微柱凝膠免疫檢測技術在臨床血型鑒定與輸血中的應用價值

李麗紅

福建省龍巖市第二醫院輸血科 （福建龍巖 364000）

輸血是臨床常見的一種救治手段，可以快速補充患者的血容量，保證機體獲得足夠的氧氣，防止患者出現休克癥狀［1］。輸血前必須做好血型鑒定及配對工作，以免患者出現過敏、充血性心力衰竭、肺水腫、枸櫞酸鈉中毒、溶血等輸血反應［2］。臨床常見的血型鑒定方法有鹽水試管法、卡式微柱凝膠法等，臨床效果各不一致。本研究重點探討微柱凝膠免疫檢測技術在臨床血型鑒定與輸血中的應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年7月至2018年10月收治的1 200例輸血患者作為研究對象，其中男684例，女516例；年齡20～78歲，平均（38．52±9．78）歲；211例有輸血史，989例無輸血史。供血者1 200名，均為無償獻血者，其中男672名，女528名；年齡21～76歲，平均（38．49±9．77）歲。

1.2 方法

抽取所有研究對象4 ml清晨空腹靜脈血液制作成血液標本，將所有血液標本分為等同的兩份，一份通過鹽水試管法進行血型鑒定，聚凝胺法進行交叉配血；一份通過微柱凝膠法進行血型鑒定和交叉配血。

1.2.1 儀器與試劑選擇

本研究所用儀器包括Baso離心機，聚凝胺試劑由合肥天一生物技術研究所提供，微柱凝膠卡由美國基立福公司公司提供。

1.2.2 血型鑒定

（1）鹽水試管法：按照鑒定常規將所有血液標本進行離心處理，分離血清，根據《全國臨床檢驗操作規程》（第4版）中對于鹽水試管法的操作標準對血型進行鑒定，離心后觀察其反定結果，同時做陰性對照管以排除冷凝集。（2）微柱凝膠法：將所有血液標本進行常規離心處理后，分離血清，然后在Diana微柱凝膠卡上A、B、D、C、E、Clt孔分別加入1%紅細胞懸液50μl，N／A1、N／B兩支凝膠微管則分別滴入血清50μl和標準A型、B型的1%紅細胞懸液50μl，滴注完成后將其再用離心機離心9 min，離心完成后用肉眼對結果進行判定。

1.2.3 交叉配血

（1）聚凝胺法：將所有供血者與輸血患者的血液標本按照常規進行離心處理，分離血清，配制好3%～5%紅細胞懸液，然后分別在兩支一次性試管上標上主側和次側兩個記號，標有主側的試管內滴入1滴供血標本紅細胞懸液和2滴輸血患者的血漿標本，標有次側的試管內滴入2滴供血者的血漿標本和1滴輸血患者的紅細胞懸液，滴加完畢后再加入0．6 ml低離子介質溶液使其混勻，靜置1 min后加入2滴聚凝胺溶液，搖勻進行15 s的離心處理，觀察上清液有無溶血，倒掉上清液，收取管底0．1 ml的凝集液，觀察是否有凝集，然后往里加入2滴重懸液進行肉眼結果判定。（2）微柱凝膠法：按照常規將所有供血者和輸血患者的血液標本進行離心處理，分離血清，配制好1%的紅細胞懸液，在兩支凝膠微管上分別標上主側和次側兩個記號，標有主側的凝膠微管內加入50μl供血標本紅細胞懸液和30μl輸血患者的血漿標本，標有次側的凝膠微管內加入30μl供血者的血漿標本和50μl輸血患者的紅細胞懸液，完畢后將其置于37℃下進行孵育，孵育時間為15 min，孵育完畢后用離心機進行9 min的離心處理，最后用肉眼對結果進行判定。

1.3 臨床評價

（1）比較兩種檢測方法的血型鑒定結果；（2）比較兩種檢測方法的交叉配血結果。聚凝胺法的判定標準：匹配，1 min內散開，屬于聚凝胺引起的非免疫性凝集；不匹配，不散開，屬于異體抗體引起的免疫性凝集［3］。微柱凝膠的判定標準：匹配，凝膠管底有紅細胞沉積；不匹配，凝膠管底無紅細胞沉積，紅細胞聚集在凝膠微管上、中部位［4］。

1.4 統計學處理

應用SPSS 20．0統計軟件進行數據分析，計數資料以率表示，采用χ2檢驗，P＜0．05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩種檢測方法的血型鑒定結果比較

兩種檢測方法的正反定型不符率比較，差異無統計學意義（P＞0．05）。見表1。

表1 兩種檢測方法的血型鑒定結果比較［份（%）］

2.2 兩種檢測方法的交叉配血結果比較

聚凝胺法的交叉配血不合率高于微柱凝膠法，差異有統計學意義（P＜0．05）。見表2。

表2 兩種檢測方法的交叉配血結果比較［份（%）］

3 討論

在臨床急診急救中，輸血是常見的一種救治手段，可快速補充患者的血容量，使其不會出現因血液流失過多而導致的缺氧、休克，但輸血前必須先做血型鑒定，以免血型不符產生排斥［5］。為了提高患者的輸血效率，需要提高血型鑒定與交叉配血的檢測效率。以往臨床常使用鹽水試管法進行血型鑒定，但其操作較為復雜，對血量的需求也較高，加之交叉配血時使用的聚凝胺法容易受到肝素、藥物等因素的影響，因此，雖然鹽水試管法的檢測結果準確，但其檢測效率難以滿足臨床需求［6］。

隨著醫療技術水平的提高，微柱凝膠免疫檢測技術在臨床上被廣泛運用在血型鑒定與交叉配血中，其操作手法的簡易度與檢測結果的準確度受到多數學者的認可［7］。本研究結果顯示，兩種檢測方法的正反定型不符率比較，差異無統計學意義（P＞0．05）。聚凝胺法的交叉配血不合率高于微柱凝膠法，差異有統計學意義（P＜0．05）。說明微柱凝膠法更具有檢測優勢，對于血液中的不規則抗體的檢測度更高。微柱凝膠法主要利用生物凝膠過濾的原理，凝膠間隙只允許單個紅細胞通過，當紅細胞與不規則抗體結合導致體積增大時，無法通過凝膠間隙，因而出現正常紅細胞在凝膠管下部近底處，而凝塊聚集在中上部，從而得以鑒定血型［8-9］。聚凝胺法檢測交叉配血的標準是觀察紅細胞是否產生凝集，如果可以散開則為配對，但藥物、肝素等因素也有可能引發凝集的紅細胞散開，因此，存在一定的誤差［10］。微柱凝膠法內凝集的紅細胞即使分開，但由于原有體積增大，仍無法通過只允許單個紅細胞通過的凝膠間隙，因此，該法可有效減少交叉配血中的假陽性現象，提高輸血安全性。

總之，微柱凝膠免疫檢測技術操作簡單、準確，可提高醫師輸血的效率與安全性。