50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑的反相高效液相色譜分析

吳航俊，俞霖潔，孫小波，吳偉東，龐雯霏，林夢佳，唐利斌

（浙江省化工研究院有限公司，浙江 杭州 310023）

0 前言

綠麥隆（Chlorotoluron），中文別名 N-（3-氯-4-甲基苯基）-N'，N'-二甲基脲，是一種低毒、高效、廣譜的的選擇性內吸傳導型麥田除草劑，多用于防除諸如看麥娘、風翦股穎、馬唐、黑麥草、早熟禾、狗尾草、野燕麥等禾本科雜草，以及繁縷、藜、蓼、莧等闊葉雜草，但對田旋花、問荊、錦葵等雜草無效。異丙隆（Isoproturon），中文別名3-對-異丙苯基-1，1-二甲基脲，可防除一年生禾本以及雙子葉雜草，如馬唐、藜、早熟禾、看麥娘等，主要用于小麥、大麥等作物，亦可用于西紅柿、馬鈴薯、育苗韭菜、甜（辣）椒、茄子、蠶豆、豌豆、蔥頭等部分菜田除草[1-2，5]。

50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑是由綠麥隆原藥、異丙隆原藥和合適的助劑、填料按一定的比例以及加工方式加工而成的防治小麥田雜草的藥劑。其分析方法未見報道，但異丙隆單劑及其它復配制劑的分析方法己有報道[2-5]。本文在已有文獻的基礎上，采用以甲醇/水的流動相體系，內裝C18鍵合固定相的不銹鋼柱作為分析柱的反相HPLC法，對試樣中綠麥隆、異丙隆兩個有效成分進行定量測定，獲得了滿意的結果。

1 實驗部分

1.1 方法提要

試樣用甲醇溶解并定容，采用以甲醇/水的流動相體系，內裝C18鍵合固定相的不銹鋼柱作為分析柱的反相HPLC法，對試樣中綠麥隆、異丙隆兩個有效成分進行分離，外標法定量。

1.2 試劑和溶液

甲醇：色譜純，通過0.5 μm孔徑油相膜過濾。

水：二次蒸餾水，通過0.5 μm孔徑水相膜過濾。

綠麥隆已知樣：含量98.8%，國家農藥質檢中心（定值）。

異丙隆已知樣：含量98.9%，國家農藥質檢中心（定值）。

50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑：江蘇省蘇科農化有限責任公司。

1.3 儀器

Dionex Ultimate 3000高效液相色譜儀：具DAD檢測器和自動進樣器，色譜處理工作站；

色譜柱：250 mm×4.6 mm （id）， 內裝 Inertsil ODS-3 C18鍵合固定相5 μm不銹鋼柱；

UV-1750紫外-可見分光光度計。

1.4 溶液配制

標準溶液：稱取25 mg綠麥隆和25 mg異丙隆標樣，分別置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，配置成綠麥隆（25 mg/50 mL）和異丙隆（25 mg/50 mL）標準溶液，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

混合標準溶液：稱取25 mg綠麥隆標樣和25 mg異丙隆標樣，置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，配置成綠麥隆（25 mg/50 mL）、異丙隆（25 mg/50 mL）的混合標準溶液，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

樣品溶液：稱取約0.1 g樣品（約含25 mg綠麥隆和25 mg異丙隆），置于50 mL容量瓶中，用甲醇溶解稀釋，冷卻至室溫并定容，充分搖勻，用0.45 μm微孔濾膜過濾后待用。

1.5 色譜條件

色譜柱：250 mm×4.6 mm （id）Inertsil ODS-3 C18鍵合固定相5 μm不銹鋼柱；柱溫：35℃；檢測波長：245 nm；流動相：甲醇+水=60+40；流速：1.0 mL/min；進樣量：5 μL。

1.6 測定步驟

1.6.1 測定

在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后連續(xù)注入數針標準溶液，直至相鄰2針的峰面積小于1.5%時，按標準溶液、試樣溶液、試樣溶液、標準溶液的順序進行測定。

