瞿曉林 李瑩姍 吳皓玄 曾 豪 李宗英 龔政華
湖南中醫(yī)藥高等專科學校,湖南省株洲市 412012
冠狀動脈缺血引起的缺血性心臟病,是心血管系統(tǒng)疾病的主要死亡原因。隨著人口老齡化和生活方式的改變,缺血性心臟病的發(fā)病率不斷上升,是心血管疾病死亡的重要原因,是嚴重危害人民健康的常見病,也是中國成年人心臟病住院和死亡的第1位原因,其發(fā)病率和死亡率依然呈上升趨勢[1]。
在臨床上,治療缺血性心臟病的方法有藥物治療、手術治療、針灸治療等。周瑋等[2]通過針刺膻中、膈俞、心俞、內關等穴觀察針刺對冠心病、心絞痛的臨床療效,結果發(fā)現(xiàn)針刺膻中等穴位對治療冠心病心絞痛有較好的臨床療效。內關穴是八脈交匯穴之一,通于陰維脈,屬于手厥陰心包經的絡穴,與心臟密切相關。主治心痛、胸悶、心悸、心煩、癲狂等病癥。長期以來內關穴一直是治療胸痹的首選穴。現(xiàn)代醫(yī)學也證實內關穴對心血管系統(tǒng)有特異的生理效應和治療作用[3]。膻中穴,心包募穴,八會穴之氣會,屬于任脈。在胸部,當前正中線上,平第4肋間隙,兩乳頭連線的中點,連于心系,主治咳嗽、氣喘、胸痹、胸痛等。《千金方》日:“胸痹心痛,灸膻中百壯”[4]。
相關文獻證明膻中穴對胸痹有一定的防治作用,但使用不同頻率電針刺激內關穴配伍膻中穴對家兔急性心肌缺血模型影響的研究很少,特別是從生理功能方法的角度觀察的較少。本研究嘗試在實驗性急性心肌缺血的動物模型上,采用生理功能的方法,觀察不同頻率電針預處理膻中、內關穴對家兔急性心肌缺血時心臟功能活動的影響,分析其是否對家兔急性心肌缺血有保護作用。
1.1 主要儀器及藥品 BL-420F生物機能實驗系統(tǒng)、PT-100生物血壓傳感器、HX-101E小動物呼吸機(成都泰盟有限公司生產)、DS-781SS防水電子秤(上海勤酬實業(yè)有限公司)、達佳牌G6805-D六路輸出電針儀(廣州康邁醫(yī)療器械有限公司),華佗牌無菌針灸針0.35mm×25mm毫針(蘇州醫(yī)療用品廠有限公司),批號170410。氨基甲酸乙酯(上海展云化工有限公司)批號171015,0.9%氯化鈉注射液(安徽雙鶴藥業(yè)有限責任公司)批號171110,肝素鈉注射液(天津生物化學制藥有限公司)批號180301,75%乙醇(山東利爾康醫(yī)療器械有限公司)批號171210。
1.2 實驗動物及分組 由湖南株洲種養(yǎng)殖有限公司提供的健康成年新西蘭兔40只,雌兔20只,雄兔20只,體重2.0~2.5kg。將心電圖異常者剔除,心電圖正常者在動物飼養(yǎng)房飼養(yǎng)7d后即開始實驗。各組家兔飼養(yǎng)于同等條件下:室內溫度(25±1)℃,相對濕度(55±5)%,自由進食、飲水。按照《衛(wèi)生統(tǒng)計學》隨機數(shù)字表隨機將家兔分五組,分別是空白對照組、模型對照組、高頻組(100Hz)、中頻組(50Hz)、低頻組(2Hz),每組8只。
1.3 取穴及針刺方法 空白對照組和模型對照組不進行電針膻中、內關穴的預處理,高、中、低頻組每天上午9時左右分別給予100Hz、50Hz、2Hz電針膻中、內關穴,電壓均為3V,40min/次,共14d。參照華興邦等制定的實驗動物穴位圖譜取穴,內關穴位于兔前肢腹面的尺骨與橈骨之間,距腕關節(jié)約1.2cm處,膻中穴在兔胸部,前正中線平對第4肋間隙。將家兔仰臥于手術臺上,內關穴及膻中穴均用消毒后的毫針直刺0.2~0.3cm。將電針儀負極接內關穴及膻中穴,正極接內踝,可見家兔肢體與電針頻率一致的顫動。
1.4 測量左心室收縮壓、左心室舒張末壓及心肌缺血模型制備方法 除空白對照組外,模型對照組、低頻組、中頻組及高頻組的家兔均制備心肌缺血模型,其中低頻組、中頻組及高頻組家兔均在最后一次電針2h后制備心肌缺血模型,模型對照組同時間段制備心肌缺血模型。心肌缺血模型制備方法:捉取新西蘭兔,稱重,根據(jù)體重由耳緣靜脈注射30%氨基甲酸乙酯溶液3ml/kg麻醉并仰臥位固定為手術臺上。將BL-420F系統(tǒng)中的心電圖白色電極線插入兔右上肢皮下,紅色電極線插入左下肢皮下,黑色電極線插入右下肢皮下,記錄Ⅱ導聯(lián)心電圖。氣管及左心室插管,切開家兔頸部正中皮膚、筋膜、肌肉層做一4cm左右切口,分離一側頸總動脈和氣管,氣管切開并插管,插管末端連接小動物呼吸機,呼吸比為5∶4。頸總動脈插管內注滿肝素鈉溶液,外涂抹石蠟油以潤滑插管,通過頸動脈緩緩插入左心室,邊插邊觀察血壓曲線,曲線突然變寬變大,且最小值接近0mmHg(1mmHg=0.133kPa)時說明導管進入左心室。心肌缺血模型制備,在家兔胸部左側第3肋間隙開胸,剪開心包膜,找到冠狀動脈的左心室支,下方穿一零號手術絲線并扎結,阻斷冠狀動脈血液,造成相應心肌組織缺血,以心電圖T波高聳及ST段移位為模型復制成功。
1.5 觀察指標 觀察不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對家兔急性心肌缺血時心率、左心室收縮壓、左心室舒張末壓在10s、1min、5min、10min、30min時間段的變化,并比較組間差異。
1.6 統(tǒng)計學方法 所得數(shù)據(jù)用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行分析處理,計量資料以均數(shù)±標準差表示。各組間均數(shù)比較用單因素方差分析,組間均數(shù)的兩兩比較用LSD法,P<0.05時差異有統(tǒng)計學意義。
2.1 不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對急性心肌缺血家兔心率的影響 制備心肌缺血病理模型后,各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時間段心率的變化,其中模型對照組家兔心率均下降,說明心臟功能受損,低頻電針組與模型組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),提示低頻電針預處理對心率無顯著改善作用。中頻、高頻電針組與模型組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示中頻、高頻電針預處理對心率有顯著改善作用。見表1。

