福建省龍巖地區(qū)圍產(chǎn)期孕婦B族鏈球菌在直腸和陰道拭子陽(yáng)性率調(diào)查

陳艷紅

(龍巖人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，福建 龍巖 364000)

B族鏈球菌學(xué)名無(wú)乳鏈球菌屬鏈球菌屬，正常寄居于陰道和直腸，是一種條件致病菌。隨著不斷深入的醫(yī)學(xué)研究發(fā)現(xiàn)GBS不但會(huì)引起孕婦感染，誘發(fā)早產(chǎn)、胎兒發(fā)育不良及胎膜早破等疾病，并且還可通過(guò)垂直傳播給新生兒，引起新生兒的多種嚴(yán)重疾病：劉志偉等報(bào)道，GBS是引起新生兒早發(fā)型敗血癥的主要致病菌[1]；鄧江紅等報(bào)道，GBS是引起新生兒肺炎死亡病例中的重要致病菌，尤其在早發(fā)型肺炎病例中GBS感染占很大比重[2]。因此，開(kāi)展產(chǎn)前GBS篩查有重要意義。近幾年，國(guó)內(nèi)發(fā)表與GBS相關(guān)的報(bào)道較多，但有關(guān)其不同檢查方式與GBS陽(yáng)性率的關(guān)系的文獻(xiàn)不多，2年前我科也應(yīng)產(chǎn)科要求合作，系統(tǒng)地開(kāi)展調(diào)查研究，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 材料與方法

1．1 研究對(duì)象 2016年1月至2016年 12月在龍巖人民醫(yī)院產(chǎn)科門(mén)診就診的35～37周孕婦共5206例，年齡18～41歲，同時(shí)采集陰道拭子及直腸拭子送檢。

1．2 試劑與儀器 全自動(dòng)微生物鑒定儀VITEK－2、GP鑒定卡和GP67藥敏卡（法國(guó)梅里埃公司）、GBS顯色平板 （法國(guó)梅里埃公司）、5%哥倫比亞血平板（鄭州安圖生物工程股份有限公司）。

1．3 方法

1．3．1 標(biāo)本采集 本調(diào)查中用女性拭子采集孕婦陰道和直腸分泌物。先擦去外陰過(guò)多的分泌物，將女性拭子于患者陰道內(nèi)壁輕輕旋轉(zhuǎn)一周，取陰道下1/3處的分泌物；再將另一拭子在肛門(mén)括約肌上2－5CM處，輕輕旋轉(zhuǎn)取直腸壁拭子。標(biāo)本在2h內(nèi)送至檢驗(yàn)科細(xì)菌室。

1．3．2 培養(yǎng)與鑒定 將直腸拭子及陰道拭子接種至梅里埃GBS顯色平板，在37℃有氧條件下黑暗培養(yǎng)18～24h，必要時(shí)延長(zhǎng)至48h，后挑取可疑（粉紅色至紅色）菌落，轉(zhuǎn)種至哥倫比亞血平板進(jìn)行分純培養(yǎng)。再將分純培養(yǎng)的菌落先進(jìn)行觸酶試驗(yàn)，觸酶陰性則進(jìn)一步做CAMP試驗(yàn)。如CAMP試驗(yàn)陽(yáng)性者，結(jié)合溶血等菌落特點(diǎn)可報(bào)告為檢出GBS；如CAMP試驗(yàn)陰性者，則用VITEK－2儀器做最終鑒定，以確定被檢菌是否為GBS。

1．3．3 藥敏試驗(yàn) 將以上所有鑒定為GBS的菌株經(jīng)全自動(dòng)微生物鑒定儀VITEK－2選擇GP67藥敏卡進(jìn)行藥敏試驗(yàn)并獲得藥敏結(jié)果。

1．3．4 統(tǒng)計(jì)分析 經(jīng)WHONET5．6軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。

2 結(jié)果

2．1 本文與不同地區(qū) （市）GBS陽(yáng)性率的比較 見(jiàn)表1。

2．2 本調(diào)查GBS藥敏試驗(yàn)結(jié)果和桂林地區(qū)結(jié)果比較 見(jiàn)表2。

2．3 我院不同年份新生兒科無(wú)乳鏈球菌敗血癥的檢出率（%） 見(jiàn)表3。

3 討論

表1 不同地區(qū)（市）GBS陽(yáng)性率的比較(%)

表2 本調(diào)查GBS藥敏試驗(yàn)結(jié)果和桂林地區(qū)結(jié)果比較（%）

表3 2012年至2017年新生兒科無(wú)乳鏈球菌敗血癥的檢出率

GBS是一種條件致病菌，常寄居于直腸和陰道，健康人群帶菌率可達(dá)15%～35%，攜帶者大多無(wú)癥狀，目前認(rèn)為，GBS是圍產(chǎn)期嚴(yán)重感染性疾病的主要致病菌之一[3]。美國(guó)自上世紀(jì)90年代開(kāi)始由CDC出版圍產(chǎn)期GBS的防治指南并持續(xù)改進(jìn)，產(chǎn)前GBS的篩查大大降低了新生兒GBS感染性疾病的發(fā)生率[4]。圍產(chǎn)期孕婦的GBS帶菌情況國(guó)內(nèi)外的報(bào)告數(shù)據(jù)差異較大，而我國(guó)不同區(qū)域人群的數(shù)據(jù)也有所不同，本文單采直腸拭子共有369例檢出GBS，陽(yáng)性率為7．09%；單采陰道拭子共有205例檢出GBS，陽(yáng)性率為3．94%。雙采集直腸和陰道拭子共有438例檢出GBS，陽(yáng)性率為8．41%。雙采集直腸和陰道拭子陽(yáng)性率明顯高于單采直腸拭子或陰道拭子，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （χ2=5．12，P＜0．05），說(shuō)明圍產(chǎn)期孕婦GBS篩查時(shí)應(yīng)同時(shí)采集直腸和陰道拭子聯(lián)合檢測(cè)，能明顯提高GBS的陽(yáng)性率，本調(diào)查的結(jié)果8．41%與桂林地區(qū)結(jié)果7．5%[5]、高原藏族孕婦結(jié)果8．4%[6]相接近，但比佛山地區(qū)結(jié)果10．15%[7]要低，估計(jì)佛山等地使用較高敏感度PCR檢測(cè)方法有關(guān)[8]。

本調(diào)查的孕婦GBS藥敏試驗(yàn)的結(jié)果和桂林地區(qū)結(jié)果基本一致。都對(duì)青霉素G、萬(wàn)古霉素及喹奴普汀/達(dá)福普丁等抗生素高度敏感；而對(duì)紅霉素類(lèi)、四環(huán)素及左旋氧氟沙星的耐藥率兩者差別不大。但紅霉素及克林霉素的耐藥性結(jié)果與江西省婦幼保健院所做的調(diào)查結(jié)果存在較大差異[9，10]。

2016 年之前我院每年均有新生兒無(wú)乳鏈球菌敗血癥的病例檢出，而2016年1月至2017年6月該病例為0例。究其原因應(yīng)該是自GBS篩查開(kāi)展以來(lái)，臨床產(chǎn)科醫(yī)師對(duì)我院的GBS陽(yáng)性孕婦進(jìn)行產(chǎn)前青霉素的有效干預(yù)和加強(qiáng)產(chǎn)程中消毒管理有關(guān)[11]。由此可見(jiàn)，開(kāi)展產(chǎn)前GBS篩查是非常有意義的。