組織固定處理與包埋常見問題對策

張換平

（武安市第一人民醫院，河北 邯鄲 056300）

石蠟切片作為使用較為頻繁的病理診斷技術，組織固定是組織脫水、透明、浸蠟等相關處理的前提，也是較為關鍵的一個步驟，與此同時，包埋操作的規范化與否會影響到組織切片質量。基于此，本文通過對組織固定處理與包埋常見問題以及對策分析，便于保證石蠟切片質量以及病理診斷結果，保證病理診斷質量，從而為臨床診治提供依據，相關內容分析如下。

1 組織固定問題

組織固定是為了較好的保存組織，實際組織標本固定期間，獲取的標本需要最大程度保證其原有形態，比如條索狀標本、大塊標本等，組織固定期間避免造成原有組織出現扭曲。

標本固定過程中使用最多的是10%中性緩沖福爾馬林，這與10%中性緩沖福爾馬林的使用特點有著密切關系，如10%中性緩沖福爾馬林具有穿透速度快、組織硬化程度小等優勢，這些都保證了不同標本有良好的固定效果。臨床研究顯示，病理組織通過10%中性緩沖福爾馬林固定，病理組織能夠保存較長時間，比如：病理組織的細胞核、細胞質均保存良好[1]，多數也可進行免疫組化染色。

組織固定過程中，部分人員在使用自動化儀器設備過程中，參數設置不合理，影響到標本在固定液中的停留時間，影響到組織標本實際固定效果。部分標本選擇戊二醛、Helly等作為固定液，上述標本在固定液中停留時間過長會引起固定過度，影響到標本固定效果。

2 組織包埋問題

組織處理涉及到脫水、透明以及浸透操作，有效的組織脫水能夠避免脫水不徹底以及透明不夠問題，為不同組織切片提供良好條件。

當前組織處理常用方法包括開放式與密閉式，由于開放式處理期間需要將標本從一個液體槽轉移到另一個液體槽，整個操作存在安全風險，密閉式管理則能夠避免上述問題，提高組織處理的安全性，避免人為操作以及環境對其影響。當然密閉式處理方法也存在不足，比如部分儀器設備無法使用部分液體，此外，活檢小標本處理期間很容易造成富含脂肪組織、手術標本、活檢小標本出現混合，影響到處理效果。

組織處理期間需要保持環境的清潔，固定液需要及時更換，確保工作液面的可靠性，有標本的包埋盒應集中管理，便于控制整體標本處理質量；浸透石蠟溫度需要超過石蠟熔點2～4℃，做好溫度的測量與記錄，避免溫度過高或過低影響到組織處理效果，不利于后期切片。

病理組織包埋期間，針對脫水不徹底問題，在使用乙醇作為脫水劑期間，如果時間允許，可選擇低濃度乙醇進行多次處理，避免組織脫水過度問題；如果時間不允許，可使用95%乙醇，然后使用無水乙醇脫水，當前使用乙醇脫水方面，乙醇初期濃度控制在60%～65%，之后95%乙醇換2次，無水乙醇換2次。組織脫水期間應避免使用高濃度乙醇處理，同時應嚴格控制標本停留時間，避免組織出現扭曲以及硬度過大問題，不利于切片操作[2]。

針對透明切片著色均勻度較差問題，考慮有水分混入浸透蠟液中，在乳頭狀瘤、胃、皮膚等小標本處理期間，需要注意上述問題，此時可合理選擇透明劑，比如將二甲苯更換為甲苯。

3 包埋和標本定位問題

包埋的期間需要采取有效的質控措施，如堅持包埋蠟塊總數、包埋盒內組織的每天記錄與核對，染色結束后核對蠟塊數、切片數，檢查不同切片、蠟塊以及患者紀錄是否一致，避免切片與標本來源的不一致，重視包埋期間的各項檢查。

組織包埋期間很容易出現切片組織損壞問題，比如組織排列方向不合理、組織擺放不合理等，對此，應重視組織定位以及方向包埋管理，如對較大而平的組織，包埋定位期間需要保證最大最平組織面朝下同時進入到包埋模內；可用模式對特殊組織面進行標識，提高包埋定期的準確性，提高標本包埋操作的合理性。

包埋期間需要根據合適的不銹鋼模型，包埋盒內組織在取出時，需要使用干凈的熱鑷子，所有組織均需要放置到模型底部，確保組織和蠟液的充分融合，組織標本在有序排列后需要將模型移動到冷臺，觀察并在組織埋平后及時蓋上包埋盒，并注入蠟液，大約等待10～15 s，再次補充少量蠟液，提高整個包埋盒固定質量，消除后續切片中因固定問題引起的震顫。包埋組織使用塑料包埋盒時，需要根據情況實施二次加蠟，提高整個包埋處理穩固性，消除切片期間因為固定不可靠引起的蠟塊脫落問題；二次加蠟需要控制用量，避免過多蠟液影響切片質量[3]。

4 小 結

石蠟組織固定以及切片過程中會受到較多因素影響，實際處理期間需要重視組織固定處理以包埋中存在的問題，并及時采取因對措施，提高不同組織病理學檢查與操作的規范性，提高切片質量，便于對不同病理組織作出有效診斷。