慢性自發性蕁麻疹患者血清特異性IgE抗體與自體血清皮膚試驗的關系

李光芝 孫艷茹 張鳳杰 王振華

慢性自發性蕁麻疹(CSU)是皮膚科臨床常見病，具有反復發作，不易根治的特點[1]。尋找可疑過敏原是患者的必然訴求，但在平時診療工作中常規開展的過敏原檢測方法(血清特異性IgE抗體檢測)結果很難與患者實際情況相符，達不到診療需求。自體血清皮膚試驗(ASST)是檢測CSU患者是否存在自身免疫的一個主要試驗，靈敏度約為70%， 特異性為80%，且省時簡便[2-4]。本文通過分析CSU患者血清特異性IgE抗體與ASST結果的關系，以期找出臨床遇到的問題原因，并探討一種更有效的檢測方案。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2017年10月至2018年4月來我院就診的305例CSU患者，所有患者均符合《2014版中國蕁麻疹診療指南》CSU診斷標準[5]，并簽署《知情同意書》，其中男165例、女140例，年齡18～62歲，平均(31.64±9.25)歲。另選取100名體檢中心健康志愿者作為對照組，其中男56名，女44名，年齡20～61年，平均(33.30±9.50)歲。兩組年齡、性別無統計學差異(P>0.05)。

1.2 納入標準[6,7]①3天內未使用抗組胺藥物，2周未使用多塞平，4周內未使用免疫抑制劑。②能配合完成實驗者。③試驗區域無皮損損傷。

1.3 排除標準[7]①妊娠及哺乳期婦女。②患有嚴重心、肺、肝、腎、血液等重要器官系統疾病及神經、精神疾病者。③患有自身免疫性疾病如結締組織病患者。④有過敏性休克病史的患者。⑤伴有過敏性或非過敏性呼吸道疾病。

1.4 方法 用一次性采血針抽取患者肘窩靜脈外周血8 mL，分5 mL和3 mL置于2個不抗凝玻璃試管，分別用來進行血清特異性IgE 抗體檢測和ASST試驗，IgE抗體結果檢出后與患者核實是否符合實際發病情況。

1.5 血清特異性IgE抗體檢測[8]取肘窩靜脈外周血5 mL，置無菌不抗凝玻璃試管，室溫靜置30 min，3000 r/min離心15 min后，分離血清后利用歐蒙“優敏”吸入性及食入性過敏原特異性IgE抗體檢測試劑盒(德國歐蒙醫學實驗診斷股份有限公司)檢測血清樹木組合(柳樹/楊樹/榆樹，ts20)，普通豚草(w1)，艾蒿(w6)，螨蟲組合(屋塵螨/粉塵螨，ds1)，屋塵(h1)，貓(e1)，狗(e2)，蟑螂(i6)，點青霉/分枝孢霉/煙曲霉/交鏈孢霉(ms1)，啤酒花(葎草，u80)，蛋清(f1)，牛奶(f2)，花生(fl3)，大豆(fl4)，牛肉(f27)，羊肉(f88)，海魚類組合(fs33)，淡水魚組合(鮭魚/鱸魚/鯉魚，fs34)，蝦(f23)，蟹(f234)這20種變應原特異性IgE抗體水平，嚴格按照說明書步驟進行操作。結果判定：采用“EUROLineScan”軟件判讀，條帶的深淺用EAST類別0～6表示，其采用的濃度級別等同于過敏原公認的RAST(放射過敏原吸附試驗)系統。0級為<0.35 kU/L；1級為0.35～0.7 kU/L；2級為0.7～3.5 kU/L；3級為3.5～17.5 kU/L；4級為17.5～50.0 kU/L；5級為50.0～100.0 kU/L；6級為>100.0 kU/L。0 級為陰性，患者血清只要有1種特異性IgE 出現陽性即計為陽性病例。

1.6 自體血清皮膚試驗[9]取肘窩靜脈外周血3 mL，置無菌不抗凝玻璃試管，室溫孵育30 min，400～500 r/min離心10 min后取血清50 μL在肘窩下10 cm進行皮內注射，同時以等量生理鹽水在對側同時進行皮內注射，作為陰性對照。于30 min后進行觀察，以自體血清誘發的風團和紅暈與陰性對照的大小相比較來判斷反應強度。結果判定：陰性為血清側風團標準直徑小于對側5 mm或者潮紅、紅斑直徑小于對側10 mm；弱陽性(+)為風團直徑大于對側5 mm或者潮紅、紅斑大于對側10 mm；陽性(++)為風團直徑大于對側10 mm或者潮紅、紅斑直徑大于對側15 mm；強陽性(+++)為風團直徑大于對側15 mm或者潮紅、紅斑直徑大于對側20 mm。

