高危型HPV感染與宮頸癌前病變及宮頸癌的關系△

林琳，傅亞均，林安平#

1重慶兩江新區第一人民醫院婦產科，重慶401121

2重慶醫科大學附屬第二醫院婦科，重慶400010

宮頸癌是常見的婦科惡性腫瘤，是一個主要的公共衛生問題，尤其是發展中國家的年輕婦女，宮頸癌可由宮頸癌前病變進展而來，嚴重影響女性身體健康[1]。研究顯示，全球宮頸癌發病率在女性惡性腫瘤中僅次于乳腺癌，排名第二，每年新發病例高達50萬[2]，中國宮頸癌發病率在女性惡性腫瘤中居首位，其中，浸潤性宮頸癌好發于45～55歲，宮頸原位癌好發于30～35歲[3]。有學者表示，高危型人乳頭狀瘤病毒（human papilloma virus，HPV）感染是宮頸癌的主要危險因素[4]。HPV的類型、感染數量均與宮頸癌前病變和宮頸癌密切相關。HPV是一種乳頭瘤空泡病毒A屬，屬于多空病毒科，是一種球形DNA病毒，黏膜鱗狀上皮和人類表皮是易感區域。研究顯示，HPV對其他動物無致病性，只感染人類，迄今為止已分離出130多種類型，是宮頸癌前病變和宮頸癌的主要致病因素[5-6]。不同HPV分型的致癌危險性或致病力大小有一定差異，且不同HPV亞型分布特征不同。因此，本研究為探討高危型HPV感染與宮頸癌前病變及宮頸癌發生發展的關系，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2014年10月至2018年6月重慶兩江新區第一人民醫院及重慶醫科大學附屬第二醫院收治的宮頸癌及宮頸癌前病變患者。納入標準：符合宮頸癌前病變或宮頸癌診斷標準[7-8]；既往未服用免疫抑制劑。排除標準：①合并其他婦科惡性腫瘤及免疫性疾??；②既往接受過宮頸手術；③哺乳期、妊娠期婦女。依據納入和排除標準，本研究共納入200例宮頸癌及宮頸癌前病變患者，其中宮頸癌患者51例（作為宮頸癌組），年齡25～51歲，平均年齡為（38.94±4.32）歲；組織學類型：鱗狀細胞癌45例，腺癌6例；宮頸癌前病變患者149例（作為癌前病變組），年齡25～50歲，平均年齡為（38.35±4.27）歲。兩組患者年齡比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.2 標本采集及檢測方法

1.2.1 標本采集患者取截石位，先置入陰道鏡，然后使用無菌醫用棉球在陰道鏡下擦除宮頸表面黏液，放入細胞刷，深度為1.0～1.5 cm，輕輕旋轉8～10圈后，將細胞刷放置于液基細胞洗脫液中充分震動，將液體離心取脫落細胞，制成細胞涂片備用。此外，使用活檢鉗取適量宮頸組織，于液氮中保存備用。

1.2.2 高危型HPV檢測[9]標本采集完成后，使用Step Oue Plus熒光定量聚合酶鏈反應（polymerase chain reaction，PCR）儀對患者進行高危型HPV檢測，嚴格按照說明書操作。

1.2.3 高危型HPV相對表達量檢測[10]取液氮保存的宮頸組織50 mg，通過反轉錄試劑盒與信使RNA（messenger RNA，mRNA）抽提合成互補DNA（complementary DNA，cDNA）第一鏈，再通過PCR擴增試劑盒進行熒光定量檢測，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.4 高危型HPV病毒載量檢測[11]首先檢測系列濃度梯度的標準品建立標準曲線，通過同一儀器對每例標本進行計算，每個HPV陽性標本會生成一個定量值，再通過每例宮頸組織標本的β球蛋白濃度進行計算，從而確定病毒載量。

1.2.5 高危型HPV亞型檢測[12]取宮頸組織抽提基因組RNA后，加熱分解為單鏈核苷酸，采用RNA探針與DNA單鏈的結合，生成RNA-DNA雜交體，通過免疫吸附柱時，RNA-DNA雜交體被特異性抗體固定于微孔壁或試管壁上，將RNA-DNA雜交體與第二抗體結合，使信號放大，采用堿性磷酸酶使酶底物發光，從而判斷以下6種高危型HPV亞型：HPV16、18、31、45、58、52。

1.3 統計學方法

采用SPSS 17.0軟件對數據進行統計分析。計量資料以均數±標準差（±s）表示，組間比較采用t檢驗；計數資料以例數和（%）表示，組間比較采用χ2檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 HPV檢出情況比較

