丹參酮ⅡA抗腎間質纖維化作用機制的研究進展

陳莎莎，李均

(遵義醫學院珠海校區，廣東珠海519000)

慢性腎臟病(CKD)患病率逐年增高,已成為全球關注的重要公共衛生問題之一。腎間質纖維化(RIF)是所有CKD發展的最終結果,也是導致終末期腎臟疾病(ESRD)的主要原因之一。RIF的發生發展過程復雜，是一種多致病因素、多機制參與的疾病，只干預孤立靶點的效果并不理想，需著眼于多靶點的綜合治療。近年來，中醫藥對防治CKD具有良好的臨床療效。中醫藥提倡的“整體觀念”“辨證施治”為防治RIF提供了多環節、多途徑的綜合治療手段。丹參酮ⅡA是從丹參的根中提取的主要親脂性成分，具有抗炎、清除自由基與抗氧化、降低血液黏度、促纖溶、保護腎小管的正常結構和延緩RIF、改善血管微循環、保護內皮細胞等作用。越來越多的研究顯示，丹參酮ⅡA有抗RIF方面的作用。現就丹參酮ⅡA的抗RIF作用機制的研究進展綜述如下。

1 抗炎

急性腎損傷(AKI)是臨床常見危重疾病，可導致腎臟不全修復、持續慢性炎癥和進展性纖維化，有發展為CKD和ESRD的風險。研究表明，丹參酮ⅡA可減弱腎損傷的炎癥反應，保護腎功能，緩解AKI向CKD的轉變。Jiang等[1]在葉酸誘導的AKI小鼠模型中發現，丹參酮ⅡA可下調腎組織中中性粒細胞明膠酶相關脂質運載蛋白(NGAL)的表達，增加增殖細胞核抗原(PCNA)表達，減少炎癥細胞浸潤以及趨化因子表達，從而抑制腎小管間質中纖連蛋白和膠原蛋白Ⅰ的積累，促進受損腎臟的修復，延緩RIF的發展。Jiang等[2]在葉酸誘導小鼠AKI模型的進一步研究中發現,丹參酮ⅡA能夠有效減輕受損腎臟中糖原合成酶激酶3β(GSK3β)的過度活躍和隨后絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的過度活化，同時伴隨著丹參酮ⅡA的抗炎和抗纖維化作用。因此，推斷丹參酮ⅡA可能是通過調節GSK3β/MAPK信號通路發揮抗炎、抗纖維化作用。Gao等[3]發現，丹參酮可通過抑制Toll樣受體4(TLR4)二聚化阻斷MyD88-TAK1-NF-κB/MAPK信號級聯的激活，從而在體外和體內發揮抗炎作用，減輕腎損傷，緩解RIF的發展。

2 抗細胞凋亡

細胞凋亡是RIF發生發展的又一促進因素。腎小管上皮細胞(RTC)具有較強的再生能力，并能通過凋亡機制清除衰老、變異的細胞[4]；然而，持久的疾病狀態可以導致RTC的不可逆凋亡，這也是引起腎小管萎縮及RIF的機制之一。Xu等[5]在缺血/再灌注誘導的腎損傷(I/RIRI)模型大鼠中，丹參酮ⅡA預處理可通過降低I/RIRI大鼠中的髓過氧化物酶(MPO)、巨噬細胞移動抑制因子(MIF)、腫瘤壞死因子α(TNF-α)和白細胞介素6(IL-6)活性，下調MPO、MIF、Caspase-3和p38MAPK蛋白表達水平，上調Bcl-2蛋白表達，從而減弱腎臟炎性反應，抑制RTC凋亡，保護腎功能，延緩RIF發生。楊紫依等[6]通過體外培養人近曲腎小管上皮細胞HK-2，建立缺氧/復氧(H/R)模型模擬腎臟缺血再灌注(IR)損傷實驗中發現：丹參酮ⅡA可通過線粒體凋亡途徑，上調Bcl-2表達，下調Bax、Cleaved Caspase-3表達，減少Bax/Bcl-2值來保護H/R的HK-2細胞增殖活性并抑制細胞凋亡，減輕腎臟IR損傷，延緩RIF的發生發展，保護腎功能。Li等[7]發現，丹參酮ⅡA可通過抑制氧化應激反應，減少細胞凋亡，保護H/R的HK-2細胞，減輕腎臟IR損傷，保護腎功能。

