CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中的表達及臨床意義

周元 陸寧 蔣紅鋼 陳治橫 陸伯豪 李進

甲狀腺微小乳頭狀癌是甲狀腺乳頭狀癌的一種亞型，其最大直徑＜10mm，由于其體積小，發病隱蔽，預后良好，易被忽略，但臨床上仍發現淋巴結轉移甚至少數遠處轉移等情況，故早期診斷和早期治療具有重要意義。近年來趨化因子的研究取得了較大進展，研究顯示趨化因子可以趨化細胞的聚集和移動，其與靶細胞膜上的受體結合，從而參與人體的免疫反應、對炎癥的應激反應及腫瘤的形成和轉移。CXCR7是一種趨化因子受體，其可與趨化因子CXC配體12（CXCL12）結合形成CXCL12- CXCR7生物學軸從而參與多種腫瘤的粘附及轉移，如在膀胱癌［1］、骨肉瘤［2］、乳腺癌［3］等組織中呈高表達，而在正常組織中表達較少［4］。CXCR7表達強度與惡性程度、淋巴結轉移、遠處轉移及預后呈正相關。目前有關CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中的研究報道較少，作者通過檢測CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中的表達情況，分析CXCR7與甲狀腺微小乳頭狀癌臨床特征之間的關系，旨在探討CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌的發生、侵襲和轉移中的重要作用。

1 臨床資料

1.1 一般資料 收集本院2012年1月至2014年12月甲狀腺微小乳頭狀癌手術石蠟標本共80例，其中男10例，女70例；年齡24～76歲，平均45.8歲。所有病例均行患側甲狀腺腺葉切除+VI區淋巴結清掃術，其中VI淋巴結轉移者23例。同時選擇同期甲狀腺良性病變手術石蠟標本30例用于對照，其中男5例，女25例；年齡25～64歲，平均50.7歲；結節性甲狀腺腫17例，甲狀腺腺瘤7例，橋本氏甲狀腺炎6例。

1.2 方法 所有標本均經福爾馬林溶液固定，常規組織處理，石蠟包埋，連續切片，切片厚度4μm，HE染色。采用免疫組化EnVision二步法，嚴格按試劑盒說明書進行操作。用診斷明確的陽性片作陽性對照，以磷酸鹽緩沖液代替一抗體作陰性對照。

1.3 結果判定 CXCR7陽性信號定位于細胞漿或細胞膜，相應區域呈現棕黃色顆粒代表陽性。按陽性細胞數所占細胞總數的百分率計分：＜5%為0分，5%～25%為1分，26%～50%為2分，56%～100%為3分；著色根據Beesley［5］分級方法，根據染色強度評分：無染色為0分，淺染色為1分，中等染色為2分，深染色為3分。陽性細胞百分數評分與顏色強度評分之和作為判定結果：≤2分為不表達（-），3分（+），4分（++），＞5分（+++）。標本切片病理結果及免疫組化結果采用雙人雙盲法進行判定。

1.4 隨訪 對所有患者進行隨訪。形式主要有門診、電話、微信及信函等，截至日期為2018年6月30日。觀察其復發、轉移及生存情況。

1.5 統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件。計數資料組間比較采用χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌與甲狀腺良性病變中的表達情況 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中陽性率明顯高于良性病變（P＜0.01）（見表1、圖1）。

表1 甲狀腺微小乳頭狀癌與良性病變CXCR7的表達情況

圖1 CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌與良性病變中的表達

2.2 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的表達與臨床特征之間的關系 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的陽性表達與淋巴結轉移有關，在有淋巴結轉移的癌組織中CXCR7的陽性率明顯高于無淋巴結轉移的癌組織（P＜0.05）。CXCR7的陽性率與患者性別、年齡、腫瘤位置、術前TSH水平、腫瘤大小、是否侵犯被膜無關。見表2。

