淺析食入/吸入/混合型過敏原陽性喘息性支氣管炎兒童的免疫功能

王雪華

(鄭州市中原區婦幼保健所，河南 鄭州 450000)

目前，過敏引起的兒童喘息性支氣管炎的發病率日漸增高[1]。本研究將喘息性支氣管炎患兒依過敏原類型不同分型做回顧性分析，研究相應過敏原在該疾病發病機制中的作用及患兒的免疫功能。

1 資料與方法

1.1 一般資料

收集2016年1月～2017年9月就診于鄭州市中原區婦幼保健所確診為喘息性支氣管炎的患兒共255例，患兒血清特異性過敏原IgE(specificIgE，slgE)陽性，包括吸入性過敏原(塵螨、花粉和蟑螂等)和食入性過敏原(雞蛋、牛奶和魚蝦等)，據此分成3組：吸入性過敏原呈陽性組(即吸入組)、食入性過敏原呈陽性組(即食入組)及混合性過敏原呈陽性組(即兩者同時呈陽性)。吸入組男46例，女42例，年齡15個月～6歲；食入組男53例，女54例，年齡14個月～6歲；混合組男26例，女34例，年齡15個月～6歲。所有患兒無上呼吸道感染，外周血WBC<10×109兒。健康兒童340名，其中男女人數分別為151名、189名，年齡在12個月～6歲，無過敏性疾病及喘息性支氣管炎家族史。觀察對象在抽血的前2周內均未服用激素及免疫調節劑。所有患兒在性別與年齡上比較差異均無統計學意義(P>0.05)。

1.2 試劑與儀器

血清slgE、總IgE檢驗試劑與UniCAP100檢測系統(瑞士Pharmacia公司)，血清IgA、IgG、IgM測定試劑(芬蘭Orion Diagnosstica公司)，淋巴細胞表面分化抗體群(clusterodifferentation，即CD)測定試劑和FACSCalibur流式細胞測試儀(美國BD公司)，Access2全自動型微粒子化學發光免疫分析系統(美國BeckmanCoulter公司)，以及日立7600-020全自動生化分析儀(日本Hitach公司)。

1.3 標本采集方法

空腹抽取兩組患者靜脈血液3 mL，經離心處理后留取上清液，并將上清液置于-20℃冰箱中保存待測。應用放射免疫法測定各組CRP水平，CRP試劑盒(鄭州安賽生物科技有限公司)；應用酶聯免疫法測定各組IL-6、TNF-a及IgG、IgA、IgM水平，IL-6試劑盒(上海紀寧生物科研有限公司)；TNF-a試劑盒(北京賽馳生物科技有限公司)；IgG、IgA、IgM試劑盒(上海逸峰生物科技有限公司)；采用流式細胞儀測定外周血CD4+ Th17、Th17/Treg 、CD4+ CD25+ Treg比率。采用全自動化生化分析儀測定各種血清Scr、CYSC及UAER。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 各組細胞免疫與體液免疫相關指標對比(見表1)

表1 各組細胞免疫與體液免疫相關指標對比

注：1)與對照組相比，P<0.05；2)與吸入組相比，P<0.05；3)與食入組相比，P<0.05

2.2 過敏原陽性喘息性支氣管炎患兒的血清總IgE和各淋巴細胞亞群的相關性

檢測結果顯示，喘息性支氣管炎患兒血清總IgE分別與CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg細胞顯著正相關(r=034,0.34,P=0.00,0.00)。

3 討論

以前的研究表明，喘息性支氣管炎的出現主要由CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg細胞調控，表現為過敏原特異性Th2細胞因子的明顯升高及Thl/Th2細胞因子比例的下降。CD4+ CD25+ Treg細胞細胞屬于抑制性/細胞毒性T淋巴細胞亞群，哮喘發病時，過敏原特異的CD8+T淋巴細胞抑制炎癥、降低氣道高反應、抑制白細胞介素_4(interleukin4，IL-4)的產生來使Thl/Th2重新保持平衡，從而達到免疫功效。

本研究中吸入組、食入組、混合組患者血清CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg水平高于健康對照組(P<0.05)，且混合組患兒CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg水平高于吸入組及食入組，差異有統計學意義(P<0.05)；提示吸入性過敏原更加容易引起喘息性支氣管炎兒童的細胞免疫功能發生變化，混合組中CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg的表達失衡也存在受吸人性過敏原影響的可能性。

既往研究認為自身應答性T淋巴細胞可介導機體抗原免疫應答反應，并參與機體免疫系統調節平衡過程。喘息性支氣管炎患者由于體內自身應答性T淋巴細胞活性下降，會導致細胞因子及其受體分泌水平異常，從而導致免疫功能障礙。CD4+ CD25+ Treg細胞為調節性T淋巴細胞亞群，其具有較強免疫抑制功能[2，3]。可直接控制過敏性炎癥效應細胞，也可經過分泌細胞因子緩解喘息性支氣管炎氣道炎癥，其功能失調及數目降低是導引起自身免疫性或過敏性疾病的關鍵原因。研究中吸入組的CD4+ CD25+ Treg細胞明顯降低，也再次驗證以上免疫致病機制，結果顯示若可選取有針對性的經過誘導CD4+ CD25+ Treg水平增高，控制Th2反應的治療方法，或許對吸入性過敏原陽性喘息性支氣管炎患兒療效確切。

CD4+CD25+Treg胞表示B淋巴細胞水平，CD4+CD25+Treg細胞表示活化B淋巴細胞水平，可正向調節IgE合成及分泌，觸發IgE介導的炎癥介質釋放與I型變態反應發生[4]。在本研究中，喘息性支氣管炎患兒血清總IgE分別與CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg細胞顯著正相關，表明當過敏原陽性喘息性支氣管炎患兒體內的B淋巴細胞有也許處在絕對值增高及高激活狀態時，能正向調節IgE水平，引起總IgE顯著增長。此外，免疫球蛋白合成受T淋巴細胞與其釋放的淋巴因子調控。本研究的吸入組和混合組血清IgA、IgG、IgM與IgE比食入組、健康組均明顯增長，而食入組僅IgE顯著高于健康組，說明吸入性過敏原更易誘發細胞免疫與體液免疫的改變。

CD4+ Th17細胞也是參與喘息性支氣管炎的發病重要的免疫調節細胞，能影響Th2的分化，增強其活性[5]。在本研究中，總IgE和CD4+ Th17細胞呈明顯正相關，佐證CD4+ Th17在過敏原致敏中的作用。

總之，吸入性過敏原致敏更易引起喘息性支氣管炎患兒調節性T淋巴細胞的比例或者功能，包含CD4+ Th17、CD4+ CD25+ Treg失衡，從而影響體液免疫功能。所以，對于此類患兒，臨床上除采用抗IgE抗體等醫治外，還必須著重考察免疫調節劑在淋巴細胞亞群調節中的應用。