200例患者中共檢出高危型HPV感染患者164例，其中癌前病變組檢出高危型HPV感染患者116例，檢出率為77.85%（116/149），宮頸癌組檢出高危型HPV感染患者48例，檢出率94.12%（48/51），癌前病變組患者高危型HPV感染檢出率明顯低于宮頸癌組患者，差異有統計學意義（χ2=6.810，P＜0.01）。癌前病變組患者高危型HPV相對表達量為（210.47±37.92）ng/L，明顯低于宮頸癌組患者的（325.92±61.46）ng/L，差異有統計學意義（t=15.799，P＜0.01）。癌前病變組患者高危型HPV的病毒載量為（624.82±121.54）RLU/CO，明顯低于宮頸癌組患者的（913.87±164.83）RLU/CO，差異有統計學意義（t=13.316，P＜0.01）。

2.2 高危型HPV亞型分布情況

高危型HPV亞型檢測結果顯示，HPV16型57例，HPV18型34例，HPV31型23例，HPV45型28例，HPV58型16例，HPV52型6例。所有高危型HPV感染患者中，亞型分布以HPV16、HPV18為主，分別占34.75%（57/164）、20.73%（34/164）。癌前病變組患者不同高危型HPV亞型陽性率均明顯低于宮頸癌組患者，差異均有統計學意義（P＜0.01）。（表1）

表1 兩組患者高危型HPV亞型分布情況比較

3 討論

宮頸癌是臨床常見的婦科惡性腫瘤，起源于子宮頸上皮內瘤變，多發于中年女性。隨著人們生活習慣的改變，宮頸癌發病率明顯升高，且越來越趨于年輕化。近年來，女性首次性生活年齡不斷減小，多數年輕女性生殖功能尚未完全發育，首次性生活年齡過小、多次流產或性生活過于頻繁等因素均可能損傷宮頸，從而提高宮頸感染的風險，導致宮頸炎，甚至引發宮頸癌。宮頸癌患者分期不同，其預后也有顯著差異。宮頸癌前病變治愈率較高，其進展為宮頸癌的時間較長，而早期宮頸癌患者預后較好，5年生存率較高，若治療不及時，宮頸癌進展至晚期后，患者的預后較差，遠期生存質量較低[13]。因此，早診斷、早治療是預防或治療宮頸癌的有效手段。

研究顯示，HPV感染是宮頸癌前病變和宮頸癌的致病因素[14]，而HPV感染特別是高危型HPV持續感染極易引發宮頸癌前病變或宮頸癌。HPV感染的主要傳播方式為性傳播，女性HPV的感染率高于男性，在有性生活經歷的女性中，80%可能發生HPV感染，其中大部分感染者無臨床癥狀，可在10個月左右自然清除，但約10%患者可能發生HPV持續感染，從而引發宮頸癌前病變及宮頸癌[15]。研究顯示，高危型HPV感染是宮頸癌前病變及宮頸癌發生發展的必需條件[16]，因此，分析HPV感染在宮頸癌前病變和宮頸癌中的分布情況，可為HPV感染的防治提供依據，對宮頸癌患者治療過程中的隨訪及預后工作也具有重要的意義。本研究結果顯示，宮頸癌前病變患者高危型HPV檢出率為77.85%，明顯低于宮頸癌患者的94.12%，HPV的相對表達量和病毒載量也均明顯低于宮頸癌患者。這可能是因為患者在感染HPV后，病毒DNA可與宿主細胞DNA結合，導致基因組不穩固，從而抑制抑癌基因的表達，促進細胞的增殖和分化，促進宮頸癌的發生，與譚秋梅等[17]的研究結果一致。

HPV感染可根據HPV亞型致癌危險性大小或致病力大小的不同，分為低危型和高危型兩種類型，其中高危型HPV亞型主要包含HPV16、18、31、33、45、52和58等[18]。研究證實，高危型HPV感染是發生宮頸癌前病變及宮頸癌的主要危險因素[19]。本研究結果顯示，高危型HPV亞型以HPV16、HPV18為主，分別占34.75%、20.73%，將兩組患者不同亞型陽性率進行對比，宮癌前病變組患者不同高危型HPV亞型陽性率均明顯低于宮頸癌組患者，差異均有統計學意義（P＜0.05）。表明宮頸癌患者高危型HPV感染發生率明顯更高，進一步證實高危型HPV感染是發生宮頸癌的主要危險因素，與陽宇[20]的研究結果一致。因此，早期檢測HPV感染情況對預防宮頸癌具有重要意義。

綜上所述，宮頸癌前病變及宮頸癌與高危型HPV感染密切相關，高危型HPV持續感染是宮頸癌前病變及宮頸癌主要致病因素，因此，早期檢測HPV感染情況對預防宮頸癌前病變及宮頸癌具有重要意義。