表1不同頻率電針“膻中”“內關”穴對家兔急性心肌缺血心率的影響次/min)
注:*與正常組比較,P<0.05;△與模型組比較,P<0.05。
2.2 不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對急性心肌缺血家兔左心室收縮壓的影響 制備心肌缺血病理模型后,各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時間段左心室收縮壓的變化,其中模型對照組家兔左心室收縮壓均下降,說明心臟收縮功能受損,低頻電針組與模型組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),提示低頻電針預處理對左心室收縮壓無顯著改善作用。中頻、高頻電針組與模型組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示中頻、高頻電針預處理對左心室收縮壓有顯著改善作用。見表2。

表2不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對家兔急性心肌缺血左心室收縮壓的影響
注:*與正常組比較,P<0.05;△與模型組比較,P<0.05。
2.3 不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對急性心肌缺血家兔左心室舒張末壓的影響 制備心肌缺血病理模型后,各組家兔在10s、1min、5min、10min、30min時間段左心室舒張末壓的變化,其中模型對照組家兔左心室舒張末壓均升高,說明心臟舒張功能受損,低頻、中頻組與模型組比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),提示低頻、中頻電針預處理對左心室舒張末壓無顯著改善作用。高頻電針組與模型組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),提示高頻電針預處理對左心室舒張末壓有顯著改善作用。見表3。

表3不同頻率電針預處理“膻中”“內關”穴對急性心肌缺血家兔左心室舒張末壓的影響
注:*與正常組比較,P<0.05;△與模型組比較,P<0.05。
冠心病是中老年常見病、多發(fā)病之一,隨著年齡增加、生活方式的改變等,發(fā)病率越來越高,嚴重危害著人民的健康。冠狀動脈疾病如動脈粥樣硬化、冠狀動脈痙攣等導致冠狀脈供給心臟血液減少或中斷,使其相應血管所支配部位的心肌缺血、壞死,進而使心臟功能下降、主要使血流動力學發(fā)生變化,如心率減慢、左心室收縮壓降低、左心室舒張末壓上升,這些都提示心臟收縮射血功能的下降。近年來,采用針灸等非藥物療法治療本病取得較好的效果,針刺心包經內關穴區(qū)等,可明顯改善缺血心臟的電活動和機械活動[5]。孫世曉等[6]研究表明電針內關穴可以改善PPI誘導家兔心臟泵血功能。本實驗在家兔急性心肌缺血的模型上,觀察不同頻率電針預處理膻中、內關穴對家兔心功能活動的影響,即心率、左心室收縮壓及左心室舒張末壓的變化,觀察不同頻率電針預處理膻中、內關穴對其是否有保護作用。研究結果表明,不同頻率電針預處理膻中、內關穴對家兔急性心肌缺血時心臟功能活動的影響有改善作用。其中高頻電針預處理膻中、內關穴能改善心臟收縮和舒張功能狀態(tài),中頻電針預處理對心臟收縮功能有改善作用,對心臟舒張功能改善作用不明顯,低頻電針預處理對心臟收縮、舒張功能影響均不明顯。因此,中頻、高頻電針預處理膻中、內關穴對家兔急性心肌缺血時心臟功能活動有改善作用,尤以高頻電針預處理改善作用更顯著。這也與臨床針灸在預防和治療急性心肌缺血的研究中得到了肯定[7]的臨床結果一致,為電針預處理膻中、內關穴防治冠心病心絞痛提供更為豐富的實驗室依據(jù),并為進一步的研究奠定基礎。