3 抗氧化應激作用

在多種腎臟疾病中，如CKD、糖尿病腎病(DN)等，組織中過量的活性氧簇(ROS)會導致機體氧化應激的發生，進而誘導炎癥及RIF的發生。研究已表明，丹參酮ⅡA有抗氧化應激、保護腎功能的作用。Chen等[8]研究發現，丹參酮ⅡA可通過降低DN大鼠丙二醛(MDA)含量，升高超氧化物歧化酶(SOD)活性，減少炎性細胞因子人單核細胞趨化蛋白1(MCP-1)、C反應蛋白(CRP)、P選擇素和促纖維化因子轉化生長因子β1(TGF-β1)發揮抗氧化、抗炎作用，從而減輕DN大鼠白蛋白尿及腎組織病理損傷，保護腎功能，延緩ESRD進程。Liang等[9]在大鼠造影劑腎病模型中發現，丹參酮ⅡA預處理可通過激活Nrf2/ARE途徑誘導血紅素氧合酶1(HO-1)上調，降低MDA和8-羥基脫氧鳥苷水平發揮抗氧化應激作用。王俏等[10]用丹參酮ⅡA對DN鼠模型進行干預，結果顯示運用丹參酮ⅡA治療后，可使大鼠血清BUN、Scr水平降低和尿蛋白排泄量減少，腎組織內血清總抗氧化能力和谷胱甘肽過氧化物酶含量增加，SOD活力明顯升高，MDA含量明顯降低。

4 抑制上皮間充質轉化(EMT)、減少細胞外基質(ECM)沉積

EMT被認為是RIF過程中導致ECM大量堆積的主要病理機制。大量研究表明，丹參酮ⅡA可通過抑制EMT，減少ECM的沉積，從而延緩RIF發生[11～13]。Cao等[11]研究發現，丹參酮ⅡA可通過抑制高糖誘導的HK-2細胞中Snail、纖維連接蛋白、Vimentin、α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達以及E-cadherin表達減少阻斷EMT的發生，從而減少ECM沉積，延緩RIF發生。呂彥潔等[12]在動物實驗中研究發現，丹參酮ⅡA磺酸鈉可通過下調血小板源性生長因子DD、上調HO-1的表達，抑制間質細胞增生、EMT、ECM沉積延緩RIF的發展。張志慧[13]在單側輸尿管梗阻模型(UUO)大鼠模型中發現，丹參酮ⅡA磺酸鈉注射液聯合黃芪注射液可通過下調TGF-β1及其Ⅰ型受體、Smad3的表達,上調E-cadherin的表達,阻斷EMT，從而減少ECM沉積,延緩RIF發生，與單用黃芪注射液差異有統計學意義。

