早發型敗血癥早產兒臍血VDBP、25-(OH)D、PCT及IL-6水平變化

劉 鵬

新生兒敗血癥是一種發生于新生兒期的系統性感染，由病原體侵入血液循環所致，發病率為4.9%～17.0%[1]。其中早發型敗血癥（EOS）指在生后72 h內發生敗血癥，感染途徑多為母嬰垂直傳播，與圍生期因素密切關聯[2]。早產兒因免疫系統更為不全，EOS發病率、死亡率顯著高于足月兒[3]。早產兒EOS缺乏特異性表現，其診斷是新生兒醫學的難點。細菌學培養是金標準，但培養周期長，不利于早期診斷。因此，探尋EOS診斷敏感且可靠的標志物有著迫切性。

近年來，不少研究分析了臍血降鈣素原（PCT）和白細胞介素-6（IL-6）與新生兒EOS的關系，但確切意義仍有待探討[4]。維生素D結合蛋白（VDBP）是一種主要由肝臟產生的多功能血漿球蛋白，具有結合、運輸循環維生素D的功能。近年研究發現，[25-(OH)-D]及VDBP在機體損傷、感染中扮演著重要角色[5]。有研究顯示，VDBP在膿毒癥患者血液中顯著降低[6]。但目前尚缺乏關于VDBP與早產兒EOS相關性的報道。為此，筆者檢測了早產兒EOS臍血VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6 的變化，探究其意義，以期為EOS早期快速診斷提供指導。

1 對象與方法

1.1 研究對象 選取2013年7月～2018年6月醫院新生兒重癥監護室（NICU）收治的早產兒。納入標準：（1）新生兒胎齡＜37 w；（2）生后 24 h 內入住 NICU。排除標準：（1）合并先天性發育畸形者；（2）雙胎、多胎兒；（3）合并其他感染性疾病者；（4）未能采集合格血標本者。共納入232例，男129例，女103例，胎齡 27+5～36+6w，出生體質量 968～2959 g。

1.2 EOS診斷標準 參照 《實用新生兒學（第3版）》中EOS相關診斷標準[7]：發生于出生后72 h內，同時滿足以下（1）、（2）中任一項：（1）確診敗血癥：有典型癥狀表現，且與以下任一項相符：①血培養明確提示存在致病原；②若血培養顯示有機會致病菌，則須與另份血培養顯示的致病菌相同。（2）臨床診斷敗血癥：有典型癥狀表現，同時外周血檢查滿足≥2 項：WBC＜5×109/L 或＞25×109/L，桿狀粒細胞與中性粒細胞之比值≥0.16，微量血沉≥5 mm/h，CRP≥8 μg/ml，血小板計數＜100×109/L。

1.3 檢測指標 胎兒娩出后，立即夾閉臍帶兩端，抽取2～3 ml臍動脈血；并于早產兒生后72 h內，采集2 ml外周靜脈血。確診EOS的早產兒，在采取有效抗感染治療10～14 d后，再抽取2 ml外周靜脈血。血標本放置于促凝管，靜置30 min，3000 r/min離心5 min分離血清，-80℃保存。以ELISA法檢測VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6 水平，試劑盒均由中國艾萊生物科技有限公司提供。

1.4 統計學方法 應用SPSS21.0統計軟件分析，計量資料以均數±標準差表示，組間比較行t檢驗；計數資料以頻數和百分率表示，行χ2檢驗；采用受試者工作曲線（ROC）分析不同指標對EOS的診斷效能；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 EOS患病情況 232例早產兒中，100例診斷為 EOS（EOS 組），132 例為非 EOS（對照組），兩組一般資料比較無顯著差異（P＞0.05，表1）。

表1 兩組一般資料比較

2.2 兩組臍血標志物比較 EOS組臍血VDBP與25-(OH)D水平低于對照組，PCT與IL-6水平高于對照組（P＜ 0.05，表 2）。

2.3 兩組靜脈血標志物比較 EOS組出生后72 h及抗感染治療后，靜脈血VDBP與25-(OH)D水平均低于對照組，PCT和IL-6水平高于對照組。EOS組抗感染治療后，靜脈血VDBP與25-(OH)D水平高于出生后72 h時，PCT與IL-6水平低于出生后72 h時（P＜ 0.05，表 3）。

