可溶性CD14亞型檢測作為膿毒血癥標志物的探討

趙元明,陸書華,申愛華,李曉哲,山鳳蓮

(濟寧醫學院附屬醫院 檢驗科,山東 濟寧272029)

膿毒癥是一種由感染誘發的以全身炎癥反應和器官功能損害為特征的復雜臨床綜合征，已成為重癥監護病房(ICU)患者的主要死亡原因，病死率可達30-50%[1,2]。根據新的膿毒血癥治療指南，早期診斷膿毒血癥對臨床醫療救治ICU 患者至關重要[3]。本研究通過對89例血培養陽性的膿毒癥患者進行血清降鈣素原、C反應蛋白、可溶性CD14亞型檢測，探討可溶性CD14亞型與血培養的相關性及其對膿毒癥早期診斷的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料

選取2016年6月至2017年12月本院住院患者，陽性病例組：臨床診斷為膿毒癥且血培養陽性患者89例，診斷標準符合2012年國際膿毒癥會議診斷標準[4]；陰性對照組：同期住院的非感染SISR患者且血培養陰性259例。兩組臨床資料見表1。

表1 兩組臨床資料

1.2 方法所有患者應用抗生素前空腹采血,采集靜脈血 3-5 ml于真空采血管中，3 000 r/min 離心10 min ，分離血清后置于-80℃保存用于檢測 sCD14-ST、PCT、CRP。同時無菌操作采集患者靜脈血 15-20 ml，分別注入需氧培養瓶和厭氧培養瓶中。sCD14-ST的測定：采用ELISA法檢測患者血清內sCD14-ST水平(試劑來源abbexa)；采用全自動生化分析儀(Cobas c702)免疫比濁法檢測血清CRP 的水平；Roche Cobas e601化學發光分析儀檢測降鈣素原(PCT)；血培養檢測方法：血培養瓶置于 Bact-ALTERT 3D 血培養儀中進行培養，鑒定儀器為法國生物梅里埃公司生產的 VITEKⅡ，以上均采用設備配套試劑，所有操作嚴格按照使用說明書要求進行。

1.3 觀察指標

血培養以培養出致病細菌為陽性，sCD14-ST>365 pg/mL為陽性；CRP>10 mg/ml為陽性；PCT>0.5 μg/L為陽性。

1.4 統計學方法

采用 SPSS 18.0 統計軟件進行數據分析，計數資料采用χ2檢驗，計量資料采用t檢驗，P<0.05 為差異有統計學意義。繪制受試者工作特征曲線(ROC)并計算曲線下面積來評價各指標的診斷價值。

2 結果

2.1 陽性組與陰性對照組各檢測指標結果比較陽性組與陰性對照組血清 sCD14-ST、PCT、CRP結果見表2，陽性組患者血清sCD14-ST、PCT、CRP結果均顯著高于陰性對照組(P<0.01)。

表2 陽性組與陰性對照組sCD14-ST 、PCT、CRP結果比較

與陰性對照組比較：※P<0.01差別有顯著統計學意義。

2.2 可溶性CD14亞型、PCT、CRP與血培養結果對比以血培養為診斷膿毒血癥的金標準，sCD14-ST、PCT、CRP與血培養結果比較見表3。將分析結果進行一致性分析，表明可溶性CD14-ST檢測結果與金標準血培養相比，兩種檢測方法高度一致，Kappa值為0.835；PCT檢測結果與血培養相比，兩種檢測方法基本一致，Kappa值為0.612；CRP檢測結果與血培養相比，兩種檢測方法一致性較差，Kappa值為0.412，表明CRP并不是膿毒癥的理想標志物。

表3 sCD14-ST、PCT、CRP檢測結果與血培養結果分析

2.3 sCD14-ST與PCT、CRP預測膿毒癥的ROC曲線及AUC值sCD14-ST與PCT、CRP預測膿毒癥的ROC曲線見圖1，sCD14亞型AUC值最大，說明sCD14亞型在診斷敗血癥的準確性方面高于PCT、CRP(見表4)。

3 討論

膿毒癥可導致SIRS，但并不是所有的SIRS是有膿毒癥所致，因此,如何鑒別非炎癥性SIRS和膿毒癥性SIRS、早期識別感染性疾病成了近年來多學科討論的熱點和研究的方向。血培養是診斷膿毒血癥的金標準已為臨床共識[5,6]，但由于各種原因如采血部位、時間、采血量，抗菌素的應用等造成陽性率低，并且檢測周期需48-72小時，耗時長，延誤病情。

圖1 sCD14亞型、PCT、CRP預測膿毒癥的ROC曲線

表4 sCD14亞型、PCT、CRP水平診斷膿毒癥ROC曲線的AUC評價

2004 年 Shirakawa K發現了一種新型的生物標記物即可溶性 CD14 亞型(soluble CD14 subtype，sCD14-ST)[7]，研究顯示可溶性 CD14 亞型在感染患者中明顯升高，其血清濃度明顯高于非感染患者，認為 Presepsin 是機體應對細菌感染產生的，對膿毒血癥診斷的敏感性、特異性均為較好的生物標記物[8]。本文研究結果表1顯示：血培養陽性患者組血清可溶性CD14亞型濃度明顯高于血培養陰性患者組(P<0.01)，表明可溶性CD14亞型可作為膿毒癥診斷的標志物。

表4結果顯示sCD14亞型診斷膿毒癥敏感度為82.0%、特異度為98.1%、準確性為94.0%，將sCD14亞型結果與血培養結果進行一致性檢驗(表3)，Kappa=0.835，表明sCD14亞型結果與血培養陽性結果有高度的一致性，提示sCD14亞型對膿毒癥的診斷有一定的優勢。PCT診斷膿毒癥敏感度為77.5%、特異度為86.9%、準確性為84.5%，將PCT結果與血培養結果進行一致性檢驗，Kappa=0.612，通過對比分析兩者間不同的結果，可溶性CD14亞型的檢測結果更符合血培養檢測結果(金標準)。表明可溶性CD14亞型作為膿毒癥標志物優于PCT，與Liu等[9]研究的結果：sCD14-st較PCT和CRP更能準確地判斷膿毒癥相同。

比較sCD14亞型與降鈣素原、C反應蛋白的AUC值，sCD14亞型的AUC值最大，說明可溶性CD14亞型檢測在診斷膿毒癥的準確性方面高于降鈣素原、C反應蛋白。綜上所述：可溶性CD14亞型檢測結果與血培養陽性結果高度相關性、總符合率高，為提供了一個依靠血培養檢查來判斷膿毒癥的又一指標，為基層醫院或不具備血培養條件的醫院提供簡單、易行的檢測手段，且將診斷時間可提前 48-72 h，有助于臨床對膿毒癥的早期診斷提供有價值指標。