高效液相色譜檢測水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量

佟曉波 孫曉娟 張京華

摘要：本文建立了水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量的高效液相色譜（HPLC）的檢測方法。該方法操作簡便，準(zhǔn)確度高，適用于水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留檢測。

關(guān)鍵詞：高效液相色譜;水產(chǎn)品;甲氧芐啶

目前，水產(chǎn)品中甲氧芐啶的檢測方法主要有紫外分光光度法[4-5]、吸附溶出伏安法[6]、液相色譜法等[7-9]。本文以市售的鮮魚為研究對象，對其中的甲氧芐啶檢測前處理?xiàng)l件進(jìn)行了選擇和優(yōu)化，高效液相色譜紫外檢測器檢測條件的建立和優(yōu)化，建立了高效液相色譜法檢測水產(chǎn)品中甲氧芐啶的方法。

結(jié)果與討論

樣品前處理?xiàng)l件的優(yōu)化

（1）提取溶劑的選擇。水產(chǎn)品基質(zhì)復(fù)雜，且含有較多的脂肪和蛋白等成分，而甲氧芐啶屬于弱堿性化合物，易溶于酸性溶液，而純水相的提取液在凈化時(shí)易出現(xiàn)乳化，不利于分層，因此本研究中選擇酸化的甲醇作為提取液。考慮樣品基質(zhì)中含有蛋白，硫酸具有一定的沉淀蛋白的作用，因此選擇硫酸化的甲醇溶液，分別考察了甲醇-硫酸體積比為7：3、6：4、5：5、4：6、3：7時(shí)對水產(chǎn)品中甲氧芐啶的提取效果，當(dāng)比例為7：3時(shí)效果最好，因此最終選擇甲醇-硫酸體積比7：3的溶液作為提取液。

（2）凈化條件的優(yōu)化。在酸性條件下，甲氧芐啶幾乎不溶于三氯甲烷，而水產(chǎn)品中含有較多的脂肪、蛋白和部分色素等，三氯甲烷可以除去脂。分別考察了在提取過程中和提取之后加入三氯甲烷的凈化和回收效果，發(fā)現(xiàn)在提取過程中加入三氯甲烷，首次提取液未見溶入三氯甲烷，但在第二次提取過程中，有部分三氯甲烷溶于提取液中，提取液體積明顯大于理論加入體積，最終造成提取液中溶入了三氯甲烷相，引入雜質(zhì)，凈化效果變差，同時(shí)因雜質(zhì)的引入，使得回收率不到70.0%;與此同時(shí)我們在提取過程之后向合并后的提取液中加入三氯甲烷，未發(fā)現(xiàn)有三氯甲烷相溶于提取液中的情況，且回收率均在80.0%以上，因此選擇在提取過程之后加入三氯甲烷進(jìn)行凈化。

（3）線性方程與定量限。按照1.4項(xiàng)的方法配制6水平標(biāo)準(zhǔn)曲線，并在優(yōu)化色譜條件下進(jìn)行檢測，以甲氧芐啶的峰面積為縱坐標(biāo)，甲氧芐啶的濃度為橫坐標(biāo)繪制曲線，甲氧芐啶的線性范圍為0.05～1.0 μg/mL，相關(guān)系數(shù)r為0.9998，線性關(guān)系良好，定量限為15 μg/kg。

（4）回收率和精密度。在空白樣品中添加甲氧芐啶標(biāo)準(zhǔn)溶液，制備含量分別為20、40和200 μg/kg的加標(biāo)樣品，按照1.4項(xiàng)處理方法及儀器測定條件進(jìn)行測試，每個(gè)添加水平平行測定6份，結(jié)果見表1。各化合物的平均回收率為80.2～91.7%，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1～1.7%，采用本方法檢測水產(chǎn)品中的甲氧芐啶含量，準(zhǔn)確度和精密度均較好。

采用本研究建立的檢測方法，對市售的10批次鮮魚進(jìn)行檢測，其中3批檢出甲氧芐啶，但檢出值均小于農(nóng)業(yè)部235號公告附錄2：已批準(zhǔn)的動(dòng)物性食品中最高殘留限量規(guī)定的限量要求50 g/kg范圍內(nèi)，可以放心食用。

結(jié)論

本研究采用酸化的甲醇提取水產(chǎn)品中甲氧芐啶，用三氯甲烷除脂等雜質(zhì)，二氯甲烷反萃取的方法，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，精密度高，重現(xiàn)性好。與國家標(biāo)準(zhǔn)《GB 29702-2013水產(chǎn)品中甲氧芐啶殘留量的測定》相比，操作簡單、快速，除雜效果更優(yōu)，適用于食品檢驗(yàn)檢測機(jī)構(gòu)進(jìn)行水產(chǎn)品中的甲氧芐啶的檢測。