快速檢測法在蔬菜農藥殘留含量調查分析中的應用

李葉青 ，皮小弟，王 森，張 婕，羅櫻桃，鄧桂美

（1.河源職業技術學院機電工程學院，廣東 河源 517000；2.廣東省河源市質量計量監督檢測所，廣東 河源 517000）

農藥，對于防治病蟲害、去除雜草、調節農作物生長具有重要作用。中國農產品生產企業數量多、規模小而且分散，生產者法律意識比較弱，從業人口眾多，構成了農藥殘留安全問題多發并將在較長時期內持續存在[1]。

目前，農藥殘留監測分析報道較多[2-5]，蔬菜中農藥殘留的分析檢測方法主要集中在氣相色譜法[6]、高效液相色譜法[7]、氣/液相色譜-質譜聯用法[8-9]等。農藥殘留的檢測方法主要有2種，即色譜法和快速檢測法。色譜法是定量分析方法，可作為執法依據，但是檢測儀器投資大，檢測能力要求高，而且檢測周期較長；快速檢測法是定性分析方法，主要針對有機磷和氨基甲酸酯類農藥，可對大量蔬菜樣本進行初篩，檢測樣本量大，檢測能力要求相對較低。要從根本上解決蔬菜農藥殘留安全問題，就必須對蔬菜生產、流通全過程實施全程管理和監控，而實驗室檢測方法和儀器是很難及時、快速而全面地從各環節監控食品安全狀況，這就需要大量能夠滿足這一要求的快速、方便、準確、靈敏的食品安全分析快速檢測技術。簡單高效、低成本的農藥殘留快速檢測方法和技術非常重要[10]，特別適合蔬菜生產基地、批發市場、農貿市場和農產品檢測部門的初篩。2015年新《食品安全法》頒布，賦予快速檢測方法一定程度上的法律效力。食品安全快速檢測技術是食品安全保障的重要支撐。

本研究采用農藥殘留快速檢測法（以下簡稱快檢），調查河源市區內夏秋季常見蔬菜農藥殘留情況，并對快檢農殘超標蔬菜進行色譜儀器復檢，來驗證快檢方法的適用性和準確性；總結河源市常見蔬菜的總體農藥殘留情況，并獲得蔬菜農藥殘留超標與蔬菜種類、種植時間及售賣場所之間的關系，以期為消費者提供參考。

1 材料和方法

1.1 樣品來源

2018年7—11月，每7 d對河源市區及周邊的農貿市場、大型超市、農產品商店及蔬菜自賣農銷售的蔬菜進行1次農藥殘留的隨機檢查。主要選取各月份具有代表性的蔬菜，取樣量大致相同，其中葉菜類包括生菜、上海青、菜心，莖菜類為西芹菜，瓜菜類包括苦瓜、茄子，蔥蒜類為蒜苗。共計調查取樣數為354個；每月取樣點16個，其中農貿市場4～5個、大型超市3～4個、農產品平價超市5～6個及蔬菜自賣農2～3個。

1.2 儀器與試劑

儀器：TL-310多通道農藥殘留快速測試儀 （廣東達元食品藥品安全技術有限公司）；JJ-2002電子天平（廣州玉治儀器有限公司）；GC2010Plus配FPD檢測器（日本島津）；LC20AT配FLD檢測器（日本島津）。

農殘快速檢測試劑盒：內含底物、顯色劑、膽堿酯酶、緩沖劑（廣東達元食品藥品安全技術有限公司），與農殘速測儀配套使用。

1.3 檢測方法與判定依據

1.3.1 快速檢測技術驗證

1.3.1.1 樣品快速檢測與判定 參照GB/T 5009.199—2003《蔬菜中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留量的快速檢測》方法進行測定。

檢測操作參照儀器說明進行：選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1.0 cm×1.0 cm的碎片，取樣品1.00 g，放入燒杯或提取瓶中，加入 5 mL緩沖溶液，振蕩 1～2 min，倒出提取液，靜置 3～5 min，待用；然后進行對照溶液測試，先于試管中加入 2.5 mL緩沖溶液，再加入0.l mL酶液、0.1 mL顯色劑，搖勻后于37 ℃放置15 min以上（每批樣品的控制時間要求一致）。 加入0.l mL各項底物搖勻，此時檢液開始顯色反應，應立即放入儀器比色池中，記錄反應 3 min的吸光度變化值；再對待測樣液進行測試，先于試管中加入 2.5 mL樣品提取液，其他操作與對照溶液測試相同，記錄反應 3 min的吸光度變化值。