2.4 臍血 VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6預測 EOS的ROC曲線分析 繪制臍血 VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6預測EOS的ROC曲線，得到的曲線下面積及最佳診斷臨界值及相應敏感度，見表4。

表2 兩組臍血VDBP、25-（OH）D、PCT、IL-6水平比較

表3 兩組靜脈血VDBP、25-（OH）D、PCT、IL-6水平比較

表4 臍血VDBP、25-（OH）D、PCT、lL-6預測EOS的ROC曲線分析結果

3 討論

尋找早期診斷EOS的理想指標有著重要意義。近年研究發現，IL-6、PCT在EOS診斷中表現出優越診斷價值[8-9]。IL-6作為典型的促炎因子，正常生理狀態下，機體IL-6水平極低，當病原菌感染后可出現迅速增高，是反映早期感染的重要指標。PCT是一種無活性的降鈣前肽物質，在健康人血清中水平很低，亦是臨床常用的感染指標。本研究結果顯示，EOS組較對照組臍血及血清IL-6、PCT水平均明顯增高，且EOS組經有效抗感染治療后，血清IL-6、PCT水平明顯降低，證實IL-6、PCT可作為早產兒EOS早期診斷及療效評價的血清指標。

25-(OH)D是人體血循環中維生素D的主要形式，其半衰期長，穩定性良好，能夠很好地反映機體VD水平。25-(OH)D可調節免疫功能，通過激發中性粒細胞、T淋巴細胞等活動，而激發對細菌、真菌的免疫反應，還具有炎癥調節作用[10]。新生兒臍血25-(OH)D由胎盤營養供應，其水平與胎齡無關[11]。VDBP是一種主要由肝臟產生的糖基化α-球蛋白，具有結合、轉運循環中VD作用。而VDBP在敗血癥發生時，通過調控巨噬細胞、促進中性粒細胞趨化等多種作用，參與免疫炎癥反應，還能夠通過與血漿內毒素相結合而減輕機體損害[12]。研究表明，血清25-(OH)D及VDBP水平隨著感染程度加重而下降[13]。敗血癥危重癥患者較無敗血癥危重癥患者血清25-(OH)D、VDBP均明顯降低，且與不良預后相關[14]。還有研究顯示，與健康新生兒相比，EOS新生兒臍血25-(OH)D、VDBP均明顯降低[15]。本研究也證實，EOS組臍血25-(OH)D、VDBP均明顯低于對照組，提示EOS早產兒臍血25-(OH)D、VDBP水平可作為早期預測EOS的重要指標。本研究還發現，EOS組出生后72 h時血清25-(OH)D、VDBP水平相較于對照組明顯降低；而經有效抗感染治療后，EOS組血清25-(OH)D、VDBP水平明顯增高，可見提示此兩者亦可用于評估EOS療效。

進一步采用ROC曲線分析臍血VDBP、25-(OH)D、PCT、IL-6預測EOS的臨床價值，結果顯示，4種指標的曲線下面積分別為 0.784、0803、0.836、0.851，提示這4個指標均對預測早產兒EOS有較高價值。且PCT、IL-6曲線下面積大于25-(OH)D、VDBP，提示在診斷早產兒EOS上，臍血PCT、IL-6應用價值可能略優于25-(OH)D、VDBP。但有研究表明，臍血PCT、IL-6水平可由胎膜早破、低氧血癥等非感染性疾病的影響而出現增高[16]。而目前尚未見25-(OH)D、VDBP水平受非感染因素影響而變化的報道，提示25-(OH)D、VDBP可能更加可靠，有待進一步研究確定。

綜上所述，VDBP、25-(OH)D在EOS早產兒臍血明顯降低，可用于早產兒EOS早期診斷及療效評價的新指標，但它們與PCT、IL-6之間是否存在優勢仍有待探討。