8味臨床常用中藥抗宮頸癌的作用機制研究進展Δ

張群群，陳媛媛，侯騰飛，李娜，李佳薇，孫洪勝

（1.山東中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，濟南250355；2.青島大學(xué)藥學(xué)院，山東青島 266000；3.山東中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院藥學(xué)部，濟南 250011）

宮頸癌是最常見的女性生殖道惡性腫瘤，在發(fā)展中國家僅次于乳腺癌[1］，全世界每年新增病例數(shù)約50萬[2］。有些國家已將放化療作為局部晚期宮頸癌的標準治療，但是其不良反應(yīng)也給患者帶來巨大的痛苦和心理創(chuàng)傷，嚴重影響患者的睡眠質(zhì)量[3］。中醫(yī)在輔助治療宮頸癌中可起到增效減毒、扶正抗癌等功效[4］?，F(xiàn)代藥理研究證實，補中益氣之藥可增強機體細胞免疫功能，促進T淋巴細胞轉(zhuǎn)化，增強自然殺傷細胞活性，拮抗放化療損傷而引起的免疫功能低下，并刺激骨髓造血功能，同時還可調(diào)節(jié)腸道平滑肌運動，以減輕化療毒副作用及放射性損傷；化瘀解毒之藥可提高淋巴細胞對炎性介質(zhì)、腫瘤細胞的反應(yīng)性，具有抗炎、鎮(zhèn)靜、鎮(zhèn)痛、抗腫瘤等作用[5］。在抗宮頸癌作用機制方面，目前中藥有效成分主要通過影響癌細胞DNA復(fù)制與增殖、影響癌細胞周期進程、調(diào)節(jié)信號通路及細胞因子、改善機體免疫功能等方面發(fā)揮抗宮頸癌作用[6］。在此基礎(chǔ)上，筆者以“中藥”“宮頸癌”“作用機制”“Taditional Chinese medicine”“Cervical cancer”“Active mechanism”等為關(guān)鍵詞，在中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)、ACS、Elsevier、PubMed、Scopus、Springer等數(shù)據(jù)庫中組合查詢2010年1月－2019年3月發(fā)表的相關(guān)文獻。結(jié)果，共檢索到相關(guān)文獻201篇，其中有效文獻48篇。筆者就臨床常用4類（清熱藥、補虛藥、瀉下藥、活血化瘀藥）8味中藥（苦參、紫草、鴉膽子、甘草、黃芪、大黃、莪術(shù)、姜黃）的抗宮頸癌的作用機制進行匯總與分析，以期為進一步研究抗宮頸癌中藥的作用機制提供參考。

1 清熱藥

清熱藥在中醫(yī)防病治病過程中具有非常重要的作用，在現(xiàn)代中醫(yī)臨床治療中也具有舉足輕重的地位，應(yīng)用廣泛且用量較大[7］。炎性微環(huán)境可促進腫瘤血管的新生，為腫瘤的發(fā)生、發(fā)展提供保障，是腫瘤細胞轉(zhuǎn)移的重要因素。清熱藥能抑制腫瘤周圍的炎癥反應(yīng)和感染，可明顯減輕炎癥，運用清熱藥消除腫瘤相關(guān)炎癥反應(yīng)可達到控制腫瘤發(fā)展及殺滅腫瘤細胞的目的[8］?，F(xiàn)對臨床常用3味清熱藥（苦參、紫草、鴉膽子）抗宮頸癌作用機制進行論述。

