液質譜聯用技術在黑茶溯源研究中的應用

羅達龍

（廣西梧州市食品藥品研究所，廣西梧州 543002）

1 引言

黑茶是我國六大茶類之一[1]，按地域劃分主要有：涇渭茯茶、湖南安化黑茶、四川藏茶、云南黑茶（普洱茶）、廣西六堡茶等。由于黑茶都屬于后發酵茶，茶湯均具有紅、亮特點。目前，黑茶的研究主要集中在黑茶的香氣成分[2-4]、品質化學成分[5]以及黑茶鑒別等方法，采用黑茶水溶性成分進行黑茶的鑒別研究較少，而且，對黑茶鑒別和品種評判多依賴于感官評價，缺少先進科學儀器分析的客觀判斷。

液質聯用技術多用于食品檢測，具有精密度高、穩定性好、重復性優等特點，但極少用于茶葉的品種鑒別研究上，本實驗采用該方法分析5種黑茶的水溶性成分，為黑茶辨別、溯源進一步研究提供理論依據。

2 材料與方法

2.1 儀器與試劑

安捷倫1290-6550C液相色譜-四極桿飛行時間質譜聯用儀；超純水器（ELGA PURELAB ClassicUVF）；乙腈（質譜級，美國歐姆尼公司），其它試劑均為分析純（國藥集團化學試劑有限公司）。實驗用水為經ELGA PURELAB ClassicUVF凈化系統過濾的去離子水。茶葉信息：涇渭茯茶4批次，湖南安化黑茶4批次，四川藏茶4批次，云南普洱茶4批次，廣西六堡茶4批次。

2.2 色譜條件

色譜柱：Agilent poroshell 120 EC-C18（3.0×100mm 2.7 μm）；進樣量：5μl；流速：0.3ml/min；流動相：A：0.1%甲酸-5mmol/L 乙酸銨水溶液，B：乙腈，梯度洗脫見表1。

表1 梯度洗脫程序表

2.3 質譜條件

離子源：ESI+，掃描范圍：100～1700amu，采集頻率：3 張/秒；參比離子（amu）：121.0509，322.0481，922.0098，1221.9906，1521.9715。

2.4 供試樣品前處理

取各代表性茶樣3.0g置具塞三角瓶中，加入150ml沸騰去離子水，超聲20分鐘，濾液取1ml，置于100ml容量瓶中，加去離子水稀釋并定容，搖勻，過濾，上LC-QTOF測定。

2.5 空白對照前處理

不添加茶樣，取沸騰去離子水同“2.4”同步處理。

2.6 統計學分析

獲得各代表性茶樣的TIC圖后，利用統計學軟件作主成分分析，以初步獲得各代表茶樣之間的差異性與雷同性。

3 結果與討論

主成分分析可以有效地將多維變量進行降維處理，篩選出最少的可以代表復雜的待分析數據，刪除無用信息，從而將分析簡單化。由于黑茶的水溶性成分較多且復雜，難以用單種或極少幾種的化合物去評價分析，所以本實驗利用液質聯用技術對黑茶的水溶性成分獲取足夠的信息量后，配合統計學軟件對原始數據做主成分分析圖，見圖1，由主成分分析散點圖可以看出，原始數據經過統計學處理后，不同茶種能有效區分，而相同的茶種又能有效聚集,能為黑茶進一步研究和溯源開發提供理論依據。

圖1 5種黑茶主成分分析散點圖