表2 甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的表達與臨床特征的關系

2.3 隨訪結果隨訪時間41～75個月。所有甲狀腺微小乳頭狀癌共存活79例，1例死于其他疾病，其中2例分別于初治后31個月和35個月發生頸部淋巴結轉移，且CXCR7均表達陽性，行患側頸部淋巴結清掃術后存活至今。

2.4 CXCR7對甲狀腺微小乳頭狀癌復發及生存相關性 CXCR7陽性者復發率為3.4%，CXCR7陰性者復發率為0%，兩者比較差異無統計學意義（P＞0.05）。CXCR7陽性者生存率為98.3%，CXCR7陰性者生存率為100%，兩者比較差異無統計學意義（P＞0.05）。

3 討論

趨化因子是一群具有化學趨化作用的細胞因子，可分為 CC、CXC、C、CX3C 四大類，介導細胞的遷移及趨化，參與惡性腫瘤細胞的生長、增殖和侵襲、轉移。CXCL12即SDF-1，是CXC家族中的一個成員，與其受體CXCR4結合形成 CXCL12-CXCR4 軸在多種腫瘤的生長、浸潤和轉移中起重要作用［6］。長期以來，CXCR4被認為是CXCL12的唯一受體，但近年來發現CXCR7也可以與CXCL12結合形成CXCL12-CXCR7 軸參與腫瘤的增殖、浸潤和轉移［7］。現有研究表明［8］，CXCR7在惡性組織中高表達，其與腫瘤惡性程度、遠處轉移、淋巴結轉移、TNM分期及生存預后密切相關。

本研究采用免疫組化法，研究結果表明在甲狀腺微小乳頭狀癌中CXCR7的陽性率顯著高于甲狀腺良性疾病，這和李坤等［9］與劉臻等［10］在甲狀腺乳頭狀癌中的報道基本一致。故提示CXCR7的表達與腫瘤惡性表象相關，CXCR7可能在甲狀腺微小乳頭狀癌形成及發展中發揮作用。本研究中，CXCR7在甲狀腺微小乳頭狀癌中有表達陽性，其表達與年齡、性別、腫瘤位置、術前TSH水平、腫瘤大小、是否侵犯被膜無關，而與淋巴結的轉移相關。故提示CXCR7的表達與腫瘤浸潤轉移密切相關，CXCR7陽性的甲狀腺微小乳頭狀癌可能具有更強的侵襲能力，更容易發生轉移。作者認為對于該部分患者，手術范圍可適當擴大，積極地進行VI區淋巴結清掃，同時結合其他檢查結果，必要時行全甲狀腺切除術和頸部淋巴結清掃術，并且告知患者應長期密切隨訪觀察，注意有無局部復發及淋巴結轉移，及早處理。本研究隨訪中CXCR7陽性表達患者術后頸部淋巴結發生轉移，陰性患者未見復發及轉移，提示CXCR7陽性患者術后可能更易發生復發、轉移等情況，是一組高危患者。本組資料比較差異均無統計學意義，可能與入組數量及隨訪時間等因素相關，有待進一步通過增大樣本及長期隨訪進行探討證實。

甲狀腺微小乳頭狀癌的發生發展、侵襲轉移是一個多階段的，涉及多基因、多信號通路的復雜過程。本研究中CXCR7的表達與甲狀腺微小乳頭狀癌頸部淋巴結轉移密切相關，可能為甲狀腺微小乳頭狀癌患者轉移提供重要參考指標。進一步對CXCR7與甲狀腺微小乳頭狀癌生物學特征之間的關系進行深入研究，可能對腫瘤的發生、發展有更深入的認識，為甲狀腺微小乳頭狀癌的治療方法及病情判斷提供新的思路。盡管大多數的甲狀腺微小乳頭狀癌患者術后預后較好，但是對于CXCR7表達陽性者，需要進行長期密切隨診觀察，使患者得到更合理、及時、有效的治療。