1.1 苦參

苦參為豆科槐屬植物苦參（Sophora flavescenesAit.）的干燥根，是我國傳統(tǒng)藥用植物，以根入藥，具有清熱燥濕、殺蟲、利尿之功效,有效成分為苦參堿[9］。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)，苦參堿能抑制人肝癌細胞、宮頸癌HeLa細胞、白血病癌細胞以及視網(wǎng)膜母細胞瘤細胞等的生長，能誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，降低腫瘤細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[10］。陸蓉等[11］研究發(fā)現(xiàn)，苦參堿可下調(diào)宮頸癌組織中磷脂酰肌醇3激酶（PI3K）、磷酸化蛋白激酶B（p-Akt）的mRNA表達，降低PI3K、p-Akt蛋白水平，減小大鼠瘤體積，提示苦參堿可通過抑制PI3K/Akt信號通路來抑制宮頸癌細胞增殖。Survivin是目前公認的抑制細胞凋亡因子，有研究發(fā)現(xiàn)，健康機體Survivin幾乎無表達，而在宮頸癌組織中卻呈高表達狀態(tài)[12］。高艷等[13］研究發(fā)現(xiàn)，苦參堿可通過下調(diào)凋亡抑制因子Survivin蛋白表達、上調(diào)胱天蛋白酶3（Caspase-3）和Caspase-7蛋白表達來抑制大鼠宮頸癌癌細胞增殖，誘導(dǎo)癌細胞凋亡。

由此可見，苦參可通過調(diào)控PI3K/Akt信號通路中PI3K、p-Akt蛋白的表達來發(fā)揮抗宮頸癌作用，而苦參對該通路中其他蛋白靶點是否同樣有調(diào)控作用及具體作用機制仍有待研究。

1.2 紫草

紫草為紫草科植物新疆紫草[Arnebia euchroma（Royle）Johnst.］或內(nèi)蒙紫草（Arnebia guttataBunge）的干燥根，具有解毒透疹、活血、涼血之功效，有效成分為紫草素[14］。紫草的化學(xué)成分主要包括萘醌類、單萜苯酚及苯醌類、生物堿類、酚酸類化合物[14］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，紫草具有顯著的抗腫瘤、抗菌、抗氧化、抗炎、治療水火燙傷及促進傷口愈合作用[15］。楊陽等[16］以人宮頸癌SiHa細胞為研究對象，觀察紫草素對細胞周期的影響。該研究發(fā)現(xiàn)，紫草素可降低SiHa細胞增殖指數(shù)，增加G0/G1期細胞數(shù)，減少S期細胞數(shù)，同時降低G蛋白偶聯(lián)雌激素受體（GPER）、細胞周期蛋白D1（Cyclin D1）蛋白水平，提示紫草素可能通過下調(diào)GPER、Cyclin D1蛋白的表達而將細胞阻滯在G0/G1期，誘導(dǎo)細胞凋亡。

紫草作為傳統(tǒng)中藥材，其廣泛的藥理作用已在臨床運用中得以證實，作為潛在的抗病毒、抗腫瘤新藥，其藥理活性仍需進一步探索。就紫草素來講，目前關(guān)于紫草素抗宮頸癌研究多停留在分子生物學(xué)水平，有待更進一步的動物模型及臨床研究。而就抗腫瘤方向來講，紫草中是否潛在其他抗宮頸癌活性成分有待進一步研究。

1.3 鴉膽子

鴉膽子為苦木科植物鴉膽子[Brucea javanica（L.）Merr.］的干燥成熟果實，具有清熱、解毒、截瘧、止痢和腐蝕贅疣之功效，有效成分為鴉膽子素D[17］。鴉膽子化學(xué)成分主要有脂肪酸、苦木內(nèi)酯、木脂素、有機酸等，具有較顯著的抗腫瘤藥理活性[18］。孫靜莉等[19］研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子素D可通過下調(diào)高危型人乳頭瘤病毒16型（HPV16）感染細胞E6、E7 mRNA的表達而促進該細胞凋亡，抑制其持續(xù)性增殖，進而控制感染。Zine ElAbidineA等[20］研究證實，鴉膽子油乳不但可抑制宮頸癌前細胞和癌細胞的增殖，還可促進其凋亡。潘鎦鎦等[21］研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子素D可下調(diào)HPV16 E6、HPV16 E7 mRNA表達，抑制腫瘤細胞增殖，促進腫瘤細胞凋亡。胡燕等[22］以HPV16亞型感染細胞為對象，研究鴉膽子油乳對其的影響及作用機制。該研究發(fā)現(xiàn)，鴉膽子油乳可下調(diào)HPV16 E6、HPV16 E7 mRNA表達，降低HPV16 E6、HPV16 E7蛋白水平同時升高Rb蛋白水平，使HPV16亞型感染細胞凋亡（如人宮頸永生化鱗狀Ect1/E6E7細胞、人宮頸癌Caski細胞）。

