不同血小板含量血液在不同靜置時間對濃縮血小板第2次分離回收率影響分析

連曉征 陳玉燕 陳惠民

福建省泉州市中心血站 352000

依據(jù)原國家衛(wèi)生計生委所發(fā)的“關于2017年全血液安全技術核查情況通報(國衛(wèi)辦醫(yī)函[2018]346號)”中的提高手工分離血小板利用率的要求，我站從2019年7月1日起開展白膜法分離制備濃縮血小板。為探討不同血小板含量獻血者所獻血液在不同靜置時間該袋血液濃縮血小板第2次分離回收率是否差異有統(tǒng)計學意義，特別是靜置多長時間其2次分離回收率達到高值，特對80袋不同血小板含量的300ml血液在不同靜置時間第2次分離血小板回收情況進行比較，現(xiàn)報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇符合《獻血者健康檢查要求》[1]的獻血者所獻全血300ml，只有300ml血液采集流暢性及采集完成時間符合文獻[2]要求才從該袋血液留樣袋中留取血樣2ml于EDTA-K2真空管內，用Sysmex1000i全自動血細胞計數(shù)儀進行血小板計數(shù)，且血小板計數(shù)≥150×109/L的血液才用于白膜法手工分離制備成濃縮血小板。其中血小板計數(shù)在(150～250)×109/L和(251～350)×109/L的300ml血液各40袋。

1.2 隨機編號 對血小板計數(shù)在(150～250)×109/L這組40袋血液分別按順序編1、2、3…號，在隨機數(shù)字表中查得相應的數(shù)字(重復的棄去不計)賦到血袋順序編號，將所得的隨機數(shù)由小到大編秩排列，將編秩排列號在1～10、11～20、21～30、31～40歸到A、B、C、D四個組，對血小板計數(shù)在(251～350)×109/L這組40袋血液也采取相同方法分成四組。

1.3 儀器與方法 300ml血液采集完成后立即放入電子生物冷鏈運輸箱(上海向成生物科技有限公司XC-XXB35L)(22±2)℃保存不超過6h，將(22±2)℃保存血液用Heraeus6000i離心機離心15min[1 160g，(22±2)℃]，將離心好的血液安放于Sepamatic-SL(Ⅲ)全自動全血成分血分離機分離得到約80ml白膜層與血漿混合液，把該混合液輕輕混勻后于無菌接管機(902880/compodock)留取標本約2ml用Sysmex1000i全自動血細胞計數(shù)儀測量血小板含量。A、B、C、D四個組白膜層與血漿混合液每組10袋存放在離心杯內于Heraeus6000i離心機內(22±2)℃分別靜置0、1、2、4h后再第2次離心10min[215g，(22±2)℃]，把離心后的白膜層與血漿混合液安放于Sepamatic-SL(Ⅲ)全自動全血成分血分離機制備成濃縮血小板約50ml，將濃縮血小板放置在美國Helmer血小板振蕩保存儀內保存24h后從交叉血辮內留取樣本約1ml進行血小板計數(shù)。

1.4 觀察指標 濃縮血小板第2次分離回收率=(成品血小板計數(shù)×成品容量)/(白膜層與血漿混合液小板計數(shù)×白膜層與血漿混合液容量)。

1.5 統(tǒng)計學方法 采用SPSS13.0軟件包處理數(shù)據(jù)，80袋不同血小板含量的300ml血液在不同靜置時間的第2次分離血小板回收情況進行比較用I×J兩因素資料方差分析求F值。

2 結果

不同血小板含量獻血者所獻血液在不同靜置時間該袋血液血小板第2次分離回收率比較見表1。其I×J因素資料方差分析F值見表2。不同血小板含量獻血者所獻血液在不同靜置時間該袋血液血小板第2次分離回收率升降趨勢見圖1。

表1不同血小板含量血液在不同靜置時間血小板第2次分離回收率比較

表2不同血小板含量血液在不同靜置時間血小板第2次分離回收率比較方差分析

圖1回收率與靜置時間關系趨勢(h)

3 討論

隨著輸血技術的發(fā)展，成分輸血的優(yōu)勢越來越被認同，一袋血可以分離多種血液成分，既做到最大程度保留各個血液成分的有效性，滿足不同疾病患者的需求，又節(jié)約了寶貴的血源[3]。美國2011年機采血小板用量比2008年增長了11.9%，但手工血小板的用量與2008年變化不大[4]。為提高手工制備濃縮血小板的血小板含量，有文獻報道隨白膜層儲存時間的延長，血小板對外界刺激的敏感性降低，使本已經(jīng)形成微聚體的血小板充分解聚[5]，因血小板解聚后，其在第2次輕離心時的回收率可能會提高。

通過對血小板計數(shù)為(150～250)×109/L和(251～350)×109/L的300ml血液各40袋，經(jīng)第1次強離心所產生的白膜層與血漿混合液在(22±2)℃分別靜置0、1、2、4h后再進行第2次輕離心，對所得到的濃縮血小板第2次分離回收率比較發(fā)現(xiàn)，在不考慮不同靜置時間因素影響情況下，血小板計數(shù)(150～250)×109/L和(251～350)×109/L血液所得到的濃縮血小板第2次分離回收率均值分別為0.77和0.75，差異無統(tǒng)計學意義(F=0.59P>0.05)，說明不同血小板含量的獻血者所獻的血液制備濃縮血小板第2次分離回收率之間差異無統(tǒng)計學意義。在不考慮不同血小板含量因素的影響下，靜置時間為0、1、2、4h后再進行第2次輕離心，所得到的濃縮血小板第2次分離回收率分別為0.67、0.77、0.80、0.78，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，說明靜置時間對血小板的制備是有影響的。同時通過回收率與靜置時間關系趨勢圖可以看出，靜置到2h，其回收率值最高為0.80。考慮到血小板的要在(22±2)℃且要振蕩保存，因此筆者認為白膜層與血漿混合液在(22±2)℃靜置時間并不是越長越好，靜置2h就能達到較高的回收率。獻血者不同血小板含量與不同靜置時間之間不存在交互作用，也就是不同血小板含量在不同靜置時間回收率的變化值差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

綜上所述，不同血小板含量獻血者所獻血液對制備濃縮血小板第2次分離回收率不產生影響，但不同靜置時間對制備濃縮血小板第2次分離回收率會產生影響，靜置2h即可使?jié)饪s血小板第2次分離回收率達到高值，不必進一步延長靜置時間，以免影響血小板的質量。