銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗生素的耐藥性分析

郭曉芳

(河南省直屬機關第一門診部藥劑科，河南 鄭州 450000)

革蘭陰性細菌是醫院感染的主要菌株，其中銅綠假單胞菌最為常見。近年來隨著抗菌藥物的廣泛應用，抗菌藥物的耐藥性越來越明顯，為細菌性感染的治療帶來巨大困難，已經成為臨床工作的重點與難點[1]。目前，我國臨床應用的抗菌藥物種類以第三代頭孢菌素最為常見，但是隨著抗菌藥物的廣泛使用，細菌會產生多種內酰胺酶，內酰胺酶中所含的ESBLs會抑制第三代和第四代頭孢菌素內酰胺類抗生素的抗菌作用，提高細菌的耐藥性[2]。銅綠假單胞是臨床中常見的革蘭陰性細菌之一[3]，尤其在ICU、呼吸科、兒科中非常常見，銅綠假單胞菌會使機體菌群失調，為銅綠假單胞菌的生長與繁殖創造了良好的條件，同時能夠引起多系統、多臟器、多部位感染。為更好地掌握抗菌藥物臨床使用及耐藥性，選取2017年1月至2017年12月期間我院微生物室分離出的131株頭孢他啶耐藥(MIC≥16 μg·ml-1)銅綠假單胞菌作為研究對象，分析銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗生素的耐藥性，為今后臨床用藥工作提供參考，現將結果報告如下。

1 臨床資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年1月至2017年12月期間我院微生物室分離出的131株頭孢他啶耐藥(MIC≥16μg·ml-1)銅綠假單胞菌作為研究對象，菌株來源：痰液33株、膿液42株、分泌物26株、引流液13株、尿液17株。

1.2 方法

1.2.1藥敏試驗

采用K-B法進行藥敏試驗，操作按照臨床和實驗室標準化協會(2011年)相關標準進行，所有操作與藥敏結果判讀均由同一實驗室人員完成；按照CSLI/NCCLS(2005年)文件換算標準計算耐藥率。

1.2.2金屬β-內酰胺酶的檢測

采用紙片協同法進行β-內酰胺酶檢測[2]，具體如下：先將本組131株菌株制備成菌液(0.5麥氏單位)，均勻地涂布在M-H瓊脂平板(Oxoid公司)上，并將2張抗菌藥物紙片(頭孢他啶、頭孢他啶克拉維酸、頭孢噻肟、頭孢噻肟克拉維酸，美國BBL公司)貼在平皿上，紙片之間相距2 cm，在其中1張紙片上滴EDTA 5 μL，結果判斷陽性標準：含EDTA的亞胺培南紙片的抑菌圈直徑相對于亞胺培南紙片增加6 cm，即說明該菌株可以產金屬酶。

1.3 統計學方法

應用SPSS20.0軟件分析，計數資料采用百分比表示，數據對比采取χ2校驗，P<0.05，差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 β-內酰胺酶檢測與藥敏試驗結果

本組131株銅綠假單胞菌株中，共檢出產金屬β-內酰胺酶菌株28株，陽性率為21.37%。銅綠假單胞菌對頭孢曲松的耐藥率為71.76%，對慶大霉素、氨曲南、頭孢哌酮的耐藥率分別為42.75%、44.28%與49.62%，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林、頭孢吡肟以及亞胺培南的耐藥率均<40%，見表1。

表1 藥敏試驗

2.2 陽性與陰性菌株藥敏試驗結果

金屬β-內酰胺酶陽性菌株對11種抗生素的耐藥率均明顯高于金屬β-內酰胺酶陰性菌株(P<0.05)，見表2。

表2 β-內酰胺酶陽性與陰性菌株藥敏試驗結果對比(n(%))

注：與陽性組比較，*P<0.05。

3 討論

銅綠假單胞菌是一種常見的條件致病菌，能夠導致全身多臟器、多系統、多部位感染。調查顯示，老年患者與兒童患者由于體質較差，抵抗力較低，在治療期間通常導致患者體內菌群失調，微生態失衡，為銅綠假單胞菌的繁衍創造了良好條件。

銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗生素具有明顯的耐藥性，本組研究中，131株銅綠假單胞菌株中，共檢出產金屬β-內酰胺酶菌株28株，陽性率為21.37%。其中銅綠假單胞菌對頭孢曲松的耐藥率最高，其次分別為頭孢哌酮、氨曲南和慶大霉素，銅綠假單胞菌對哌拉西林/他唑巴坦、阿米卡星、頭孢哌酮/舒巴坦、頭孢他啶、左氧氟沙星、哌拉西林、頭孢吡肟以及亞胺培南的耐藥率均<40%。可以發現銅綠假單胞菌對氨基糖苷類抗菌藥物較更為敏感，可能與其產金屬β-內酰胺酶有關。因此，對于頭孢他啶耐藥的銅綠假單胞菌可以根據藥敏譜給予相應的抗菌藥物，并考慮與碳青霉烯類、氨基糖苷類等藥物聯合用藥，以提高治療效果，減少耐藥菌株產生[5-6]。

另外，研究還發現金屬β-內酰胺酶陽性菌株對11種抗生素的耐藥率均明顯高于金屬β-內酰胺酶陰性菌株，說明銅綠假單胞菌對β-內酰胺類抗菌藥物存在明顯耐藥性的主要機制為產金屬β-內酰胺酶，因此在臨床治療中要及時開展細菌培養和藥敏試驗，以促進合理用藥，避免耐藥性的發生。