目前關(guān)于鴉膽子抗宮頸癌的研究多著重于分子生物學(xué)方向，體內(nèi)實驗?zāi)Ｐ蛿?shù)據(jù)不夠充分。此外，鴉膽子除具有廣泛的抗腫瘤作用外，其臨床常用劑型鴉膽子油乳注射液、鴉膽子油口服乳劑存在穩(wěn)定性差、不良反應(yīng)大、有毒性等問題[23］，在一定程度上限制了鴉膽子油的使用。因此，豐富鴉膽子藥動學(xué)及毒理學(xué)研究，優(yōu)化提取工藝，對鴉膽子抗宮頸癌安全用藥研究意義重大。

2 補虛藥

腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移與機體免疫功能降低、氣血陰陽失調(diào)、正氣虧虛、邪氣深入內(nèi)環(huán)境密切相關(guān)，對腫瘤患者配合運用補虛藥，既可起到調(diào)理患者機體臟腑、生理功能、氣血循環(huán)等效果，還可提升患者免疫機能及抗腫瘤功能[24］?，F(xiàn)對臨床常用2味補虛藥（甘草、黃芪）抗宮頸癌作用機制進行論述。

2.1 甘草

甘草為豆科植物甘草（Glycyrrhiza uralensisFisch.）、脹果甘草（Glycyrrhiza inflataBat.）或光果甘草（Glycyrrhiza glabraL.）的干燥根和根莖，具有補脾益氣、清熱解毒、祛痰止咳、緩急止痛、調(diào)和諸藥之功效，有效成分為甘草素[25］。甘草中有效成分主要包括三萜皂苷類、黃酮類、香豆素類、二苯乙烯類化合物[26］，具有保肝、抗炎、抗菌、抗病毒、抗氧化、抗癌、調(diào)節(jié)免疫、降糖、抗肥胖、解毒和抗?jié)兊榷喾N生物活性[27］。謝思柔[28］研究發(fā)現(xiàn)，甘草素可經(jīng)線粒體氧化應(yīng)激通路誘導(dǎo)宮頸癌細胞凋亡。劉雨欣[29］研究發(fā)現(xiàn)，甘草素可有效抑制裸鼠腫瘤大小，顯著降低荷瘤裸鼠微血管密度（MVD）值，下調(diào)移植瘤組織中增殖細胞核抗原（PCNA）蛋白、血小板內(nèi)皮細胞黏附分子（CD31）及平滑肌肌動蛋白（SMA）的表達，降低移植瘤裸鼠血清中血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）水平，而對血小板反應(yīng)蛋白1（TSP-1）水平基本無影響，提示甘草素可能通過抑制VEGF表達來抑制裸鼠血管瘤生長。

甘草素屬于黃酮類化合物，目前研究其抗宮頸癌作用較多，三萜皂苷類、多糖類等成分是否具有抗宮頸癌作用及其作用機制有待研究；綜上發(fā)現(xiàn)，甘草通過調(diào)節(jié)MVD、PCNA、CD31、SMA、VEGF、TSP-1、Bcl-2、Survivin、p53、Caspase-9、Caspase-3等蛋白水平來發(fā)揮抗宮頸癌作用，而此蛋白靶點之間是否有相應(yīng)聯(lián)系，是否可通過調(diào)控此蛋白所形成的靶點通路來抑制腫瘤細胞增殖，有待進一步研究。

