血清補體C3、C4水平與視神經炎的相關性分析

邵明希，李櫻珠，滕濟森，李圣杰，曹文俊

0引言

視神經炎(optic neuritis，ON)是一種可導致視力急劇下降的視神經的炎性脫髓鞘性疾病，是中青年人最易患的一種致盲性視神經疾病。全球單側ON的年發病率為(0.94～2.18)/100000[1-3]。80%患者視力嚴重下降，60%患者在首次發病后7.7a內單眼或雙眼視力喪失[4]。ON發病年齡較輕，易致盲、嚴重影響患者的日常生活質量，給患者以及社會都造成了極大的負擔。ON可以孤立存在，也可以作為視神經脊髓炎的首發癥狀。ON是原發于視神經的炎癥性病變，它可能與一系列自身免疫異常有關，有研究表明[5]，中樞神經系統脫髓鞘疾病(包括ON)與EB病毒感染、感染后及HLA-DRB密切相關。而補體系統是免疫系統的重要組成部分，是身體免疫系統調控的重要環節，對身體的免疫系統發揮著重要的作用[6]。補體C3處于補體三條激活途徑的樞紐關鍵位置，同時是補體系統中含量最多的成分。本研究查閱相關文獻，未發現外周血補體水平變化與ON的相關性研究。因此本研究采用病例對照研究方法，首次探討外周血血清補體C3、C4水平與ON發生發展的相關性，為臨床診斷、治療及預防提供參考。

組別男性亞組C3C3(<40歲)C3(≥40歲)C4C4(<40歲)C4(≥40歲)ON組96.98±18.0395.94±19.9099.62±12.3524.08±7.6123.53±7.4525.49±8.16對照組111.11±15.71112.35±17.91109.20±11.6224.91±5.9524.73±4.8925.19±7.39 t4.3233.6322.3430.6310.8050.113P<0.0010.0010.0250.5290.4240.911組別女性亞組C3C3(<40歲)C3(≥40歲)C4C4(<40歲)C4(≥40歲)ON組95.76±17.9794.33±19.0997.28±16.7621.57±7.3821.81±7.1721.31±7.68對照組107.24±16.00105.92±16.21109.59±15.5924.29±6.6724.00±6.2824.79±7.38 t4.4823.3153.2212.5661.6441.967P<0.0010.0010.0020.0110.1030.053

注：對照組：正常體檢者。

1對象和方法

1.1對象收集2018-01/08于復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫院眼科就診并確診為ON的患者，所有患者都經過詳細眼科檢查，按照視神經炎診斷和治療專家共識(2014)診斷為ON患者[7]。ON排除標準：(1)患有ON以外的其他眼部炎癥疾病；(2)眼部感染性疾病；(3)有眼外傷史，其它可導致視力下降的眼病(眼結節病、視網膜病變等)及有過眼部手術者；(4)排除全身免疫系統疾病(腫瘤、多發性硬化癥、肝腎功能不全等)。對照組入選標準：(1)正常體檢人群；(2)排除合并可導致視力下降的眼病及其他眼科炎癥疾病；(3)排除合并全身免疫功能不全，良性、惡性腫瘤等嚴重的全身免疫性系統疾病。本研究經復旦大學附屬眼耳鼻喉科醫院倫理委員會審批，且所有入組對象均簽署知情同意書。

1.2方法詳細查詢已診斷為ON患者的病史，采集其年齡、性別等資料。外周血補體C3、C4水平檢測采用靜脈血，3 000r/min×10min離心分離血清以待檢測。采用羅氏cobas C702全自動生化儀對血清補體C3、C4水平進行檢測，其定標液及試劑均為羅氏原裝配套試劑，質控液使用羅氏儀器原裝配套的質控品。

2結果

2.1兩組基本資料本研究共納入ON患者137例，其中男46例，女91例；對照組147例，其中男61例，女86例，兩組比較差異無統計學意義(P=0.169)。ON組平均年齡39.18±12.33歲，對照組平均年齡37.56±11.95歲，兩組比較差異無統計學意義(t=1.122，P=0.169)。ON組血清補體C3水平(96.17±17.93mg/dL)顯著低于對照組水平(108.85±15.94mg/dL)，差異有統計學意義(t=6.282,P<0.001)。ON組血清C4水平(22.41±7.53mg/dL)顯著低于對照組水平(24.55±6.37mg/dL)，差異有統計學意義(t=2.569,P=0.011)。

2.2亞組分析男性ON組血清補體C3水平(96.98±18.03mg/dL)顯著低于男性對照組水平(111.11±15.71mg/dL)，差異具有統計學意義(t=4.323，P<0.001)；其中男性年齡<40歲組與≥40歲組的血清C3水平都顯著低于對照組C3水平，差異均具有統計學意義(t=3.632，P=0.001；t=2.343,P=0.025)。女性ON組血清補體C3水平(95.76±17.97mg/dL)顯著低于女性對照組水平(107.24±16.00mg/dL)，差異具有統計學意義(t=4.482，P<0.001)；女性年齡<40歲組與年齡≥40歲組的血清C3水平都顯著低于對照組水平，差異均有統計學意義(t=3.315，P=0.001；t=3.221，P=0.002)；女性ON組血清補體C4水平(21.57±7.38mg/dL)顯著低于女性對照組水平C4水平(24.29±6.67mg/dL)，差異具有統計學意義(t=2.566，P=0.011)，見表1。

