烏藥制劑干預(yù)膝骨關(guān)節(jié)炎IL-33及MMP-13炎癥因子含量的研究

李建春 莊汝杰

膝骨關(guān)節(jié)炎（knee osteoarthritis，KOA）是一種好發(fā)于中老年人，臨床主要表現(xiàn)為膝關(guān)節(jié)活動(dòng)不利、疼痛乃至畸形，以破壞軟骨及軟骨下骨，關(guān)節(jié)間隙改變?yōu)橹饕±肀憩F(xiàn)的疾病［1］。有關(guān)KOA的病因、發(fā)病尚不明確，近年來(lái)有一些證據(jù)表明，一些炎癥因子，如：白細(xì)胞介素、基質(zhì)金屬蛋白酶和腫瘤壞死因子-α（TNF-α）在膝骨關(guān)節(jié)炎的軟骨細(xì)胞及其基質(zhì)破壞中發(fā)揮著重要作用［2-3］。本研究旨在通過(guò)對(duì)在本院骨科門診就診KOA患者資料進(jìn)行分析，對(duì)口服烏藥前后患者血清中炎癥因子含量的變化進(jìn)行研究，從而初步了解烏藥制劑對(duì)早期KOA的治療作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本院骨傷科門診符合疾病診斷的KOA患者共80例，其中男32例，女48例；45～79歲，平均年齡65.2歲。采用隨機(jī)數(shù)字表法分為治療組和對(duì)照組，每組各40例。治療組中男15例，女25例；平均年齡64.9歲。對(duì)照組中男17例，女23例；平均年齡65.5歲。兩組患者年齡、性別、病程情況等比較，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），具有可比性。收集其基本資料，治療組予口服烏藥制劑（浙江天臺(tái)山烏藥生物工程有限公司提供），服用方法：3g/袋，2袋/次，3次/d），用溫水沖服；對(duì)照組予口服塞來(lái)昔布膠囊（輝瑞制藥有限公司提供），服用方法：1粒/（次·d），口服0.2g。兩組患者用藥前、用藥后3個(gè)月、用藥后6個(gè)月分別采集靜脈血，測(cè)定并比較其血清中IL-33及MMP-13的含量。診斷標(biāo)準(zhǔn)：采用美國(guó)風(fēng)濕病學(xué)會(huì)2001年制定的膝骨關(guān)節(jié)炎診斷標(biāo)準(zhǔn)（符合其中≥3項(xiàng)）：（1）年齡≥50歲。（2）晨僵＜30min。（3）關(guān)節(jié)活動(dòng)時(shí)有骨擦聲。（4）膝部檢查示骨性肥大。（5）有骨壓痛。（6）無(wú)明顯滑膜升溫。（7）放射學(xué)檢查有骨贅形成。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）滿足診斷標(biāo)準(zhǔn)的膝骨性關(guān)節(jié)炎患者并知情同意；（2）經(jīng)本院醫(yī)學(xué)倫理會(huì)審核通過(guò)；（3）近期未使用本研究中使用藥物以外其他藥物治療者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）肝腎功能及凝血功能嚴(yán)重障礙者；（2）精神病不配合治療者；（3）哺乳期患者或孕婦患者；（4）合并風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等膝關(guān)節(jié)疾病者；（5）未遵醫(yī)囑退出研究者；（6）受試藥物過(guò)敏者。

1.2 方法 （1）實(shí)驗(yàn)方法：隨機(jī)分組后，治療組予口服烏藥制劑（浙江天臺(tái)山烏藥生物工程有限公司提供），服用方法：3次/d，2袋/次（3g/袋），用溫水沖服；對(duì)照組予口服塞來(lái)昔布膠囊（輝瑞制藥有限公司提供），服用方法：1次/d，0.2g/1粒/次，口服。兩組患者用藥前、用藥后3個(gè)月、用藥后6個(gè)月分別采集靜脈血，采用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定并比較其血清中IL-33及MMP-13的含量水平。（2）觀察指標(biāo)：①兩組患者用藥前、用藥后3個(gè)月、用藥后6個(gè)月測(cè)定并比較其血清中IL-33及MMP-13的含量水平。②VAS 疼痛評(píng)分。（3）IL-33及MMP-13的測(cè)定：采用美國(guó)R＆D公司提供的酶聯(lián)免疫吸附試劑盒，雙抗體夾心ELISA法進(jìn)行測(cè)量IL-33和MMP-13的濃度水平。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。計(jì)量資料以（x±s）表示，組內(nèi)治療前后采用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)。計(jì)數(shù)資料以%表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者治療前后血清中IL-33、MMP-13含量比較 見(jiàn)表1。