2.2 黃芪

黃芪為豆科植物蒙古黃芪[Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.Var.mongholicus（Bge.）Hsiao］或莢膜黃芪[Astragalus membranaceus（Fisch.）Bge.］的干燥根，具有益氣升陽、固表止汗、利水消腫、脫毒生肌之功效，有效成分為黃芪甲苷和黃芪多糖[30］。瞿小玲等[31］研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷可顯著減少人宮頸癌HeLa細胞的侵襲細胞數(shù)，降低HeLa細胞劃痕閉合率，并抑制其增殖。翟秋麗等[32］研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖聯(lián)合順鉑可以明顯增強后者的抗宮頸癌作用。李文等[33］研究發(fā)現(xiàn)，黃芪甲苷可抑制人宮頸癌HeLa細胞克隆，降低HeLa細胞穿越小室的能力；下調(diào)基質(zhì)金屬蛋白酶2（MMP-2）、MMP-9蛋白表達，抑制HeLa細胞增殖。由此推測黃芪甲苷通過抑制MMP-2、MMP-9蛋白表達來抑制HeLa細胞遷移侵襲。翟秋麗等[34］研究發(fā)現(xiàn)，黃芪多糖聯(lián)合順鉑可顯著降低人宮頸癌SiHa細胞光密度（OD）值，上調(diào)SiHa細胞Caspase-3、Caspase-7、Caspase-9水平，下調(diào)Bcl-2水平，顯著提高SiHa細胞凋亡抑制率和增殖抑制率。

綜上，黃芪甲苷抗宮頸癌作用可能與調(diào)節(jié)MMP-2、MMP-9蛋白表達有關(guān)，但關(guān)于黃芪甲苷抑制HeLa細胞遷移侵襲能力的機制有待進一步探索。黃芪多糖可通過調(diào)節(jié)細胞內(nèi)OD、Caspase、Bcl-2水平來增強宮頸癌Si-Ha細胞對順鉑的敏感性，進而發(fā)揮抗宮頸癌作用；但上述研究只進行了體外細胞實驗，仍需進一步的體內(nèi)實驗數(shù)據(jù)支撐。

3 瀉下藥

中醫(yī)理論里所講結(jié)、癭瘤、瘰疬與現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的腫瘤相似，因邪氣郁結(jié)于里或氣血阻滯的腫瘤患者，可用瀉下藥進行治療[35］?，F(xiàn)對臨床常用瀉下藥大黃抗宮頸癌作用機制進行論述。

大黃為蓼科植物掌葉大黃（Rheum palmatumL.）、唐古特大黃（Rheum tanguticumMaxim.ex Balf.）或藥用大黃（Rheum officinaleBaill.）的干燥根及根莖，具有瀉下攻積、清熱瀉火、涼血解毒、逐瘀痛經(jīng)、利濕退黃的功效，有效成分為大黃酸和賴氨大黃酸[36］。大黃含有蒽醌、蒽酮、二苯乙烯、鞣質(zhì)、色酮、苯丁酮苷等化學(xué)成分，具有保肝利膽、清熱解毒、消炎鎮(zhèn)痛、止血活血、改善糖和脂質(zhì)代謝、消除體內(nèi)自由基、致瀉、調(diào)節(jié)免疫等作用[37］。王耀先等[38］研究發(fā)現(xiàn)，大黃中大黃素能通過內(nèi)源性線粒體途徑導(dǎo)致人宮頸癌HeLa細胞凋亡。林雅軍等[39］研究發(fā)現(xiàn)，賴氨大黃酸可通過激活c-Jun氨基末端激酶（JNK）誘導(dǎo)宮頸癌HeLa細胞凋亡；上調(diào)Caspase-3、Caspase-7及多聚二磷酸腺苷-核糖聚合酶（PARP）的切割片段蛋白水平和磷酸化的JNK蛋白水平。陶永梅等[40］研究發(fā)現(xiàn)，大黃素可降低3種裸鼠細胞中Bcl-2蛋白水平，升高Bax蛋白水平。推測大黃素通過調(diào)節(jié)這兩種蛋白水平來抑制腫瘤細胞增殖，促進腫瘤細胞凋亡。

目前關(guān)于大黃抗宮頸癌的研究多集中于大黃素，賴氨大黃酸研究數(shù)據(jù)不夠充分。此外，賴氨大黃酸抗宮頸癌的研究基本集中在體外實驗，而體內(nèi)實驗結(jié)果與體外是否一致有待證明。

