孕中期羊水染色體多態性與妊娠結局的關系研究*

李 楠，吳曉昀，嚴 芳，李 婕，張 珍,朱 燕

(廣東省第二人民醫院檢驗醫學部,廣東廣州 510317)

染色體多態性是個別染色體上的微小變異，表現為結構及帶型強度的變異。一般涉及在遺傳上不活躍的含高度重復DNA 的結構異染色質區，而此區無遺傳信息傳遞，發生變異后一般不會引起臨床表型異常。然而，國內外均有研究表明，染色體多態性所具有的遺傳效應可能在一定內外環境影響下，導致相應的臨床表型或妊娠異常等[1]。本研究通過羊水染色體核型分析及跟蹤隨訪，探討染色體多態性與妊娠結局的關系，旨在為產前診斷工作提供科學的數據支撐。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2015年1月至2018年3月，由于高齡、異常妊娠史、產前篩查高風險或B超異常等高危因素來本院產前診斷中心就診的孕期年齡在20～46歲，孕周為16+3～24周的孕婦共581例。所有孕婦經過遺傳咨詢并簽署知情同意書后自愿接受羊膜腔穿刺術進行產前診斷。

1.2研究方法

1.2.1無菌條件下經超聲介導行羊膜腔穿刺術，抽取羊水20.0 mL，離心后留細胞沉淀物及羊水0.5 mL，加入10.0 mL Gibco培養基，吸管吹打混勻后平均分至兩個25.0 mL的培養瓶中，置37 ℃，5% CO2恒溫培養箱中培養。經培養后制備染色體標本，G顯帶后進行核型分析，計數30個中期分裂相，分析3個以上的核型，對于嵌合體患者，則計數100個中期分裂相，分析5個以上核型。

1.2.2核型分析檢測出胎兒染色體多態性時，召回孕婦夫婦抽取其外周血，常規外周血染色體制備，G顯帶后進行核型分析，明確胎兒染色體多態性的遺傳來源，并隨訪其在孕期的產檢結果及新生兒出生情況。

1.2.3外周血Y染色體AZF微缺失基因檢測采用深圳亞能生物技術有限公司試驗盒，按照試劑盒說明書逐步操作。

2 結 果

2.1581例孕婦中，核型分析發現羊水染色體多態性36例，占受檢人數的6.20%。召回夫婦36對(100.00%)。 見表1。

表1 36例羊水染色體多態性核型分布

2.236例胎兒染色體多態核型中，出生男嬰21例，女嬰14例，1例為21pstk+合并21三體綜合征而終止妊娠[47，XN，21pstk+，+21]；其中inv(9)8例，次縊痕變異8例，D組和G組染色體多態13例，大Y 1例，小Y 6例，見表1。產前診斷指征分布：年齡高風險≥35歲9例(25.00%)；產前血清學篩查高風險者23例(63.89%)，其中早期唐篩高風險8例(34.78%),中期唐篩高風險13例(56.52%)，中期唐篩臨界風險2例(8.70%)；不良孕產史者4例(11.11%)。

2.336例胎兒染色體多態核型中,35例多態性核型遺傳自父母其中一方，且父母無異常臨床表型；僅有1例21ps+多態性核型為新生變異，為39+2周順產男嬰，出生時體質量3.05 kg，身長50 cm，Apgar評10分，孕婦在孕期產檢以及胎兒出生后均未見明顯異常，新生兒期保健各項指標均在正常范圍內。

2.4外周血Y染色體AZF下微缺失基因檢測結果為：6例中有2例AZFc區的SY152位點缺失，其余4例未發現AZF微缺失。

3 討 論

染色體多態性是指正常人群中經常可見到各種染色體形態恒定的微小變異，其發生率為2.6%[2]，常涉及9號染色體倒位，D、G組短臂和Y染色體長臂長度變異，并按孟德爾方式遺傳，有家族聚集現象，但傳統觀點認為上述變異不會引起表型效應[3]。本研究58例孕婦中染色體多態性的發生率為6.20%，高于普通人群。