表1 兩組患者治療前后血清中IL-33、MMP-13含量比較［ng/L,（x±s）］

2.2 兩組患者治療前后VAS疼痛評(píng)分比較 見(jiàn)表2。

表2 兩組患者治療前后VAS疼痛評(píng)分比較［分，（x±s）］

3 討論

KOA是一種以破壞關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨為主要病理表現(xiàn)的慢性疾病，但其發(fā)病機(jī)制仍不完全明確。KOA發(fā)生發(fā)展的病理過(guò)程中，炎性因子及軟骨的破壞在其中扮演重要的角色［4-6］。研究表明隨著KOA患者病程的進(jìn)展，其血清中IL-1和MMP-13含量隨病程進(jìn)展而顯著增加［7］。Mahmoud RH等［8］認(rèn)為炎癥細(xì)胞因子如IL-33和MMP-13通過(guò)復(fù)雜的作用機(jī)制參與軟骨基質(zhì)Ⅱ型膠原纖維的降解、破壞和炎癥反應(yīng)之中，誘導(dǎo)和促進(jìn)軟骨、軟骨下骨的破壞，最終導(dǎo)致疾病進(jìn)一步進(jìn)發(fā)展。而陳巍等［9］認(rèn)為細(xì)胞因子白細(xì)胞介素-1β、腫瘤壞死因子-α是KOA炎癥反應(yīng)中的主要驅(qū)動(dòng)因素。白細(xì)胞介素（interleukin，IL）能夠通過(guò)與免疫細(xì)胞相結(jié)合，進(jìn)一步促進(jìn)免疫細(xì)胞的增殖與分化，誘發(fā)免疫反應(yīng)急性發(fā)作，導(dǎo)致炎癥加重；而在KOA形成的過(guò)程之中，IL通過(guò)與免疫細(xì)胞的結(jié)合促進(jìn)KOA炎癥反應(yīng)的形成，破壞軟骨與軟骨下骨。Heraud等［10］研究表明IL-1通過(guò)結(jié)合巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞，釋放金屬蛋白酶，抑制軟骨膠原和蛋白多糖的合成，促使軟骨膠原和蛋白多糖的降解，使軟骨無(wú)法正常的代謝，導(dǎo)致軟骨結(jié)構(gòu)的進(jìn)一步破壞。因此，盡可能降低炎癥因子對(duì)KOA患者關(guān)節(jié)軟骨的破壞有重要的意義，能有效的延緩KOA患者病情的發(fā)展，提高關(guān)節(jié)的使用壽命。

烏藥屬于樟科植物烏藥的塊根，主要產(chǎn)于浙江、湖南等地，其中以浙江天臺(tái)所產(chǎn)的烏藥為優(yōu)。《本草綱目》有記載：“烏藥生嶺南邕州容州及江南……。今臺(tái)州雷州皆有產(chǎn)之，以天臺(tái)產(chǎn)者為勝”。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn)，烏藥提取物有抗炎和鎮(zhèn)痛活性［11］。烏藥中的主要活性成分為烏藥抗炎活性組分（LEF）（抗炎活性組），其主要成分為縮合鞣質(zhì)類成分，該成分可以有效的抑制組織中前列腺素E2生成［12］，提示烏藥具有抑制炎癥反應(yīng)的潛能。王嬋等［13］研究顯示：烏藥生物堿顯著抑制了大鼠足部的腫脹；同時(shí)其體外實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步揭示烏藥總生物堿可以抑制巨噬細(xì)胞釋放一氧化氮（NO）和白細(xì)胞介素-1（IL-l），有效的抑制了炎癥反應(yīng)。因此得出結(jié)論：烏藥總生物堿（TARL）可能通過(guò)抑制集體巨噬細(xì)胞等炎癥細(xì)胞釋放炎癥因子的功能來(lái)抑制炎癥反應(yīng)。本研究采用口服烏藥制劑，通過(guò)對(duì)KOA患者口服烏藥前后炎癥因子含量水平的比較發(fā)現(xiàn)，烏藥能有效降低KOA患者體內(nèi)炎癥因子水平的表達(dá)，降低炎癥因子對(duì)關(guān)節(jié)軟骨的破壞作用，從而達(dá)到延緩KOA患者病情發(fā)展的目的。