gy/次，每天1次，每周照射5 d，連續治療6 w;放療2 w后進行序貫化療，口服替莫唑胺(江蘇天士力帝益藥業有限公司，國藥準字H20040637，規格:50 mg)150～200 mg/m2，每天 1次，每周治療5 d，4 w 為 1個療程，共化療6個療程。

1.3 療效評價標準 近期療效采用WHO制定的實體瘤療效評價標準進行判定，完全緩解(CR):病灶消失且無新的病灶出現，維持時間超過4 w;部分緩解(PR):病灶縮小50%以上且無新的病灶出現，維持時間超過4 w;穩定(SD):病灶縮小不足50%或增大不足25%，且無新的病灶出現;進展(PD):病灶增大超過25%或有新的病灶出現。

1.4 觀察指標 術前、術后1 w、放化療后清晨抽取兩組空腹靜脈血3 ml，3 000 r/min離心10 min，分離血清后放置在－20℃環境中待用。血清TGF-β、GFAP水平采用雙抗體夾心法檢測，應用上海生物技術有限公司提供的試劑，嚴格根據試劑說明進行操作。比較各組TGF-β、GFAP水平。放化療結束后1個月分析不同療效等級患者血清TGF-β、GFAP的差異。

1.5 統計學方法 應用SPSS17.0軟件進行t檢驗、單因素方差分析。

2 結果

2.1 兩組TGF-β、GFAP水平比較 研究組術前TGF-β、GFAP水平均明顯高于對照組，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表1。

2.2 研究組不同時期TGF-β、GFAP水平比較 術后1 w TGF-β、GFAP水平顯著低于術前，放化療后顯著低于術后1 w(P＜0.05)，見表1。

2.3 不同預后患者TGF-β、GFAP水平比較 預后良好組TGF-β、GFAP水平顯著低于預后不良組，差異有統計學意義(P＜0.05)，見表2。

2.4 不同療效等級患者血清TGF-β、GFAP水平比較研究組CR 30例，PR 15例，SD 14例，PD 11例。不同療效等級患者血清TGF-β、GFAP水平整體比較差異有統計學意義(P＜0.05);CR、PR、SD、PD患者血清TGF-β、GFAP水平呈增高趨勢，兩兩比較差異均有統計學意義(P＜0.05)，見表3。

表1 兩組TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

表1 兩組TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

與研究組術前比較:1)P＜0.05;與術后1 w比較:2)P＜0.05

組別 n TGF-β GFAP研究組 術前 70 53.89±2.08 83.95±1.04術后 1 w 70 20.76±0.761) 54.73±0.351)放化療后 70 10.07±1.041)2) 6.28±0.671)2)對照組 60 5.03±0.121) 6.03±0.551)

表2 不同預后患者TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

表2 不同預后患者TGF-β、GFAP水平比較(ng/L，)

與預后不良組比較:1)P＜0.05

組別 n TGF-β GFAP預后良好組 25 38.08±2.421) 69.35±3.641)預后不良組 45 61.79±4.25 98.52±5.08

表3 不同療效等級患者血清TGF-β、GFAP比較(ng/L，)

表3 不同療效等級患者血清TGF-β、GFAP比較(ng/L，)

與CR比較:1)P＜0.05;與 PR比較:2)P＜0.05;與 SD比較:3)P＜0.05

療效等級 n TGF-β GFAP CR 30 32.14±10.23 42.64±20.54 PR 15 36.57±12.15 53.14±35.67 SD 14 45.38±15.671) 67.58±50.36 PD 11 68.54±18.411)2)3) 95.63±61.431)2)F/P值 21.133/0.000 25.309/0.000

3 討論

腦惡性膠質瘤的生長生物學特征呈侵襲性，和正常的腦部組織較難區分，也無明顯的差別，尤其是某些位置比較重要的腫瘤〔8〕。手術是臨床上治療腦惡性膠質瘤的重要方法，但是對于重要部位腫瘤較難完全切除，手術治療效果較差，尤其對于老年患者。因此，手術后多給予放化療綜合治療，以鞏固術后治療效果。且放化療后需要密切監測患者的情況，降低腫瘤轉移和復發的可能性，但是腦惡性膠質瘤術后病理取材較復雜，需要尋求重要的血清學指標來評價治療效果，并觀察患者的預后〔9〕。GFAP是星形膠質細胞的重要成分之一，主要由天冬氨酸和谷氨酸組成，于1971年首次從星形膠質細胞中分離，并逐漸被人們認知了解，作為星形膠質細胞的特異性標志物〔10，11〕。

近年來研究顯示〔12〕，腦組織缺血損傷時GFAP水平升高，與腦組織缺血損傷后星形膠質細胞出現破壞有關。星形膠質細胞破壞后GFAP會被大量釋放，導致腦積液中GFAP水平升高，通過血腦屏障進入血液，導致血清中GFAP水平升高〔13〕。腦惡性膠質瘤患者星型膠質細胞水平明顯升高，GFAP水平也會明顯升高，因此GFAP對腦惡性膠質細胞瘤具有診斷作用。TGF-β與血管生成具有較大關系，腫瘤形成和發展過程中會出現新生血管生成，腫瘤轉移也會存在血管生成。檢測TGF-β水平或可觀察腫瘤發生和發展情況。本研究說明腦惡性膠質瘤患者血清中會出現TGF-β、GFAP水平升高，分析其原因為:腦惡性膠質瘤患者會出現星形膠質細胞大量增殖，而GFAP是星形膠質細胞的標志性物質，因此也會隨之明顯升高，腦惡性膠質瘤在發生和發展過程中會出現血管增殖，而TGF-β與血管增殖有關，因此腦惡性膠質瘤患者會出現TGF-β水平升高〔14，15〕。同時，本研究說明腦惡性膠質瘤患者治療后會出現TGF-β、GFAP水平降低。在行手術或放化療治療后，腫瘤細胞會明顯減少，且治療效果越好，腫瘤縮小程度越大甚至可完全消失，因此GFAP作為星形膠質細胞標志性物質也會減少，腫瘤細胞減少血管也會隨著減少，TGF-β水平也隨之降低，且TGF-β、GFAP減少的程度與治療效果有關。本研究還說明TGF-β、GFAP水平與腦惡性膠質瘤患者的預后有關，分析其原因為:腦惡性膠質瘤患者惡性程度較高，生長和轉移速度也較快，患者預后也較差，生長和轉移速度快患者 TGF-β、GFAP水平也會升高〔16〕，因此預后不良者TGF-β、GFAP水平明顯高于預后良好者。另外本研究說明TGF-β、GFAP的表達與患者的近期療效有關，進一步證明TGF-β、GFAP參與了腦惡性膠質瘤的發生、發展，但其具體機制仍需進一步研究明確。