2.3 Logistic多因素回歸分析Logistic多因素回歸分析時，納入全部的因素，通過校正性別(男=1，女=2)和年齡，對補體C3和C4水平進行多因素Logistic回歸分析，發現血清補體C3和C4水平下降為ON發病的危險因素。

表2 補體C3、C4水平與ON的多因素Logistic回歸分析

因素B標準誤差WaldsPOR(95%CI)年齡-0.0180.012.9940.0840.982(0.962～1.002)性別-0.2330.2640.7770.3780.792(0.472～1.330)C30.0470.00830.98<0.0011.048(1.031～1.065)C40.0440.0186.0970.0141.045(1.009～1.083)

圖1受試者工作特性(ROC)曲線。

外周血補體C3、C4降低患者ON的可能性是未降低者的1.048倍及1.045倍(P<0.05)，見表2。

2.4受試者工作特性曲線受試者工作特性(ROC)診斷曲線顯示，血清補體C3水平鑒別ON最佳診斷值為92.295，最大曲線下面積為0.665(P<0.001，95%CI：0.602～0.728),敏感性為84.4%，特異性為56.9%，見圖1。

3討論

ON的病因比較復雜，在臨床上大多數病例無法查明具體的病因，近年來病毒感染導致ON的報道多見[8-9]。本研究結果顯示血清補體C3、C4水平在ON患者中顯著下降，表明血清補體C3、C4水平下降可能是ON發生發展的危險因素。血清補體系統在不同激活物的刺激作用下，其識別蛋白可分別由經典途徑、凝集素途徑、旁路途徑激活三種途徑激活。補體系統是連接適應性自身免疫與固有免疫的橋梁，起到免疫效應與放大的作用。補體系統是機體適應性免疫和固有免疫的效應機制[10]。同時補體C3、C4在感染免疫細胞與促進病毒黏膜侵入和傳播等方面起到重要作用[11]。

近年來的相關研究表明病毒感染、自身免疫反應在ON的發病中發揮重要作用[8-9]。蔡莉等[12]對確診為ON 98例170眼的病例進行研究，發現ON患者病毒抗體檢測陽性率65.8%(單純皰疹病毒Ⅰ、Ⅱ型、巨細胞病毒、風疹病毒、帶狀皰疹病毒抗體檢測)，81.3%免疫球蛋白升高(免疫球蛋白、補體、自身抗體、抗“O”、類風濕因子)，77.8%補體(CH50，B因子)降低。劉子豪等[13]研究表明，自身免疫反應是ON發生發展的重要危險因素,其中血清抗AQP4 抗體、抗核抗體譜、抗可提取性核抗原抗體譜、抗心磷脂抗體譜等異常多見，且免疫指標數量異常越多，ON發生率越高。Sun等[14]研究發現，血清AQP4和選擇性細胞因子與ON發病機制有關，為ON患者未來的臨床診斷提供了潛在的生物標志物。

此外，其他研究表明補體的異常與多種眼部視神經疾病具有相關性。Li等[15]的研究顯示，老年女性原發性閉角型青光眼中外周血補體C3水平下降，并且與疾病的嚴重程度呈正相關，提示補體C3可能參與老年女性原發性閉角型青光眼的發生發展。Lidia等進行的細胞毒性研究證實，在激活的補體參與下，ON患者的血清中檢測到乳酸脫氫酶的升高，進一步證實了NMO-IgG與激活的補體共同作用產生了星形膠質細胞的毒性作用，而星形膠質細胞的毒性是誘發神經炎癥和脫髓鞘過程的重要機制[16]。此外，有研究發現在ON病變形成的過程中，補體旁路途徑的激活在病變的形成過程中也起到了一定作用[17]。本研究結果顯示，ON組血清補體C3、C4水平顯著低于對照組水平。

本研究查閱相關文獻，未發現外周血補體水平變化與ON的相關性研究。ON組血清補體C3、C4水平下降的原因可能為：(1)ON患者病毒感染陽性率較高，病毒感染引起補體系統的激活及消耗，從而加劇視神經的損傷；(2)ON患者可能存在補體C3、C4基因突變，從而導致外周血血清水平的變化，該猜想有待進一步證實；(3)研究表明補體C3水平下降可能使患者更易發生感染，感染進一步引起補體系統的激活，從而形成惡性循環[18]。補體系統參與ON視神經損傷的具體機制有待進一步研究。

本研究通過多因素Logistic回歸分析，發現血清補體C3、C4為ON發病的危險因素。外周血補體C3、C4降低者患ON的可能性是未有以上危險因素者的1.048倍及1.045倍。本研究提示血清補體C3、C4可能參與ON的發病。

綜上所述，本研究發現ON患者外周血補體C3、C4水平顯著下降，進一步研究分析發現補體C3、C4水平下降可能是ON的危險因素。因此，表明補體系統激活可能參與了ON的發病。本研究首次探討了血清補體C3、C4水平與ON之間的相關性，但本研究并未深入研究其具體發生機制且樣本量相對較小。因此，前瞻性、大樣本、多中心的深入性相關研究亟待開展。