尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin在糖尿病腎病患者不同分期中的表達(dá)及其在預(yù)后評估中的價值

李萍華　潘富林　劉偉莉　張斯?jié)h　張欣洲

【摘要】 目的：研究足細(xì)胞B7-1、尿nephrin在糖尿病腎病患者不同分期中的表達(dá)及其在預(yù)后評估中的價值。方法：選擇筆者所在醫(yī)院2016年2月-2018年2月治療的糖尿病腎病患者50例，根據(jù)分期分為糖尿病腎病Ⅲ期（22例）、Ⅳ期（28例），選取糖尿病無合并腎損傷患者30例，作為糖尿病對照組，并抽取醫(yī)院體檢科健康體檢者30例作為正常對照組，檢測四組患者尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin的表達(dá)水平，同時觀察糖尿病腎病尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin不同水平患者半年后eGFR的變化。結(jié)果：糖尿病腎病Ⅲ期組、糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病對照組及正常對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病腎病Ⅲ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病對照組及正常對照組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin高表達(dá)組eGFR降低幅度均大于糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin低表達(dá)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論：足細(xì)胞B7-1、尿nephrin可作為糖尿病腎病患者早期診斷的重要指標(biāo)，同時對糖尿病腎病患者的預(yù)后評估具有重要價值。

【關(guān)鍵詞】 尿足細(xì)胞B7-1; 尿nephrin; 糖尿病腎病; 不同分期; 預(yù)后

doi：10.14033/j.cnki.cfmr.2019.17.011 文獻(xiàn)標(biāo)識碼 B 文章編號 1674-6805（2019）17-00-03

【Abstract】 Objective：To study the expression of podocyte B7-1 in different stages of diabetic nephropathy and its value in prognosis evaluation.Method：A total of 50 patients with diabetic nephropathy treated in our hospital from February 2016 to February 2018 were divided into stage Ⅲ（22 cases） and stage Ⅳ（28 cases）.30 patients with diabetes mellitus without renal injury were selected as diabetic control group.30 healthy persons from physical examination department of our hospital were selected as normal control group.The expression levels of urinary podocyte B7-1 and urine nephrin in four groups were detected，and the changes of eGFR in diabetic nephropathy patients with different levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin were observed half a year later.Result：The levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin in diabetic nephropathy stage Ⅲ group and diabetic nephropathy stage Ⅳ group were significantly higher than those in diabetic control group and normal control group（P<0.05）.The levels of urinary podocyte B7-1 and urinary nephrin in stage Ⅳ diabetic nephropathy group were significantly higher than those in diabetic nephropathy stage Ⅲ group（P<0.05）.There was no significant difference in urinary podocyte B7-1 and urine nephrin levels between diabetic control group and normal control group（P>0.05）.The decrease of eGFR in the urine of the diabetic nephropathy group was greater than that in the diabetic nephropathy group，and the urine nephrin low expression group was significantly higher than that of the diabetic nephropathy group（P<0.05）.Conclusion：Podocyte B7-1 and urinary nephrin can be used as important indicators for early diagnosis of diabetic nephropathy，and have important value for prognosis evaluation of diabetic nephropathy.

【Key words】 Urinary podocyte B7-1; Urinary nephrin; Diabetic nephropathy; Different stages; Prognosis

First-authors address：Longgang District Peoples Hospital of Shenzhen City，Shenzhen 510172，China