結果判定：初次檢測抑制率＜50%的樣品，為合格樣品；初次檢測抑制率≥50%的樣品，需重復檢測 5 次以上，抑制率≥50%的重現性≥80%的判定為不合格樣品；重現性＜80%的判定為合格樣品。

1.3.1.2 樣品復檢與判定 快檢超標樣品按照NY/T 761—2008《蔬菜和水果中有機磷、有機氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農藥多殘留的測定》復檢。

有機磷農藥前處理具體操作步驟：待測樣制備，準確稱取25.0 g試樣于勻漿機中，加入50.0 mL乙腈，高速勻漿2 min后用濾紙過濾，將濾液倒入裝有5～7 g氯化鈉的具塞量筒中，收集濾液40～50 mL，蓋上塞子，劇烈震蕩1 min，室溫下靜置30 min。從量筒中吸取10.00 mL乙腈溶液于刻度試管中，80 ℃氮吹至近干，加入丙酮溶解并定容至5 mL，若有需要用有機濾膜過濾，待測。

氨基甲酸酯類農藥前處理操作步驟：從待測樣品制備→80 ℃氮吹至近干與有機磷農藥前處理步驟相同，再加入2.0 mL甲醇＋二氯甲烷（體積比為1∶99），過固相萃取氨基柱，分2次收集甲醇＋二氯甲烷（體積比為1∶99）濾液5 mL，50 ℃氮吹至近干，用甲醇溶解定容至5 mL，若有需要用有機濾膜過濾，待測。

測定條件依照NY/T 761—2008所示有機磷氣相色譜-FPD檢測，氨基甲酸酯類液相色譜柱后衍生FLD檢測，并按照GB 2763—2016《食品安全國家標準 食品中農藥最大殘留限量》進行結果判定。

有機磷農藥主要檢測：甲胺磷、乙酰甲胺磷、甲拌磷、對硫磷、甲基對硫磷、樂果、氧樂果、敵百蟲、敵敵畏、內吸磷、馬拉硫磷、殺螟硫磷和水胺硫磷13種；氨基甲酸酯類農藥主要檢測：涕滅威亞砜、涕滅威砜、滅多威、3-羥基克百威、涕滅威、克百威、甲萘威、異丙威8種。

1.3.1.3 樣品快檢假陽性與判定 一些蔬菜中含有對酶有抑制作用的植物次生物質，其能起到抑制快檢試劑盒酶活性的作用，使測定結果偏高，也使得快檢判定為農藥殘留超標；快檢超標樣品通過色譜儀器復檢，判定為農藥殘留未超標，這樣的樣品為快檢假陽性樣品。

快檢假陽性率計算公式為：X＝a/b×100%，

式中：X 快檢假陽性率；a為某一快檢農殘超標樣品經色譜儀器復檢判定農殘未超標數；b為某一樣品快檢農殘超標數。

1.3.2 蔬菜農藥殘留情況分析

根據快檢與復檢檢測結果對河源市2018年夏秋季市售蔬菜農藥殘留實際情況進行分析，并從不同蔬菜種類、不同月份（7—11月）、不同取樣點3個角度分析蔬菜農藥殘留超標與蔬菜種類、種植時間及售賣場所之間的關系。

1.4 數據處理

利用Excel對采集數據進行統計分析。

2 結果與分析

2.1 蔬菜農藥殘留快速檢測技術的準確性

快檢共檢測蔬菜樣品354個，43個超標，超標率為12.15%。僅蒜苗和西芹菜出現假陽性，假陽性率分別為90.48%（19/21）和75.00%（3/4）。

從不同種類蔬菜農藥殘留檢測結果來看（表1）：葉菜類162個樣品中超標8個，快檢超標率為4.94%，假陽性率為0.00%；莖菜類40個樣品中超標4個，快檢超標率為10.00%，假陽性率為75.00%；瓜菜類102個樣品中超標10個，快檢超標率為9.80%，假陽性率為0.00%；蔥蒜類50個樣品中超標21個，快檢超標率為42.00%，假陽性率為90.48%。由于莖菜類（西芹菜）葉綠素含量較高，蔥蒜類（蒜苗）含有特定次生物質，其出現快檢假陽性率高。

綜合以上來看，對于葉菜類和瓜菜類，本調查研究中使用的酶抑制率測定農藥殘留的快檢方法是適用的；而對于莖菜類和蔥蒜類，由于樣品只涉及西芹菜和蒜苗，只能說明本試驗酶抑制率測定農藥殘留方法不適合西芹菜和蒜苗的測定或方法有待改進。