9號染色體臂間倒位[inv(9)]在人群中的發生率為1.00%～1.65%[4],韓國有學者報道，inv(9)患者與健康人群相比畸形率沒有顯著差異[5],但有學者發現成年患者可出現生育障礙[6]。因有一部分本身或配偶帶有結構異常(包括倒位、易位、插入等)的染色體，而表型正常的攜帶者很容易形成異常的配子而使后代受累，其共同的臨床表現是引起反復自然流產、死胎、生育畸形兒等。本研究中inv(9)共8例，占羊水穿刺病例的1.38%(8/581)，與人群中的發生率一致,且均遺傳自雙親之一，且雙親表型正常。

本研究中1qh+/9qh+共有8例，占羊水穿刺病例的1.38%(8/581)。目前，對于次縊痕增加會引起流產、生育異常等癥狀報道觀點不一，有支持者[7]，也有反對者[8]。本研究對召回的8對夫婦做檢查，結果顯示胎兒多態性均遺傳自雙親之一，且雙親表型正常。

Y染色體的多態性分為大Y、小Y和Y倒位。大Y過去一直認為是正常的變異形態，而現在認為大Y染色體高度重復的DNA序列可能增加大Y的不穩定性，導致配子或合子在早期細胞分裂時發生不分離、易位或基因數的增減等傾向，從而產生不平衡配子或合子而引起不育、流產等生殖異常[9-11]。小Y染色體，可因存在Y染色質微缺失引起細胞分裂發生錯誤，引起無精癥或異常精子，導致對方流產、死胎等。本研究中大Y 1例，小Y 6例，占羊水穿刺病例的1.20%(7/581)。召回孕婦丈夫檢查，Y的多態性均垂直遺傳自父親。我們同時對多態性為小Y的胎兒的父親加做外周血Y染色體AZF微缺失檢測，6例中4例未發現AZF微缺失，有2例為AZFc區的SY152位點缺失。由于Y染色體屬于單倍體，當親代存在AZF微缺失時，缺失的Y染色體會毫無保留地垂直遺傳給子代，甚至有報道子代的AZF缺失片段會擴大[12]，子代成年后的精液情況也是不可預知的[13-14]。所以YqAZFc段缺失者自身的影響不大，也可以有正常的生育能力，但遺傳給后代時可能有加重的趨勢。

D、G組為近端著絲粒染色體，短臂上有多拷貝的rRNA基因，該基因拷貝數的增減對細胞代謝不會造成明顯影響，但rRNA基因的增多可使染色體結構功能發生改變，引起D/C組隨體區聯合，導致染色體不分離和重排機會增多，形成染色體異常的配子和合子，從而導致胚胎發育障礙，致使流產、胚胎死亡或不育等[15]。本組研究中，D、G組染色體多態性胎兒有13例，占羊水穿刺病例的2.23%(13/581)。其中有1例21pstk+合并21三體綜合征而終止妊娠；1例21ps+新生變異的病例在孕期及出生后未見明顯異常，可能是由于隨體區本不具有結構功能基因。由于病例數據少，其新生變異的具體機制及與臨床表型效應的關系還需收集數據進一步研究。其余胎兒染色體多態性均遺傳自雙親之一，且雙親表型正常。

本組資料顯示，36例染色體多態性胎兒中，除1例合并21三體綜合征終止妊娠外，均健康出生，隨后分別對其36對父母進行外周血染色體檢查，除發現1例21ps+新生變異外，其余胎兒多態性均遺傳自雙親之一，且這些夫婦均表型正常。21ps+新生變異病例在整個孕期且胎兒出生后均顯示正常，新生兒保健各項指標均在正常范圍內。因此，筆者推斷染色體多態性對臨床表型及妊娠結局并無影響。所以在發現胎兒多態性時，應建議召回其父母做相應檢查，確定來源。對于具有明確遺傳來源的染色體多態性可參照其父母的身體發育、智力發育情況予以判斷其妊娠結局。但新發的染色體多態性與胎兒的生長發育之間的關系還需收集更多的樣本資料進行進一步的研究，以便更好地進行產前診斷，避免染色體異常胎兒的出生。

具有明確遺傳來源的染色體多態性可參照其父母的身體發育、智力發育情況予以判斷其妊娠結局，但新發的染色體多態性與胎兒的生長發育之間的關系還待收集更多的樣本資料進行進一步的研究。