真菌性鼻竇炎患者血清半乳甘露聚糖抗原水平及其臨床意義

張宏

摘要 目的：探討真菌性鼻竇炎患者血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及其臨床意義。方法：收治真菌性鼻竇炎患者54例作為研究組，另選取非真菌性鼻竇炎患者43例作為對照組。檢測兩組患者手術前后GM抗原的水平。結果：兩組患者術前血清GM抗原水平對比差異有統計學意義（P<0.05）。研究組患者術后的血清GM抗原水平明顯低于術前（P<0.05）。GM試驗檢測結果與真菌性鼻竇炎的一致性較好。結論：通過GM試驗可以有效反應真菌性鼻竇炎的感染程度，可以成為其早期、快速、準確的診斷指標之一。

關鍵詞 真菌性鼻竇炎；血清半乳甘露聚糖抗原；臨床意義

真菌性鼻竇炎又名霉菌性鼻竇炎，是耳鼻咽喉頭頸外科常見的一種特異性感染性疾病。流行病學資料表明，隨著抗生素和皮質激素的廣泛使用，鼻竇真菌性感染的發病率呈逐年上升趨勢，其中真菌性鼻竇炎約占所有鼻竇手術的10%左右。近年來，隨著檢驗醫學對真菌性鼻竇炎認知及研究的深入，CT、MRI等影像學的進展和鼻內鏡在臨床得到廣泛應用，使鼻竇真菌病的診斷率得到了明顯提升。但真菌性鼻竇炎的早期癥狀不明顯，且缺乏特異性的影像學資料，常被誤診而耽誤患者治療甚至加重病情，故確診需要術后病理及真菌培養。因此，臨床尋找一種快速有效的檢測方法來確診真菌性鼻竇炎是目前臨床工作者亟待解決的問題。本次研究選取了本院收治的真菌性鼻竇炎患者作為研究對象，旨在探討血清半乳甘露聚糖（GM）抗原水平及在真菌性鼻竇炎診斷中的臨床價值，現報告如下。

資料與方法

2015年2月-2017年2月收治鼻竇炎患者54例作為觀察對象，將其作為研究組，同時依據術后病理檢查證實為非真菌性鼻竇炎的患者43例作為對照組。研究組男26例，女28例；年齡21～78歲，平均（62.43±10.74）歲；按照疾病類型可分為真菌球型42例，變應性真菌型8例，慢性侵襲性真菌性鼻竇炎4例。對照組，男23例，女20例；年齡19～77歲，平均（62.51±10.22）歲；根據疾病類型分為鼻中隔偏曲19例，鼻息肉14例，慢性鼻竇炎10例。兩組患者性別、年齡等基本資料比較差異無統計學意義（P>0.05），有明顯可比性。

納入標準：①所選患者入院后均依據病史、鼻內鏡檢查、影像學檢查及術后病理檢查證實診斷；②患者及家屬了解研究內容和目的，明確治療風險，愿意簽署知情同意書，并經本院醫院倫理委員會審核通過。

排除標準：①合并精神或神經類疾病；②合并心肝腎等全身重要器官疾病；③近24～48 h內有接受血液制品和真菌類制品等藥物進行治療；④并發真菌性肺炎、真菌性陰道炎等其他系統的真菌感染者；⑤妊娠期或哺乳期婦女。

方法：①標本采集：所選患者均于禁食禁水12 h后在本院檢驗科抽取靜脈血5 mL，置于抗凝管中，在4℃條件中靜置60min后，以3000 r/min的離心速度離心10 min，取上清液分裝于Eppendorf管中并標記，置-80℃冰箱冷凍保存，待測。②血清GM值檢測：GM試驗采用Platelia曲霉診斷試劑盒，具體方法如下：將試劑盒所配備的標準血清A管、陽性對照血清B管、陰性對照血清C管及待檢患者血清D1-5管各300μL血清加100μL處理液（R7）混勻，100℃水浴3 min，13 000 r/min離心10min，取上清液備用。在已包被EB-A2的微孔板內加入50μL結合液（R6），取50μL處理后的上清液于微孔板中，以R3、R4、R5作對照，封口膜封口。以37℃水浴或孵育90min，后去封口膜，用Tris-NaCl沖洗液反復清洗微孔板6次。快速避光，每孔加入顯色液200μL（顯色液R9：R8=1：50）顯色，避光室溫作用（30±5）min，每孔加入100μL反應終止液（R10），在450/620 nm波長的酶標儀上讀取吸光度（A值，30min內）。患者血清GM值計算公式=患者血清A值/標準血清A值，GM值<0.5為陰性，兩次不同時點連續采集樣本A值>0.5或單次A值>0.8判斷為陽性。