5 阻斷細胞信號傳導途徑

研究證實，與纖維化相關的信號通路主要為TGF-β/Smad信號通路 、JAK/STAT信號通路、Wnt/β-catenin信號通路、NF-κB信號通路、p38MAPK的激活以及基質金屬蛋白酶與基質金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMP)的代謝失衡等。Tang等[14]發現，丹參酮能夠下調脂多糖(LPS)誘導ERK1/2、p38和JNK的磷酸化，減少炎癥介質TNF-α、IL-6的釋放，從而抑制炎癥反應。因此，通過阻斷p38MAPK信號轉導通路可能為丹參酮ⅡA抑制RIF的又一作用機制。同時，已有研究表明，Wnt/β-catenin信號通路參與RIF的發生發展。Zhou等[15]在腎RIF小鼠模型中發現，高表達β-catenin 能夠在RTC內結合淋巴增強因子，促進下游血管緊張素基因(RAS)高表達，加劇小鼠RIF損傷的程度；給予β-catenin 靶向抑制劑ICG-001后，RAS表達量降低，小鼠尿蛋白減少，RIF有所緩解，并且在細胞水平進一步驗證此結果。Huang等[16]發現，丹參酮ⅡA可通過下調Wnt/β-catenin信號途徑的活性而降低β-catenin的異位表達，上調E-cadherin表達水平，降低α-SMA表達，抑制EMT形成過程，進而延緩RIF發生發展。Yao等[17]發現，p311可通過TGF-β1/Samd信號傳導在UUO小鼠模型中發揮促纖維化作用。因此，有效切斷TGF-β的信號轉導是終止和減輕RIF的關鍵。趙斐等[18]在TGF-β1誘導的HK-2細胞實驗中發現，丹參酮ⅡA 可通過抑制TGF-β1/Smad信號通路中Smad2、Smad3蛋白及ECM中Ⅲ型膠原蛋白的表達發揮其抗RIF作用。 NF-κB信號通路在RIF發生發展過程中所起的作用已被證實。Schwarz等[19]研究發現，用LPS刺激腎系膜細胞會增加NF-κB、血管細胞黏附分子1表達。Wang等[20]發現,丹參酮 ⅡA可通過抑制TGF-β/Smad和NF-κB信號通路的激活，下調5/6腎切除大鼠的纖維蛋白、膠原蛋白Ⅲ、膠原蛋白Ⅳ、TNF-α、MCP-1及CXCL-1表達，從而抑制炎癥，減少ECM的沉積，延緩RIF發生。

6 改善間質血管微循環、保護血管內皮作用

血管內皮穩定性喪失是導致腎小管周毛細血管(PTC)損傷的重要途徑。已有研究發現，丹參酮ⅡA能保護血管內皮、改善腎臟PTC病變,延緩RIF進展。McGinn等[21]認為，人臍靜脈血管內皮細胞(HUVECs)可作為PTC的替代細胞應用于腎小管間質損傷的疾病研究。Zhu等[22]在HUVECs體外實驗中發現，丹參酮ⅡA可通過孕烷X受體(PXR)依賴性機制抑制H2O2誘導的細胞凋亡、氧化應激及炎癥反應，保護HUVECs免受H2O2造成的結構功能損傷。Cheng等[23]在體外實驗中發現，丹參酮ⅡA可通過抑制NF-κB信號通路的激活，抑制LPS誘導的炎癥反應，保護HUVECs免受損傷。Li等[24]研究發現，丹參酮ⅡA通過阻斷Rho/ROCK途徑，改善HUVECs細胞活力，抑制細胞凋亡，保護細胞免受LPS誘導的細胞遷移，其量級與纈沙坦相當。在體內動物模型中，丹參酮ⅡA是否能保護內皮細胞免受損傷，有待進一步的研究探索。

綜上所述，丹參酮ⅡA的腎臟保護機制主要為抗炎、抗氧化應激、抗細胞凋亡、減少ECM沉積、改善腎間質微血管循環、保護血管內皮、阻斷細胞信號通路、抑制促纖維化因子的釋放等作用。但是，目前對于丹參酮ⅡA具體作用機制的研究還不夠深入完善。例如：丹參酮ⅡA抗凋亡方面，僅局限于現象研究，對于所涉及的確切的細胞信號通路的研究還缺少探索。此外，中西藥結合的診斷思路、治療方法已應用于科研、臨床,然而，有關丹參酮ⅡA在中西醫藥物配伍治療腎病方面的科研及臨床應用的相關文獻報道還較少，需進一步深入擴展丹參酮ⅡA在中西醫結合治療腎病方面的研究應用，并深入探索其具體作用機制。這對于提升我國中草藥的國際地位以及影響力，推進中西藥有機結合的優勢發展具有重要意義。