2.2 河源市夏秋季蔬菜農藥殘留實際情況分析

在354個蔬菜樣品中，蔬菜農藥殘留總檢出率為93.50%，實際超標率為5.93%。

2.2.1 不同蔬菜種類實際農藥殘留情況

由表2可知，不同種類蔬菜的農藥殘留量不同，檢出率高低順序為莖菜類（97.50%）＞瓜菜類（96.08%）＞蔥蒜類（96.00%）＞葉菜類（90.12%）；超標率高低順序為瓜菜類（9.80%）＞葉菜類（4.94%）＞蔥蒜類（4.00%）＞莖菜類（2.50%）。

瓜菜類蔬菜農藥殘留檢出率高于其他種類的主要原因可能與季節有關，調查期間為瓜類蔬菜盛產期，農藥直接噴灑在瓜果表面，容易吸收，且此時期瓜果生長較快，用藥與上市可能未達到安全間隔期，導致瓜菜類蔬菜附著的農藥相對較多。

表1 不同蔬菜種類農藥殘留快檢與復檢檢測結果

表2 不同蔬菜種類實際農藥殘留檢測結果

2.2.2 各月份蔬菜實際農藥殘留情況

由表3可知，5個月的蔬菜農藥殘留檢出率分別為77.27%、97.37%、93.96%、97.30%和96.34%，超標率分別為0.00%、0.00%、3.45%、2.70%和18.29%，實際合格率分別為 100.00%、100.00%、96.55%、97.30%、81.71%，合格率以11月份最低。綜合分析，可能是種植時期菜農施藥次數增多，用藥量加大，導致蔬菜中農藥殘留檢出率高，超標嚴重[11]。

2.2.3 不同取樣點蔬菜實際農藥殘留情況

表4為不同取樣點的蔬菜農藥殘留檢出情況，檢測結果表明蔬菜的來源不同，農藥殘留超標率有很大不同，檢出率大小順序為大型超市（100.00%）＞農貿市場（93.87%）＞農產品商店（91.00%）＞蔬菜自賣農（90.91%）；超標率大小排序為農產品商店（12.00%）＞ 蔬菜自賣農（9.09%）＞農貿市場（3.57%）＞大型超市（0.00%）。

可見，大型超市的蔬菜農藥殘留超標率最低，主要是因為大型超市配置農產品快檢室，蔬菜的來貨渠道監管較嚴；農貿市場稍高于大型超市，在于其快檢制度還不夠完善；大部分農產品商店與蔬菜自賣農相似，農藥殘留超標率較高，在于其均自產自銷，自我約束力較低。

3 結論與討論

此次調查分析，應用快檢法共檢測蔬菜樣品354個，43個超標。色譜儀器復檢快檢超標樣，僅蒜苗和西芹菜出現假陽性，假陽性率分別為90.48%（19/21）和75.00%（3/4），其余蔬菜農藥殘留快檢結果準確。農藥殘留快檢總檢出率93.50%（331/354），快檢總超標率12.15%（43/354），實際總超標率5.93%（21/354）。市售蔬菜中存在農藥檢出及超標現象：從不同種類來看，莖菜類農殘檢出率最高（97.50%），瓜菜類農殘超標率最高，為9.80%；7—11月中，8月蔬菜農殘檢出率最高（97.37%），11月蔬菜農殘超標率最高，為18.29%；從不同取樣點來看，大型超市檢出率最高（100.00%），農產品商店超標率最高，為12.00%。除部分蔬菜種類（如蒜苗、西芹菜等），快檢結果快速且準確。

表3 不同月份實際農藥殘留檢測結果

表4 不同取樣點蔬菜實際農藥殘留檢測結果

膽堿酯酶的特異性等因素使得農藥殘留酶抑制率快速檢測法存在一些不足之處，且使該方法的應用在一定程度上受到限制[12]；但是該方法可以解決因實驗室的設備有限、樣品檢測數量有限、樣品檢測費用較高而無法解決的問題，在規避風險前提下特別適合蔬菜生產基地、批發市場、農貿市場和農產品檢測部門的初篩。

市售蔬菜中存在農藥超標現象。為解決蔬菜中農藥殘留問題，政府相關主管部門需建立并完善隨機抽檢機制[13]，從田間到市場再到餐桌全過程監管，促使蔬菜生產經營者科學合理使用農藥，確保蔬菜食用安全。