統計學方法：數據分析采用統計學分析軟件SPSS 21.0，計量資料采用（x±s）進行表示，結果比較采用t進行檢驗；計數資料采用（%）進行表示，結果比較采用X²進行檢驗。P<0.05表示差異有統計學意義。

結果

兩組患者治療前后血清GM抗原水平的比較：兩組患者術前血清GM抗原水平對比差異有統計學意義（P<0.05）。研究組患者術后的血清GM抗原水平明顯低于術前，差異有統計學意義（P<0.05）。對照組患者的血清GM抗原水平較術前無明顯變化（P>0.05）。研究組患者術后與對照組患者血清GM抗原水平比較差異無統計學意義（P>0.05），見表1。

GM試驗診斷結果及診斷能力分析：以GM試驗試劑盒所標注的0.5為臨界值時，研究組患者有40例患者GM值>0.5，對照組患者有7例患者GM值>0.5，其敏感性為74%，特異性為84%，診斷符合度為78%，說明GM試驗檢測結果與真菌性鼻竇炎的一致性較好，見表2和表3。

討論

真菌性鼻竇炎是一種由多種真菌感染引起的慢性炎癥，其致病菌主要是曲霉菌，約占所有致病菌的>80%。真菌性鼻竇炎多發生于機體免疫力嚴重低下的患者。近年來隨著免疫缺陷患者數目的增多，抗生素、免疫抑制劑、糖皮質激素等藥物的廣泛使用及環境惡化等，該病的發生率呈明顯上升趨勢。目前臨床上診斷真菌性鼻竇炎主要給予患者的癥狀體征、病程、專科檢查及影像學、病理學和真菌學方面的檢查結果，但對于缺乏典型癥狀、體征、影像學檢查的病例，常規檢查方法還存在著明顯盲區，最終確診仍需要術后病理及真菌學方面的檢查。有一項最新研究報道顯示，26.6%的慢性鼻竇炎、鼻息肉患者經真菌培養和組織病理學檢查后確診為真菌性鼻竇炎。說明真菌性鼻竇炎被誤診率較高，而真菌性鼻竇炎的主要治療方式是手術治療，誤診時間過長并不有利于患者疾病的快速康復，因此，尋找一種早期且快速有效的方法診斷真菌性鼻竇炎是目前臨床工作者應當重點關注的問題。

GM試驗是運用酶聯免疫吸附法檢測人血清中的曲霉菌半乳甘露聚糖，其在內科真菌感染的診斷上應用較為廣泛，是侵襲性曲霉菌病的早期診斷的重要指標之一，尤其在造血干細胞移植患者中的診斷敏感性高。GM試驗有別于傳統診斷方法，被認為是早期、無創、可靠的診斷方法，目前已成為深部真菌感染的常規檢查項目，但在真菌性鼻竇炎的應用報道仍較少。半乳甘露聚糖是曲霉菌最早釋放的抗原，因曲霉菌的細胞壁存在β（1-5）呋喃半乳糖殘基，可在菌絲生長時從菌絲頂端釋放出來，且GM釋放量與菌量成正比，因此通過檢測GM值可以有效反映感染程度。有研究報告表示，GM試驗敏感性可達50%～95%，特異性可達80%～90%，可有效診斷真菌性鼻竇炎。這項檢測已被美國FDA和歐洲許多國家批準用于血液、腫瘤等免疫受損者中真菌性感染的診斷。本次研究中，經手術治療后，研究組患者的血清GM抗原水平明顯低于術前，而對照組患者的血清GM抗原水平較術前無明顯變化。說明經手術治療后，對于真菌性鼻竇炎患者，血清GM抗原水平隨著疾病的轉歸而明顯降低，但對于非真菌性鼻竇炎患者，治療前后血清GM抗原水平并無明顯變化，從結果可以看出，通過檢測GM值可以有效反映真菌性鼻竇炎患者的感染程度。同時本次研究中，以GM試驗試劑盒所標注的0.5為臨界值時，GM試驗的敏感性74%，特異性為84%，診斷符合度78%，與上述研究報告結果相似，說明GM試驗檢測結果與真菌性鼻竇炎的一致性較好。