玉木耳液體菌種配方研究

劉孝利 李曉博 趙敬聰 王振利 李 曉

（1山東省科創(chuàng)食用菌產(chǎn)業(yè)技術(shù)研究院，山東鄒城273500；2山東福禾菌業(yè)科技有限公司，山東鄒城273500）

玉木耳是李玉院士團(tuán)隊在白色毛木耳變種的基礎(chǔ)上多孢自交選育出的優(yōu)質(zhì)高產(chǎn)菌株，在分類上與李麗嘉和劉波在我國西沙群島發(fā)現(xiàn)的白色木耳相似，命名為象牙白木耳（Auricularia eburnean）[1]。目前玉木耳近似種在臺灣、福建、山東、河北等地均有少量栽培，名稱包括白木耳、銀白木耳、雪耳、白玉耳、白玉木耳、白毛木耳等[2]。玉木耳味道鮮美，營養(yǎng)豐富，含有豐富的蛋白質(zhì)、多糖、膳食纖維和不飽和脂肪酸，且具有抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)和抗氧化等作用[3]，是一個極具開發(fā)潛力的食用菌品種。國內(nèi)只有少量的關(guān)于毛木耳液體菌種的研究，筆者進(jìn)行玉木耳液體菌種配方培養(yǎng)基試驗，為玉木耳液體菌種培養(yǎng)提供參考。

1 材料與方法

1.1 供試菌株

玉木耳菌株（玉木耳1號）由吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)食藥用菌教育部工程研究中心提供。

1.2 試驗方法

1.2.1 母種擴(kuò)繁

母種培養(yǎng)基為PDA。配方：土豆200 g，葡萄糖20 g，瓊脂20 g，水1000 mL。分裝后，經(jīng)121℃滅菌30 min后，待溫度降至45℃擺斜面，冷卻后接種。接種后在23℃恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，菌絲長滿管后備用。

1.2.2 搖瓶液體菌種培養(yǎng)

搖瓶液體培養(yǎng)基配方：土豆300 g，葡萄糖20 g，蛋白胨2 g，磷酸二氫鉀2 g，硫酸鎂1 g，水1000 mL。用1000 mL搖瓶分裝，每瓶裝液量為600 mL，用棉塞封口，并用鋁箔紙包緊瓶口后滅菌，在121℃下滅菌35 min。滅菌完成后冷卻至室溫即可接種。接種量為每瓶6小塊菌種，接種后靜止24 h，隨后在23℃的恒溫?fù)u床上培養(yǎng)，轉(zhuǎn)速為170 r/min，7～8 d后可使用。液體菌種以菌球一致，菌液清澈不渾濁，靜止10 min后分層小于5 mm，表面只有少量泡沫為好。

1.2.3 發(fā)酵罐液體菌種配方篩選

經(jīng)初步試驗，確定玉木耳液體菌種的基礎(chǔ)配方為：豆粉 3 kg，玉米粉 3 kg，蔗糖 5 kg，葡萄糖 5 kg，KH2PO41.0 kg，MgSO40.5 kg。試驗發(fā)酵罐容量為1000 L，裝液量800 L，控制液體培養(yǎng)基濃度在2%～2.5%，調(diào)整豆粉、玉米粉、蔗糖和葡萄糖添加量，共設(shè)置7組配方，以配方4作為對照組。詳細(xì)配方見表1。每個試驗配方3次重復(fù)。試驗使用同一批次原料，準(zhǔn)確按配方稱量，經(jīng)配料、加料、滅菌、冷卻后備用。

表1 供試玉木耳液體菌種配方 kg

1.2.4 發(fā)酵罐接種及培養(yǎng)

液體菌種按無菌操作接種于冷卻的發(fā)酵罐中，接種量為600 mL，培養(yǎng)溫度為23℃，通過調(diào)壓閥控制通氣量一致。培養(yǎng)48 h和72 h取樣檢測是否污染，總培養(yǎng)時間為96 h。

1.2.5 觀察與統(tǒng)計

待培養(yǎng)96 h后，取樣測定每100 mL菌絲干重，菌球大小、pH，觀察菌球一致性、菌球顏色。取三次重復(fù)數(shù)據(jù)的平均值，異常數(shù)據(jù)不計。

2 結(jié)果與分析

試驗結(jié)果見表2。

表2 發(fā)酵罐液體菌種配方培養(yǎng)結(jié)果

菌絲干重是評價液體菌種質(zhì)量優(yōu)劣的主要標(biāo)準(zhǔn)，其次是菌球一致性、pH、菌球顏色等。由表2可知，菌絲干重由大到小的順序是配方3＞配方4＞配方2＞配方5＞配方1＞配方6＞配方7，配方3菌絲干重最大，為0.85 g/100 mL，其次是配方4，為0.80 g/100 mL；菌球大小一致性最好的是配方3和配方4，最差的是配方7；pH和菌球顏色在各個配方中均無較大差異。綜上所述，供試配方中最優(yōu)配方是配方3，其次是配方4。

3 小結(jié)

玉木耳需求量隨著玉木耳市場逐步打開會不斷上升，玉木耳生產(chǎn)量也會提高。在大規(guī)模生產(chǎn)中，液體菌種較固體菌種優(yōu)勢極為明顯，雖然一次性投入成本高，但平均生產(chǎn)成本低，占地面積小，穩(wěn)定性好，發(fā)菌快且污染率低，是未來玉木耳菌種發(fā)展的必然趨勢。