1.7 統計學方法 應用 SPSS 24.0統計軟件進行數據分析。性別的比較采用卡方檢驗；年齡、病程的比較采用秩和檢驗；ASST陽性組和ASST陰性組螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果的差異性采用Mann-Whitney U檢驗；ASST的陽性級別與對應的螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果相關性采用spearman秩相關。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 將305例CSU患者變應原血清特異性IgE抗體檢測為陽性的過敏原與實際病情發作相關的過敏原比較，完全符合率為4.59%(14/305)，部分符合率為23.61%(72/305)，不符合率為71.80%(219/305)。在305例CSU患者中146例螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果為陽性，陽性率為47.87%，螨蟲組合結果陽性及陰性CSU患者在病程、性別、年齡分布上無統計學差異(P>0.05)。100名健康志愿者中9人(9%)變應原血清特異性IgE抗體檢測結果為陽性，與CSU患者差異有統計學意義(P<0.05)。

2.2 在305例CSU患者中177例 ASST結果為陽性，ASST總陽性率為58.03%。ASST陽性及陰性的CSU患者在性別、年齡的分布上無統計學差異(P>0.05)，但ASST陽性的CSU患者組病程為2～148個月，平均(37.36±40.73)個月，ASST陰性CSU患者組病程為2～120個月，平均(22.80±24.09)個月，兩組差異有統計學意義(P<0.05)，ASST陽性的CSU患者組病程更長(表1)。100名健康志愿者中7人(7%)ASST結果為陽性，與CSU患者有統計學差異(P<0.05)。

表1 ASST及螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果一般情況比較

注：*卡方檢驗，☆秩和檢驗

2.3 將305例CSU患者分為ASST陽性組(177例)和ASST陰性組(128例)，ASST陽性組和ASST陰性組螨蟲組合血清特異性IgE抗體陽性率分別為34.46%和66.41%，ASST陽性組對應的陽性率低(表2)。對兩組間螨蟲組合血清特異性IgE抗體結果行Mann-Whitney U檢驗結果示Z值為-5.221、P<0.05，兩者存在統計學差異。

2.4 在ASST陽性組中，對ASST的陽性級別與對應的螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果行相關性檢驗，結果顯示兩者呈負相關。對其他部分常見變應原的特異性IgE抗體和ASST實驗結果做相關性分析顯示，屋塵、狗、大豆、蝦也呈負相關(P<0.05)(表3)。

表2 ASST陽性組和ASST陰性組螨蟲組合血清特異性IgE抗體檢測結果 例(%)

表3 CSU患者ASST與部分常見變應原血清特異性IgE抗體檢測相關性分析

3 討論

蕁麻疹主要分為三類[10]：自發性蕁麻疹、誘發性蕁麻疹及具有蕁麻疹/血管性水腫的綜合征，其中慢性自發性蕁麻疹具有頑固性、難治性的特點，現已證明，在CSU中，有25%～45%認為自身反應性或自身免疫性蕁麻疹(AICU)，可查到Fcε R I及抗IgE功能性自身抗體。自體血清皮膚試驗(ASST)是檢測患者是否存在自身免疫的一個主要試驗，簡便有效。國內外文獻報道[7,11]，ASST陽性患者病情更重，癥狀持續時間更長，一般抗組胺藥效果欠佳。

本研究顯示CSU患者特異性變應原IgE抗體完全符合率僅為4.59%，不符合率高達71.80%，證實了目前CSU患者特異性變應原IgE抗體檢測的臨床價值有限?？紤]到慢性自發性蕁麻疹部分患者跟自身免疫有關，我們對305例CSU患者同時進行了變應原特異性IgE抗體檢測和ASST試驗，結果顯示：ASST陽性組同陰性組相比病程長、螨蟲組合抗體陽性率低；ASST的陽性級別與部分常見變應原如螨蟲組合、屋塵、狗、大豆、蝦血清特異性IgE抗體檢測結果呈不同程度的負相關，ASST陽性程度越高，IgE抗體陰性的可能性越大；反之亦然。該研究表明，自身免疫在CSU發病中具有重要作用，是不可忽視的一大因素。近年來，隨著免疫學和分子生物學的發展，關于CSU發病機制有了更多認識。除自身免疫外，嗜堿性粒細胞與肥大細胞的異常分布、Th1/Th2細胞因子失衡、凝血異常等也可能參與了CSU的發生、發展過程[12]。

黃秀英等[13]發現ASST結果和皮膚點刺試驗結果呈負相關，建議將慢性蕁麻疹(CU)分為 4種類型 ：自身免疫性CU、變態反應性CU、變態反應和自身免疫共同參與的CU、真正的特發性CU。我們通過分析ASST與血清特異性IgE抗體的相關性，發現ASST的陽性級別與部分常見變應原特異性IgE抗體檢測結果呈不同程度的負相關，與該分類相符。我們的研究從目前普遍開展的血清IgE檢測層面，進一步證實了CSU發病機制的復雜性和目前檢測手段的不準確性。

綜上，我們建議將ASST納入常規CSU臨床檢測，對CSU患者先進行ASST檢查，ASST陽性程度高的患者可以不進行血清特異性IgE抗體的檢測，ASST陽性程度低或陰性的患者可以進行血清特異性IgE抗體的檢測，以期對慢性CSU患者行更加有效的針對性的檢查，以便更好地指導臨床分型及治療，節約醫療資源。