炎性細胞因子與體液免疫動態檢測對小兒支原體肺炎的評估作用

仝慧杰

河北省邢臺市人民醫院檢驗一科 054001

肺炎支原體(MP)是引起小兒肺炎支原體肺炎和呼吸系統疾病的常見病原體，約超過30%可進展為肺炎支原體肺炎，甚至會誘發其他肺外并發癥，對兒童的生長發育有嚴重的影響[1-2]。目前尚不十分清楚MP感染后致病機制，多與肺炎支原體感染后免疫功能紊亂和炎癥損傷、呼吸道上皮吸附作用等有關。炎性反應和免疫損傷在小兒肺炎支原體肺炎的發生與進展中發揮重要的作用[3]。本文對72例小兒肺炎支原體肺炎患兒進行炎性細胞因子與體液免疫動態檢測，分析炎性細胞因子與體液免疫動態檢測對MP感染疾病的評估效果，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 基本資料 選擇2017年8月—2018年8月本院收治的72例小兒肺炎支原體肺炎患兒為觀察組(輕型42例，重型30例)。納入標準：符合《兒童肺炎支原體肺炎診治專家共識(2015年版)》中[4]小兒肺炎支原體肺炎的相關診斷標準。排除標準：排除合并有心、肝、腎等器質性疾病者；排除免疫功能低下者、混合感染者及合并支氣管哮喘、肺結核等感染性疾病者。其中男42例，女30例；年齡9個月～10歲，平均年齡(5.26±1.09)歲。選擇同期在本院進行體檢的健康兒童為對照組，其中男40例，女32例；年齡9個月～10歲，平均年齡(5.26±1.09)歲。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義(P>0.05)，具有可對比性。

1.2 方法 觀察組患者進行小兒肺炎支原體感染疾病的對癥治療。治療方法包括抗感染、抗炎、祛痰、退熱、吸氧等綜合治療。

1.3 觀察指標 分別采集兩組患兒外周靜脈血3ml，觀察組患兒治療前、3d、7d及15d后均取血。行5min 的4 000r/min離心操作，取上清液，并保存在-70℃冰箱中待測。采用免疫散射比濁法測定血清補體和免疫球蛋白，前者包括C3、C4，后者包括IgM、IgG、IgA。采用酶聯免疫吸附法測定IL-8、IL-10、IL-13、TNF-α，試紙盒均由上海西唐生物有限公司提供。

2 結果

2.1 兩組免疫球蛋白、補體水平比較 觀察組患者治療3d、7d及15d后C3、C4水平低于治療前，IgM、IgG及IgA水平高于治療前，差異具有統計學意義(P<0.05)。觀察組患者治療15d后，C3、C4、IgM、IgG及IgA水平與對照組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。

表1 兩組免疫球蛋白、補體水平比較

2.2 兩組炎性細胞因子水平比較 觀察組患者治療3d、7d及15d后TNF-α、IL-13、IL-10及IL-8水平低于治療前，差異具有統計學意義(P<0.05)。觀察組患者治療15d后，TNF-α、IL-13、IL-10及IL-8水平與對照組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。見表2。

2.3 兩組免疫球蛋白、補體水平比較 觀察組中重型IgA小于輕型及對照組，IgM大于輕型及對照組，重型C3、C4、IgG水平高于對照組、輕型，差異具有統計學意義(P<0.05)，輕型C3、C4、IgG水平與對照組相比，差異無統計學意義(P>0.05)。見表3。

表2 兩組炎性細胞因子水平比較

2.4 兩組炎性細胞因子水平比較 觀察組重型TNF-α、IL-8、IL-13水平大于輕型及對照組，IL-10水平小于輕型及對照組，差異具有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表3 兩組免疫球蛋白、補體水平比較

注：與重型比較，aP<0.05，與輕型比較，bP<0.05。

表4 兩組炎性細胞因子水平

注：與重型比較，aP<0.05，與輕型比較，bP<0.05。

3 討論

兒童MP感染后早期無特異性臨床癥狀，加上其免疫系統發育不全、組織器官功能不成熟等，極易發生肺外并發癥，嚴重時會危及患兒的生命安全[5-6]。MP感染后，機體會經歷一個復雜的過程，包括免疫抑制、蓄積、調節、逃逸等，自身免疫抗體與細胞因子相互誘導、制約，可形成復雜免疫調節、細胞因子的網絡，誘導疾病并促進其發展[7-8]。