4 活血化瘀藥

活血化瘀藥是以活血化瘀為主要功效，常用以治療瘀血證的藥物，又稱為活血祛瘀藥[41］。腫瘤患者大多存在血瘀現(xiàn)象，活血化瘀藥能促進血行，消散瘀血，主治各種瘀血證等，具有調(diào)節(jié)微循環(huán)、改善血流動力學(xué)和抗血栓等藥理作用[41］?，F(xiàn)對臨床常用2味活血化瘀藥（莪術(shù)、姜黃）抗宮頸癌作用機制進行論述。

4.1 莪術(shù)

莪術(shù)為姜科植物蓬莪術(shù)（Curcuma phaeocaulisVal.）、廣西莪術(shù)（Curcuma kwangsiensisS.G.Lee et C.F.Liang）或溫郁金（Curcuma wenyujinY.H.Chen et C.Ling）的干燥根莖，具有破血行氣、消積止痛的作用，有效成分為莪術(shù)油[42］。馬培志等[43］研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)油可抑制人宮頸癌細胞增殖，并促使其阻滯在G1期。張衛(wèi)霞等[44］研究發(fā)現(xiàn)，莪術(shù)油可降低荷瘤裸鼠血漿纖維蛋白原（FIB）及D-二聚體含量，升高荷瘤小鼠Bax、Caspase-3陽性細胞數(shù)，降低Bcl-2陽性細胞數(shù)，推測莪術(shù)油通過上調(diào)Bax、Caspase-3蛋白水平，下調(diào)Bcl-2水平來改善血液的高凝狀態(tài)，從而降低荷瘤裸鼠血栓形成風(fēng)險來抑制癌細胞增殖。

4.2 姜黃

姜黃為姜科本草姜黃姜黃（Curcuma longaL.）的干燥根莖，具有活血、化瘀、行氣、通經(jīng)、止痛等功效，有效成分為姜黃素[45］。姜黃含有姜黃素、揮發(fā)油等化學(xué)成分，具有抗炎、抗氧化、消除氧自由基、抗腫瘤、抗原蟲、抗蛇毒、降脂、降糖等多種藥理作用[46］。張燕華等[47］研究證實，姜黃素可抑制宮頸癌干細胞增殖，減弱其聚集能力。劉冬菊等[48］研究發(fā)現(xiàn)，姜黃素可下調(diào)裸鼠瘤組織中巨噬細胞移動抑制因子（MIF）、血管內(nèi)皮生長因子C（VEGF-C）mRNA及其蛋白水平，提示姜黃素是通過下調(diào)兩者mRNA及蛋白表達水平來抑制宮頸癌淋巴轉(zhuǎn)移。

姜黃可通過下調(diào)MIF、VEGF-C水平來發(fā)揮抗宮頸癌作用，但關(guān)于MIF、VEGF-C之間有何關(guān)聯(lián)，能否通過調(diào)控涉及此蛋白靶點的其他通路來發(fā)揮抗宮頸癌作用有待深入探索。此外，姜黃中（除姜黃素外）是否還有其他多靶點藥物成分具有抗宮頸癌作用有待研究。

5 結(jié)語

綜上，筆者以“中藥”“宮頸癌”“作用機制”等為關(guān)鍵詞，對中國知網(wǎng)、萬方數(shù)據(jù)、ACS、Elsevier、PubMed、Scopus、Springer等數(shù)據(jù)庫收錄的相關(guān)文獻進行歸納、總結(jié)，最終以此8味臨床常用中藥為代表，對其抗宮頸癌的作用機制進行歸納、總結(jié)。結(jié)果顯示，上述中藥抗宮頸癌作用通路包括上調(diào)抑癌基因及其蛋白表達、下調(diào)促癌基因及其蛋白表達、調(diào)控線粒體通路、降低VEGF水平、阻滯細胞周期、抑制腫瘤細胞增殖、促進腫瘤細胞凋亡等。盡管中藥抗宮頸癌研究已達分子水平，但很多機制研究并不深入，多數(shù)停留在單一通路或蛋白水平，同一中藥是否還有其他作用通路及同一通路其他蛋白、基因表達水平變化是否起到同一治療作用有待確認；此外，針對腫瘤細胞易轉(zhuǎn)移特性的相關(guān)中藥靶向定位體系有待挖掘，相關(guān)中藥制劑的研發(fā)也有待加強。