層流潔凈手術室空氣日常監測的方法和效果

張飛龍，于煒

日照市人民醫院設備科 （山東日照 276800）

層流無菌手術室是對患者進行手術治療的重要場所，定期對手術室的空氣菌落數進行測定是監測凈化手術室潔凈的重要手段。為探討層流潔凈手術室空氣日常監測的方法，本研究選取我院百級、千級與萬級層流潔凈手術室各1間為測試對象，分別采取多點布控法與常規布控法對手術室內不同高度空氣采樣，并比較樣本檢測結果。現報道如下。

1 材料與方法

1.1 測試對象與材料

本研究測試對象為我院百級、千級與萬級層流潔凈手術室各1間，手術室面積均小于30 m2；測試所使用材料為90 mm營養瓊脂平板培養皿。

1.2 采樣方法

開啟層流空調，待其運轉30 min后將室內溫度調節為22～25℃，濕度調節為50%～60%，于靜態狀態下采取空氣沉降法行專人采樣。

1.2.1 常規布控采樣

依據《醫藥消毒衛生標準》GB／T 15982-1995，進行常規布控方法采樣30 min，其中百級與千級層流潔凈手術室均于東、西、南、北、中5個方位分別布1個點；萬級層流潔凈手術室于里、中、外3處分別布1個點。第1輪采樣高度為0．8 m高處；第2輪采樣高度為1．2 m高處［1］。

1.2.2 多點布控采樣

依據《醫藥衛生潔凈室（區）沉降菌的測試方法》GB／T 16294-1996，進行多點布控方法采樣30 min，其中百級層流潔凈手術室于手術區布5個點，周邊區布8個點；千級層流潔凈手術室于手術區布3個點，周邊區布6個點；萬級層流潔凈手術室于手術區布3個點，周邊區布4個點［2］。第1輪采樣高度為手術區0．8 m高處與周邊地面；第2輪采樣高度為手術區1．2 m高處與周邊0．8 m高處。

于同等條件下實施兩種采樣方法，均連續采樣4 d，先行常規布控采樣，再行多點布控采樣，共采樣8 d，并行陰性對照，以檢測空氣培養皿是否遭到污染。將所采集樣本置于37℃環境下行48 h培養，并計算各批樣本的菌落數。

1.3 檢測指標與計算標準

對樣本的平板平均菌落數進行計算，計算公式：平板的平均菌落數＝（M1＋M2＋……＋Mn）／n，其中M1、M2……Mn表示各平板的菌落數；n為所有的平板數量。將計算結果與GB 50333-2002《醫院潔凈手術部建筑技術規范》中關于不同潔凈度平均菌落數標準進行比較，百級、千級與萬級層流潔凈手術室手術區的平均菌落數量應分別低于0．2 cfu／平板、0．75 cfu／平板與2 cfu／平板；百級、千級與萬級層流潔凈手術室周邊區的平均菌落數量應分別低于0．4 cfu／平板、1．5 cfu／平板與4 cfu／平板［2］。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 不同級別層流潔凈手術室采取空氣沉降法進行采樣的檢測結果

不同級別層流潔凈手術室的多點布控采樣與常規布控采樣的平板菌落數均未超標；百級與千級層流潔凈手術室的常規布控采樣法的平均菌落數量多于多點布控采樣法，而萬級層流潔凈手術室的常規布控采樣法的平均菌落數量少于多點布控采樣法，差異均有統計學意義（P＜0．05）。見表1。

表1 不同級別層流潔凈手術室空氣采樣檢測結果比較（cfu／平板，x±s）

2.2 多點布控采樣法不同高度的樣本平板陽性率比較

多點布控采樣法行空氣沉降采樣的樣本中，手術區0．8 m與1．2 m高處采樣數均為48，檢測陽性率均為0．00%，未見細菌生長；周邊地面與周邊0．8 m高處的采樣數均為74，周邊地面的樣本平板陽性率為13．51%（10／74），高于周邊0．8 m高處的4．05%（3／74），差異有統計學意義（χ2＝4．672，P＜0．05）。

2.3 常規布控采樣法不同高度的樣本平板陽性率比較

采取常規布控采樣法行空氣沉降采樣的樣本中，0．8 m與1．2 m高處的采樣數均為56，0．8 m高處的平板陽性檢出率為12．50%（7／56），與1．2 m高處的5．36%（3／56）比較，差異無統計學意義（χ2＝1．102，P＞0．05）。

3 討論

層流潔凈手術室空氣的日常監測是醫院手術室管理的重要內容，也是保障手術室安全的重要手段。對層流潔凈手術室空氣的檢測，以往多采取百、千級層流潔凈手術室進行采樣，再計算各方位的平板平均菌落數量，并與相關標準進行比較；對萬級層流潔凈手術室空氣的采樣，則會于里、外、中3處布點。此采樣方法雖可遍布整個手術室，客觀地表現出手術室的空氣污染程度，但此采樣方法過于片面，其于橫向上的采樣較為廣泛，卻忽略了縱向上空氣的采樣［3］。多點布控采樣法則不同，其同時于手術室內的手術區與周邊區布點，在進行檢測時兼顧不同高度上空氣的采樣。

本研究結果顯示，我院各級別層流潔凈手術室的平板菌落數均未超標，表明我院層流潔凈手術室的空氣良好；百級與千級層流潔凈手術室的常規布控采樣法的平均菌落數量多于多點布控采樣法，而萬級層流潔凈手術室的常規布控采樣法的平均菌落數量少于多點布控采樣法，差異有統計學意義（P＜0．05）。同時針對不同的高度，采取多點布控采樣法行空氣沉降采樣的樣本中，周邊地面的樣本平板陽性率高于周邊0．8 m高處，差異有統計學意義（P＜0．05），而采取常規布控采樣法行空氣沉降采樣的樣本中，0．8 m與1．2 m高處的平板陽性檢出率比較，差異無統計學意義（P＞0．05），由此可見，多點布控采樣法對手術室內空氣菌落的檢出精準性優于常規布控采樣法。

雖然當前各類雜志、書籍或醫院手術室潔凈相關標準對空氣采樣高度的闡述有所不同，但就本研究所選取的采樣高度來看，多點布控采樣法于手術區0．8 m和1．2 m與周邊地面進行采樣，其基本與《醫院潔凈手術部建筑技術規范》GB 50333-2002中的相關高度要求相符［4］。常規布控采樣法于0．8 m和1．2 m處采樣基本與《醫藥消毒衛生標準》GB／T 15982-1995中的相關高度要求相符［5］。因采取沉降法實施空氣培養，其主要問題在于靈敏度偏低、誤差較大。細菌于空氣中的分布是不均勻的，在同樣的條件下，采集空氣所采取的方法不同，樣本的平板陽性檢出率也會有所不同。但不管平板陽性檢出率是高是低，依公式計算出來的平均菌落數都要與國家標準進行比較，以判斷空氣質量是否超標。所以，建議選擇多點布控采樣法，采集高度為手術區0．8 m和1．2 m，同時利用空氣沉降法對周邊地面采樣實施監測。若是采取常規采樣法，則采樣高度宜選擇在0．8 m處。

綜上所述，采取多點布控采樣法于手術區0．8 m和1．2 m的高度進行采樣，并行空氣沉降法監測周邊地面采樣是層流潔凈手術室空氣日常監測的有效方法。