體液免疫在機體感染MP后最早出現的抗體為IgM，發病4周左右即可達到峰值，一般在恢復期可恢復至正常水平[9]。MP感染后早期無典型癥狀，且IgM潛伏期為2～3周。因此多數小兒肺炎支原體肺炎患兒就診時IgM水平較高。與IgM相比，MP感染后IgG出現較晚，多在發病后約5周達到峰值。在免疫球蛋白含量中IgA占10%～20%，多在MP感染后約2周出現升高趨勢。IgA是一種重要的黏膜局部免疫抗體，當機體缺乏IgA時，其呼吸道抗病毒能力會降低，增加感染危險性[10]。本研究中，觀察組患者治療3d、7d及15d后C3、C4、TNF-α、IL-13、IL-10及IL-8水平低于治療前，IgM、IgG及IgA水平高于治療前，；觀察組中重型IgA小于輕型及對照組，IgM大于輕型及對照組，重型IgG水平高于對照組，提示小兒肺炎支原體肺炎患兒多存在免疫功能紊亂，其紊亂程度與病情嚴重程度呈正比，表現為IgA合成不足和IgG、IgM合成過度。MP感染免疫應答可經補體系統激活、T細胞分泌細胞因子、B細胞分泌免疫球蛋白而發揮。但長期存在MP感染會導致補體系統激活，生成大量的中性粒細胞趨化因子，病變部位有大量白細胞聚集并分泌水解酶，引起自身免疫損傷。觀察組急性期C3、C4高于對照組與恢復期，重型C3、C4水平高于對照組、輕型，提示MP感染早期可激活補體系統，為清除和對抗病原體將有大量C3、C4生成，故重型和急性期C3、C4水平顯著升高。

炎性細胞因子和Th細胞亞群在MP致病過程中發揮重要的作用，細胞因子可直接作用于細胞對免疫功能起反饋性調節，細胞因子間的相互作用將對免疫平衡造成影響[11-12]。IL-8為趨化性炎性因子，由單核細胞分泌，在呼吸系統疾病的發生中起到關鍵性作用。TNF-α為雙向作用因子，能對機體免疫調節，但其持續增高可加重或誘導炎癥反應。本文中，重型患者TNF-α、IL-8水平大于輕型及對照組，提示TNF-α、IL-8參與小兒肺炎支原體肺炎的發生與發展。分析原因在于因血液循環中進入MP異種抗原后，能使中性粒細胞和單核巨噬細胞激活，而產生大量的TNF-α、IL-8等，進而加重炎癥反應，促使小兒肺炎支原體肺炎的發生，并使其發展加速。IL-10對單核巨噬細胞有強效活性抑制作用，其屬抗炎因子，可對TNF-α、IL-β等生成起到抑制作用，而抑制炎癥反應，其水平下降多表示持續炎癥損傷或機體免疫功能失調[13-14]。IL-13為抗炎因子，由Th2細胞生成，參與機體抗原呈遞過程和抗炎反應[15]。

IL-13可誘導單核細胞分化，增強其MHCⅡ類分子的表達；抑制lps誘導的單核因子分泌，控制炎癥反應；誘導B細胞增殖及合成IgE類抗體，增強B細胞表面MHCⅡ類分子、CD23及CD72的表達；協同IL-2刺激NK細胞產生IFN，從而促進單核—巨噬細胞活化和TH1型細胞免疫反應。最近還發現，IL-13還具有抑制HIV-1在巨噬細胞內復制，誘導中性粒細胞中IL-1RA基因表達和蛋白質合成等多種功能。本文中，重型患者IL-13水平大于輕型及對照組，IL-10水平小于輕型及對照組，提示MP感染后機體的抗炎/促炎系統紊亂、免疫系統紊亂，抗炎細胞分子分泌不足，可引起組織損傷和炎癥持續，較MP感染的保護性免疫因子、IL-13等依賴特異性抗炎細胞因子可能較低，對機體炎癥反應控制有重要作用。

綜上所述，兒童MP感染存在體液和細胞免疫功能紊亂，動態監測血清補體、免疫球蛋白以及炎性細胞因子水平變化，可評估疾病分期與嚴重程度。