據(jù)統(tǒng)計，最近10年，糖尿病發(fā)病率呈明顯上升趨勢[1]。而糖尿病的最常見及最嚴(yán)重的并發(fā)癥為微血管病變，臨床上以糖尿病腎病尤為嚴(yán)重，且糖尿病腎病最終將進(jìn)展至終末期腎病，需長期腎臟替代治療。這直接影響了患者生活質(zhì)量及生存壽命，并對家庭及社會造成了沉重的負(fù)擔(dān)[2]。對于糖尿病腎病的防治，早期的預(yù)防和診治尤為重要，如能早期干預(yù)，部分可防止進(jìn)入終末期腎病。目前，糖尿病腎病的足細(xì)胞病變?yōu)檠芯康臒狳c(diǎn)。而尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin的測定，作為糖尿腎病足細(xì)胞損傷的尿液標(biāo)志物，為臨床非侵入性診斷糖尿病腎病患者足細(xì)胞損傷提供可能[3]。本文將尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin納入其中研究，觀察其在不同分期中表達(dá)及其在預(yù)后評估中的價值，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇筆者所在醫(yī)院2016年2月-2018年2月治療的糖尿病腎病患者50例，根據(jù)文獻(xiàn)[2]Mogensen DN臨床分期標(biāo)準(zhǔn)分為糖尿病腎病Ⅲ期（22例）、Ⅳ期（28例），選取糖尿病無合并腎損傷患者30例，作為糖尿病對照組，并抽取同期醫(yī)院健康體檢者30例作為正常對照組。所有研究對象均排除合并有惡性腫瘤、精神病、感染、心腦血管意外、臨床資料不完善等。糖尿病腎病Ⅲ期組：男8例，女14例，年齡32～46歲，平均（39.95±4.26）歲;糖尿病腎病Ⅳ期組：男13例，女15例，年齡32～46歲，平均（39.42±4.34）歲;糖尿病對照組：男14例，女16例，年齡32～46歲，平均（39.43±4.12）歲;正常對照組：男15例，女15例，年齡32～46歲，平均（38.94±5.01）歲。四組一般資料比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。患者均已簽署相應(yīng)知情同意書，此項目研究已經(jīng)過通過醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會審核。

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本采集 （1）采集四組入組者的血清，選清晨空腹（禁食水8 h）外周血采樣。（2）采集四組入組者尿液標(biāo)本：收集患者新鮮清晨空腹（禁食水8 h）中段尿10 ml，留取于潔凈EP管中，立即于離心10 min（2 500 r/min），取標(biāo)本上清液于Eppendorf管，立即存于-80 ℃冰箱。

1.2.2 觀測指標(biāo)的測定 （1）采用醫(yī)院檢驗科全自動生化分析儀（由深圳市美思康電子有限公司生產(chǎn)，iChem-520），測定四組血清Cr、Urea、Alb水平。（2）采用ELISA方法測定四組的尿B7-1、尿nephrin水平。ELISA試劑盒購于酶聯(lián)生物。按照說明書操作，記錄數(shù)據(jù)。（3）四組入組者eGFR計算方法采用CKD-EPI肌酐公式進(jìn)行，分別計算不同患者入組時及半年后的eGFR水平。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察四組患者足細(xì)胞B7-1水平、尿nephrin水平，并根據(jù)患者足細(xì)胞B7-1水平、尿nephrin水平將糖尿病腎病組分為尿B7-1高表達(dá)組、尿B7-1低表達(dá)組、尿nephrin高表達(dá)組、尿nephrin低表達(dá)組，觀察四組患者半年后eGFR水平[4]。其中尿B7-1、尿nephrin高低表達(dá)的判定標(biāo)準(zhǔn)：尿B7-1高判定標(biāo)準(zhǔn)為≥1.70 IU/ml，低為<1.70 IU/ml;尿nephrin高判定標(biāo)準(zhǔn)為≥3.50 μg/L，低為<3.50 μg/L。

1.4 統(tǒng)計學(xué)處理

采用SPSS 20.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計分析，計量資料以（x±s）表示，采用方差分析，組間兩兩比較采用q檢驗;計數(shù)資料以率（%）表示，采用字2檢驗，P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 所有患者足細(xì)胞B7-1、尿nephrin檢測情況比較

糖尿病腎病Ⅲ期組、糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病對照組及正常對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病腎病Ⅲ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病對照組及正常對照組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），見表1、表2、表3。

2.2 不同尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin表達(dá)水平患者eGFR減低情況比較

糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin高表達(dá)組eGFR降低幅度均大于糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin低表達(dá)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（t=5.225、4.233，P=0.000、0.000），見表4。

3 討論

糖尿病腎病是終末期腎病的重要病因，但目前對糖尿病腎病尚缺少特異性治療[5]。糖尿病腎病Ⅲ期也稱之為持續(xù)性微量白蛋白尿期，糖尿病腎病Ⅳ期則為顯性蛋白尿期，臨床上多以持續(xù)性大量蛋白尿為主要特征，而足細(xì)胞損傷是糖尿病腎病相應(yīng)病變的首發(fā)因素，故此課題對尿B7-1、尿nephrin進(jìn)行深入的研究[6]。

足細(xì)胞也被稱為腎小球臟層上皮細(xì)胞，其屬于腎小球中最大的細(xì)胞，位于腎小球基底膜的最外層，屬于協(xié)同刺激分子[7]。足細(xì)胞B7-1在正常人腎臟足細(xì)胞中無表達(dá)，但在腎小球疾病患者及蛋白尿動物模型中，其表達(dá)上調(diào)。Yu等[8]發(fā)現(xiàn)2型糖尿病患者腎活檢標(biāo)本可檢測到足細(xì)胞B7-1表現(xiàn)，且研究了B7-1在糖尿病腎病中的作用，證實采用阿巴西普治療足細(xì)胞B7-1染色均為陽性的5例局灶性節(jié)段性腎小球硬化患者蛋白尿均得到完全或部分緩解，這說明阿巴西普通過阻斷B7-1與β1整合素的相互作用，保護(hù)β1整合素的活性能夠降低蛋白尿，具有治療蛋白尿的作用。Garin等[9-10]研究也同時印證了這一點(diǎn)。Nehprin為足細(xì)胞表面的特異跨膜黏附蛋白。近年大量研究發(fā)現(xiàn)糖尿病腎病尿nephrin蛋白排泄增加，提示尿nephrin的測定可作為糖尿腎病足細(xì)胞損傷的標(biāo)志物[11]。所以，腎臟足細(xì)胞病變時，可檢出尿液中脫落足細(xì)胞的尿B7-1、尿nephrin表達(dá)。本文結(jié)果顯示，糖尿病腎病Ⅲ期組、糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平均高于糖尿病對照組及正常對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病腎病Ⅳ期組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平高于糖尿病腎病Ⅲ期組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。糖尿病對照組及正常對照組尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin高表達(dá)組eGFR降低幅度均大于糖尿病腎病組尿B7-1、尿nephrin低表達(dá)組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。故尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin在糖尿病Ⅲ期患者中可檢出，對于早期糖尿病腎病的診斷具有舉足輕重的作用。而在糖尿病腎病Ⅳ期患者中尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin水平表達(dá)水平更高。隨訪入組患者半年后情況，提示尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin的高表達(dá)患者eGFR下降更快，提示糖尿病腎病患者足細(xì)胞病變程度，預(yù)示著病情的進(jìn)展。尿足細(xì)胞B7-1、尿nephrin可作為糖尿病腎病患者預(yù)后的監(jiān)測指標(biāo)。鐘正霞等[12]發(fā)現(xiàn)原發(fā)性腎病綜合征患者尿液中可檢測到B7-1表達(dá)，且與預(yù)后具有相關(guān)性，這與本課題組的研究結(jié)論相符合。

綜上所述，尿nephrin、足細(xì)胞B7-1可以作為糖尿病腎病患者早期診斷的重要指標(biāo)，同時尿nephrin、足細(xì)胞B7-1對糖尿病腎病患者的預(yù)后有評估作用。而目前對于尿nephrin的研究較多，但足細(xì)胞B7-1的研究仍需進(jìn)一步深入。尿足細(xì)胞B7-1有望通過進(jìn)一步研究，在臨床檢測中得到廣泛應(yīng)用。

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（收稿日期：2019-04-08） （本文編輯：馬竹君）