陳曉祺

【摘要】目的:通過恒溫擴增技術檢測杭州市第三人民醫院泌尿道感染患者沙眼衣原體RNA(CT-RNA)和解脲脲原體RNA(UU-RNA),分析其感染情況及特點。方法:采集2193例泌尿道感染患者尿液樣本,采用實時熒光恒溫擴增檢測技術(SAT)檢測解脲脲原體RNA和沙眼衣原體RNA。結果:CT陽性率男性明顯高于女性(P
【關鍵詞】泌尿道感染;沙眼衣原體;解脲脲原體;RNA;實時熒光恒溫擴增技術
沙眼衣原體(CT)和解脲脲原體(uu)是經性接觸傳播引起的非淋菌性泌尿生殖道感染(NGU)的主要病原,兩者均可寄生于健康人的泌尿生殖道,當機體免疫力下降時,這些菌群會變成致病菌,從而造成泌尿生殖道感染。以實時熒光恒溫擴增檢測技術檢測病原體RNA,避免了機體殘留病原體DNA核酸片段的干擾,具有較高的靈敏度和特異性。本文探究2193例泌尿道感染患者沙眼衣原體RNA和解脲脲原體RNA檢驗結果,報告如下。
1材料與方法
2016年1月至2017年12月在杭州市第三人民醫院初診為泌尿道感染的患者2193例(男1608例,女585例),最小年齡15歲,最大年齡87歲,平均年齡37.0±12.6歲。
1.2標本采集
取清晨首次尿,或長時間(至少l小時)不排尿后的首段尿2ml,于樣本保存液混合,待測。
1.3檢測方法
采用實時熒光恒溫擴增檢測技術,分核酸提取和核酸檢測兩個步驟。在核酸提取過程中,CT、UU裂解釋放出的核酸與核酸提取液中的磁性顆粒特異性結合,通過清洗磁性顆粒而獲得純凈的靶標核酸(RNA)。實時熒光核酸恒溫擴增檢測技術使用M-MLV反轉錄酶、T7RNA多聚酶和優化探針技術來同時實現。反轉錄酶用于產生靶標核酸(RNA)的一個DNA拷貝,T7RNA多聚酶從DNA拷貝上產生多個RNA拷貝,帶有熒光標記的優化探針和這些RNA拷貝特異性結合,該熒光信號可由檢測儀器捕獲。根據實時熒光信號出現的時間與強度,結合陽性對照和陰性對照對檢驗結果進行判斷。
1.4儀器與試劑
Bio-Rad全自動核酸擴增儀。儀器型號Bio-Rad CFX96。試劑:上海仁度生物科技有限公司生產的沙眼衣原體(cT)核酸檢測試劑盒、解脲脲原體(UU)核酸檢測試劑盒。
1.5統計學處理
所有數據采用SPSS21.0軟件進行處理,率的比較采用卡方檢驗,P<0.05為差異具有統計學意義。
2結果
2.1不同性別泌尿道感染患者CT、UU、CT+UU感染情況
CT陽性率男性高于女性(P<0.001),UU陽性率女性高于男性(P<0.001),CT+UU混合感染陽性率男性高于女性(P<0.001)。詳見表1。
2.2不同年齡段泌尿道感染患者CT、UU、CT+UU感染情況
按照患者年齡進行分組統計,≤25歲年齡組CT、UU、CT+UU陽性率均為最高,>55歲年齡組CT、UU、CT+UU陽性率均為最低。詳見表2。
3討論
(1)CT感染是男性尿道炎常見原因,未經治療者多數轉變為慢性,周期性加重,可合并附睪炎、前列腺炎等。在女性可引起尿道炎、宮頸炎、輸卵管炎、盆腔炎等。UU可引起男性前列腺炎、附睪炎、不育癥,女性可引起泌尿生殖道炎癥、不孕癥,并可感染胎兒導致流產、早產及低體重胎兒。
(2)實時熒光恒溫擴增檢測技術對于檢測CT、UU的敏感性、特異性均很高。樣本保存液中包括去垢劑,高離子濃度能夠抑制RNase活性,盡量保護新鮮樣本里的RNA免受降解。而尿液作為一種非侵入式取樣,可由患者自行取材,一方面減少了醫生的工作量,同時避免拭子取樣的尷尬和痛苦,且可減少醫源性感染。尤其對于男性患者,其優勢更加明顯。
綜上所述,泌尿道感染患者中,CT和UU感染率較高,與性別、年齡因素有關。