精子DNA損傷與試管嬰幼兒結局的相關性分析

屈宗銀

（重慶醫科大學附屬第二醫院 生殖醫學中心，重慶 400010）

0 引言

隨著科技的發展，輔助生殖技術（ART）在全世界得到廣泛的應用，給不孕不育男性開創了新的局面[1]。有研究表明，在不孕不育夫婦中，有50%均由于男性精子DNA損傷，染色體畸變感染性疾病、基因突變等因素導致[2]。隨著ART技術的發展，試管嬰兒的成功率不斷的提高，給不孕不育家庭帶去了新的希望。在試管嬰兒技術中，精子的質量及其完整性對人工受孕與胚胎及胎兒的發育起著至關重要的作用[3]。通過多精子質量的篩選、精子DNA損傷情況的監測提高體外受精的成功率。本研究實施試管嬰兒包括體外受精（IVF）和精子卵漿內注射技（ICSI），進行精子質量的對比，旨在分析男性精子損傷對試管嬰兒結局的影響，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧分析2015年3月至2017年12月我院生殖專科的62例進行試管嬰兒輔助生殖者，按DNA損傷情況分為損傷組與正常組，每組各31例，其中觀察組年齡為24-44歲，平均（35.26±5.69）歲；其中學歷有中專10例，大專14例和本科及以上7例。對照組年齡為26-45歲，平均（37.25±4.39）歲；其中學歷有中專12例，大專11例和本科及以上8例。患者上述一般資料差別無統計學意義，具有可比性（P＞0.05）。納入標準：①年齡均＞23歲；②本研究經醫院倫理委員會批準，患者均簽署知情同意書；③入選人員配偶卵子質量均正常，雙側輸卵管通暢，無排卵異常等。排除標準：①伴有嚴重肝、腎、腦、肺等臟器等嚴重功能不全者；②合并血液系統疾病或免疫力嚴重缺陷者；③一般資料不齊全者。

1.2 方法

采用精子核染色質發散法（SCD）檢測精子損傷率。

1.3 觀察指標

對比兩組精子濃度、精子活力、精子正常形態、頂體酶、IVF受精率、ICSI受精率、優質胚胎率、活產率與流產率。①受精率：受精卵數/獲得卵子數×100%；②優質胚胎率：優質胚胎數/受精卵數×100%；③活產率：活產數/本組總病例數×100%；④流產率：胎兒于孕周＜28周流產例數/本組總例數×100%。

1.4 統計學分析

采用SPSS 18.0統計軟件包處理。計量資料以均數±標準差（±s）表示，采用t檢驗，計數資料采用卡方檢驗。P＜0.05表示有差異且具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組精子情況比較

損傷組精子濃度、精子活力、精子正常形態、頂體酶、IVF受精率、受精率、優質胚胎率均明顯高于損傷組（P＜0.05），正常組ICSI受精率明顯低于損傷組（P＜0.05），見表1。染色質結構在去濃縮過程中，纖維蛋白通過重新排列形成更加穩定的超濃縮結構，提高了精子染色質原核的形成的難度，增加IVF受精失敗率；②在精子與受精卵的結合過程中，精子須穿過卵子透明帶才得以成功與卵子結合形成受精卵，受損的精子多由于能量不足，活動能力弱，難以穿過卵子透明帶；③受損精子成功穿過透明帶后與卵子結合，但由于DNA受損且難以自我修復導致結構的不完整性，受精卵難以正常發育，形成質量不佳的胚胎[7-8]。本研究數據表明，受損組優質胚胎率明顯低于對照組，且活產率較正常組低。表明在精子DNA受損狀況下，可阻礙受精卵的形成[9]，在體外受精技術中可作為有效參考指標。但精子DNA受損是否導致劣質胚胎、降低活產率以及流產率任存在較大爭議[10-11]。在本研究中，損傷組ICSI受精率高于正常組，可能與研就范圍太小有關，需進一步研究。

綜上所述，精子DNA損傷監測可作為評估實施試管嬰兒前重要的一項指標，采取適當的方式減少精子DNA的損傷，可提高試管嬰兒的成功率。

表1 兩組精子情況比較（±s）

表1 兩組精子情況比較（±s）

優質胚胎率（%）損傷組（n=31） 66.25±7.56 42.26±3.09 10.89±0.88 66.26±5.76 71.26±5.57 72.13±3.56 45.36±4.76正常組（n=31） 92.32±6.69 56.52±1.85 13.10±0.84 82.79±5.26 81.26±4.26 58.96±5.26 53.26±3.89 t 14.378 22.045 10.114 11.798 8.361 11.545 7.155 P＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001組別精子濃度/（×106/mL）精子活度（A+B）/% 正常形態（%） 精子頂體酶（μIU/106） IVF受精率（%）ICSI受精率（%）

2.2 兩組妊娠結局比較

正常組活產率為（61.29%）明顯高于對照組（32.25%）（P＜0.05），兩組流產率無明顯差異（P＞0.05），見表 2。

表2 兩組妊娠結局比較[n（%）]

3 討論

精子主要成份為核蛋白與DNA，精子DNA損傷或精子未成熟直接影響受精卵與胚胎的發育，在受精卵發育過程中起著尤為重要的作用，是受精成功與否的關鍵[4]。有研究表明，精子DNA損傷可導致編碼Na+-K+-ATP酶的基因改變，引起ATP酶的變性，導致其不能水解，減少能量的釋放，降低精子的活動力[5]。本研究中數據顯示，受損組精子活力明顯低于正常組，精子的活動能力與正常形態等是精子染色體穩定的指標，染色體穩定性降低，表明精子質量的下降，從而降低受精成功率[6]。本研究數據中，正常組IVF受精率明顯高于受損組，表明DNA受損精子受精率低于正常精子。有學者報道，受精失敗的原因諸多：①由于精子染色體的不穩定，其