健康受試者單劑量口服苯磺酸氨氯地平葉酸片和苯磺酸氨氯地平的藥代動力學研究

韓 冰

（沈陽市第二中醫醫院，遼寧 沈陽 110015）

心血管疾病中獨立危險因素中包括血漿同型半胱氨酸水平上升、高血壓等[1]。苯磺酸氨氯地平是臨床上常用的一種高血壓治療藥物，屬于長效二氫吡啶類鈣通道阻滯劑。葉酸是一種維生素B復合體，對生物蛋白質、氨基酸、核酸的代謝意義重大[2]。苯磺酸氨氯地平葉酸片為葉酸與苯磺酸氨氯地平的復合物，本研究圍繞苯磺酸氨氯地平葉酸片和苯磺酸氨氯地平的藥代動力學展開研究，旨在為臨床用藥提供指導，具體報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料：隨機選取20例健康男性志愿者，年齡（21.2±1.5）歲，體質量（64.3±5.9）kg，身高（176.2±5.8）cm，BMI（22.0±1.8）kg/m2。體檢報告顯示志愿者肝腎功能、血尿常規、心電圖、常規胸片檢查均無異常，無嚴重的重要器官功能損害疾病，無毒品史，無酗酒、吸煙等不良嗜好，對本次研究所用藥物無過敏史。參與本次研究前兩周不曾服用過可能對本次實驗結果造成影響的藥物，前3個月未獻血、未參與過其他臨床藥品研究試驗。志愿者對本次實驗內容知曉并愿意配合，并簽署相關協議。

1.2 藥物與儀器：本研究所用的藥物如下：①苯磺酸氨氯地平葉酸片：5.0毫克/片，產自廣東彼迪藥業有限公司，國藥準字為H20 057316；②苯磺酸氨氯地平片：5.0毫克/片，產自輝瑞制藥有限公司，國藥準字為H10 950224；③苯磺酸氨氯地平標準藥物：有效成分占99.4%，由中國食品藥品檢定研究所提供，批號為100374-200903。本研究所用的儀器如下：①API 4000超高效液相色譜儀，產自美國AB Sciex；②超高效液相色譜系統1100，產自美國Agilent。

1.3 方法：以單劑量、雙周期、交叉對照為原則進行研究設計。30名志愿者隨機均分為兩組，交叉服用苯磺酸氨氯地平葉酸片與苯磺酸氨氯地平片，兩次服藥之間的間隔至少為14 d[3]。試驗開始前1 d，志愿者于晚飯后入住我院Ⅰ期病房。禁食，時間超過12 h，以200ml溫開水服用苯磺酸氨氯地平葉酸片與苯磺酸氨氯地平片，服用后2 h禁水禁食，4 h給予標準的統一午餐。對志愿者的靜脈血進行抽取，時間為給藥前及給藥后的1、2、4、6、8、10、12、24、36、48、72、96、120、144 h，每次4 mL，采集到的血液放置于試管內，內含肝素，離心10 min，離心速度為3000 r/min，隨后置于-20 ℃的冰箱內[4]。因氨氯地平需對光有敏感性，因此在整個操作過程中需避光處理。志愿者在服用藥物后，應在病房內留置觀察15 h，密切監測志愿者的血壓，記錄是否有頭痛、面紅、乏力、腹痛、心悸、嗜睡、惡心、眩暈、踝部水腫等癥狀。

1.4 測定方法

1.4.1 色譜條件：①色譜柱：C18（5 μm，4.6 mm×100 mm），流動相為甲醇-0.5%甲酸=60∶40，流速為1.0 mL/min；②柱溫：30 ℃；③進樣品量：30 μL。

1.4.2 質譜條件：①電噴霧離子化源：為正離子模式，溫度500 ℃，噴射電壓為5000 V，氣簾氣體N2壓強為103 kPa，源內氣體GS1壓強為380 kPa；②苯海拉明與氨氯地平的質荷比分別為m/z256.3→167.1、m/z409.2→238.3，DP即解簇電壓分別為50 V、35 V，CE即碰撞能量分別為25eV、15eV。

1.4.3 血漿樣品處理方法：200 μL的血漿樣品提取物中混合100 μL的含內標溶液，其中甲醇-水=1∶1，劑量為100 μL，濃度為1 mol/L的碳酸鈉溶液劑量為100 μL，混合提取試劑即乙醚-二氯甲烷=3∶2的劑量為3.5 mL，以渦流的形式將上述試劑混合，離心速度為3500 r/min，于氮氣流下以40 ℃的溫度吹干，殘余的藥劑中加入150 μL甲醇-水溶液（1∶1），以渦流的形式將混合30 s，最后提取30 μL試劑分析[5]。

1.5 評價指標

1.5.1 方法評價：①專屬性：本研究的條件可使內標與氨氯地平的保留時間為2.45 min、2.94 min，空白血漿內的內源性物質對本研究測定的實驗結果不產生干擾。②標準曲線及最低定量下限：于空白血漿中加入適量的氨氯地平標準溶液，配置成濃度分別為0.05 ng/mL、0.15 ng/mL、0.5 ng/mL、1 ng/mL、3 ng/mL、5 ng/mL的溶液，除了不混入100 μL甲醇-水溶液（1∶1）外，其余操作與血漿樣品處理方法相同，測定色譜圖[6]。②回收率及精密度評價：配制濃度為0.15 ng/mL、1 ng/mL、3 ng/mL的質控溶液，與血漿樣品處理方法相同，進行測定。每種濃度選6次樣本，評估絕對提取回收率、日間精密度、日內精密度，連續測定。③穩定性評價：將高、中、低濃度的氨氯地平血漿樣本于-20 ℃的冰箱內放置90 d后，于室溫放置4 h、-20 ℃下反復凍融3次，樣本均穩定。④安全性評價：對志愿者基本生命體征、實驗室檢查、心電圖、體格檢查進行監測。

1.6 統計學方法[7]：以實測的數值表示tmax、Cmax；以梯形法算出AUC0-∞=AUC0-∞+Ctn/λz，其中Ctn代表最后血藥濃度，λz代表末端消除速度常數。用DAS比較藥物的藥代動力學參數，包括苯磺酸氨氯地平葉酸片、苯磺酸氨氯地平片及苯磺酸氨氯地平標準藥物，參數有AUC0-∞、AUC0-t、Cmax，對數轉換后行t檢驗及方差分析，非參數檢驗測定tmax。

2 結果

2.1 氨氯地平的回收率及精密度結果：以質控藥物樣品濃度為標準曲線，對質控藥物行方差分析，計算準確度與精密度，見表1。

表1 氨氯地平的回收率及精密度結果（）

表1 氨氯地平的回收率及精密度結果（）

2.2 兩種藥物藥代動力學參數結果：30位健康志愿者單劑量口服苯磺酸氨氯地平葉酸片與苯磺酸氨氯地平片后，血漿內氨氯地平的水平參數均無統計學差異（P＞0.05），具體數值見表2。

表2 兩種藥物藥代動力學參數結果（）

表2 兩種藥物藥代動力學參數結果（）

3 討論

受試藥品服用后7～8 h內達到峰值濃度，藥物的半衰期為30～40 h，說明受試藥物的吸收速度較慢，作用時間較久，每日只需服用一次，可在一定程度上提高臨床患者使用的依從性。本研究結果顯示，苯磺酸氨氯地平葉酸片和苯磺酸氨氯地平片的藥代動力學具有等效性，無顯著差異性。說明兩種藥物之間生物等效性相同，可為臨床應用提供理論依據。