1.6.2 計算

將測得的2針試樣溶液以及試樣溶液前后2針標樣溶液中綠麥隆（或異丙隆）的峰面積分別進行平均。試樣中綠麥隆（或異丙隆）的質量分數X%按下式計算：

式中：

A1——2針標樣溶液中綠麥隆（或異丙隆）峰面積的平均值；

A2——2針試樣溶液中綠麥隆（或異丙隆）峰面積的平均值；

m1——標樣的質量，g；

m2——試樣的質量，g；

p——標樣中綠麥隆（或異丙隆）的質量分數，%；

f——標樣溶液的稀釋比例，本文所述方法無稀釋步驟，故綠麥隆、異丙隆均為1。

2 結果與討論

2.1 檢測波長的選擇

采用紫外-可見分光光度計對1.4中配置的標樣溶液進行光譜掃描，獲得兩者的紫外光譜圖。如圖1所示，實線為綠麥隆的紫外吸收曲線，虛線為異丙隆的紫外吸收曲線，由圖1可知，綠麥隆在212 nm和246 nm處有較大吸收，異丙隆在204 nm和244 nm處有較大吸收。經過實驗比較，選擇245 nm作為檢測波長，在此波長下峰形良好，綠麥隆和異丙隆吸收比例相當，無雜質影響。

圖1 綠麥隆和異丙隆的紫外吸收光譜圖

2.2 流動相的選擇

綠麥隆、異丙隆兩者結構相近，采用乙腈/水體系作為流動相對試樣進行檢測時，發(fā)現綠麥隆和異丙隆的液相色譜圖主峰相互重疊、較難分離，因此采用分離度更好的甲醇作為流動相。經多次配比實驗，最終確定流動相為甲醇∶水=60∶40，流速1.0 mL/min，綠麥隆和異丙隆兩組分能得到較好的分離，如圖2所示，峰型對稱、尖銳，基線平穩(wěn)，綠麥隆保留時間約為7.3 min，異丙隆保留時間約為8.2 min，綠麥隆峰寬為0.136 min，異丙隆峰寬為0.153 min，分離度為6。

圖2 綠麥隆和異丙隆混合標準溶液的液相色譜圖

2.3 線性關系

在1.5所述液相色譜操作條件下，調節(jié)混合標準溶液的進樣體積分別為：2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10 μL，依次進行測定，以濃度為橫坐標，綠麥隆（異丙隆）峰面積為縱坐標，制作出對應的峰面積/濃度關系圖，線性擬合后得到圖3。綠麥隆線性回歸方程為y=68.6146x+2.5617（R=0.9998，n=5），異丙隆線性回歸方程為y=72.4603x+1.9236（R=0.9999，n=5）。結果表明，該檢測方法在測定濃度范圍內呈現良好的線性關系。

圖3 綠麥隆和異丙隆的線性關系圖

2.4 準確性

稱取5批次50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑樣品，分別準確加入一定量的標樣，根據稱取樣品量和加入標樣量計算出綠麥隆和異丙隆的理論含量進行分析，得到綠麥隆和異丙隆的實際含量，算出綠麥隆回收率在98.89%～99.21%之間，平均回收率為99.05%，異丙隆回收率在98.81%～99.20%之間，平均回收率為99.07%，均滿足定量分析要求，結果見表1。

表1 準確度實驗

2.5 精確度

稱取50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑樣品，按照1.5方法重復測定5次綠麥隆、異丙隆的質量分數，分別獲得綠麥隆和異丙隆的標準偏差以及變異系數，結果見表2。

表2 精確度實驗

3 結論

試驗結果表明，本文所建立的分析方法可以有效地進行50%綠麥隆·異丙隆可濕性粉劑的檢測和分析，具有操作簡單快速、定量準確、線性關系良好、重復性好等特點，能滿足產品質量的分析要求。